1

实验准备

1. 试剂盒组分（R1、R2、标准品、质控品）室温平衡 15-20 分钟；

2. 处理待测样本（血清 / 血浆 / 匀浆等），按需稀释；

3. 校准微量加样枪，设置酶标仪检测波长

1. 试剂避免反复冻融；

2. 样本无溶血、脂血；

3. 吸头一次性使用

2

微量加样

反应板各孔加样（单孔用量）： - 空白孔：稀释液 20μL + R1 100μL； - 标准 / 质控孔：标品 / 质控品 20μL + R1 100μL； - 样本孔：样本 20μL + R1 100μL；轻1. 严格控制温育温度与时间；

2. 反应板加盖防液体蒸发轻混匀，室温孵育 5 分钟

1. 加样顺序不可颠倒；

2. 吸头勿接触孔壁，防止挂壁；

3. 避免试剂交叉污染

3

温育反应

各孔加 R2 20μL，混匀后 37℃温育 10-15 分钟（按说明书调整）

1. 严格控制温育温度与时间；

2. 反应板加盖防液体蒸发

4

终止反应

加终止液 20μL，轻柔混匀

1. 终止液为强酸 / 强碱，需戴手套操作；

2. 快速加样，保证各孔反应同步终止

5

吸光度测定

酶标仪以空白孔调零，测定各孔 OD 值

1. 测定前确认孔底无气泡、污渍；

2. 终止反应后 10 分钟内完成检测

6

结果计算

1. 计算 ΔOD=OD 样本 / 标品 - OD 空白；

2. 以标品浓度为横坐标、ΔOD 为纵坐标绘制标准曲线；

3. 样本浓度 = 曲线查得浓度 × 稀释倍数

1. 标准曲线 R2≥0.99；

2. 质控结果需在合格范围内

7

实验收尾

1. 按生物安全规范处理反应废液2. 剩余试剂密封后冷藏保存；

3. 清洗反应板 / 器材

1. 试剂开封后尽快用完；

2. 废弃物分类处置，避免污染