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| 产地 | 上海 |
| 品牌 | DUMABIO |
| 货号 | DM-CO21011 |
| 用途 | 科研实验 |
| 包装规格 | 100管/96样 |
| 纯度 | 电询% |
| CAS编号 | |
| 是否进口 | 否 |
NADP-苹果酸酶(Malic enzyme,NADP-ME)试剂盒
微量法100管/96样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
测定原理:
NADP-ME催化NADP+还原成NADPH,在340nm下测定NADPH增加速率。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:100mL×1瓶,4℃保存。;
试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存; 临用前加入20mL试剂一充分振荡,溶解待用,用不完的试剂分装后-20度保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分振荡,溶解待用,用不完的试剂分装后-20度保存,禁止反复冻融。
生化试剂盒的核心分类
按检测原理和目标物类型,可分为以下几大类,覆盖多数实验场景:
1. 代谢物检测试剂盒用于检测xue糖、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、尿酸、乳酸、丙酮酸等小分子代谢物,原理多为终点比色法 / 速率比色法。例如血tang试剂盒通过葡萄糖氧化酶(GOD)- 过氧化物酶(POD)偶联反应,生成有色物质,吸光度与葡萄糖浓度正相关。
2. 酶活性检测试剂盒适用于 SOD、CAT、POD、LDH、ALT、AST 等酶活性测定,以速率法为主。通过监测酶促反应过程中底物或产物的吸光度变化速率,计算酶活性单位(U)。比如 SOD 试剂盒利用氮蓝四唑(NBT)光还原法,SOD 抑制 NBT 还原的程度与酶活性相关。
3. 蛋白定量试剂盒包括 BCA、Bradford、Lowry 法试剂盒,其中微量 BCA 试剂盒适合样本量少的场景。BCA 法基于碱性条件下蛋白与 Cu2?结合,还原 BCA 试剂生成紫色复合物,在 562nm 处有特征吸收峰。
4. 离子检测试剂盒用于检测钙、磷、钾、钠等无机离子,如钙试剂盒通过钙与偶氮砷 Ⅲ 结合生成有色络合物,进行比色定量。
生化试剂盒的保存条件
生化试剂盒的保存需严格遵循说明书要求,核心原则是按组分类型分类保存、避免反复冻融、控制温度波动,具体条件如下:
通用保存温度分类
2~8℃冷藏保存:适用于多数常规试剂组分,如缓冲液、底物液(非酶类)、稀释液、显色剂等。这类试剂对温度相对不敏感,冷藏可维持其化学稳定性,避免室温下成分降解。
-20℃冷冻保存:适用于酶类试剂(如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶)、标准品、质控品、抗体 / 抗原等生物活性成分。冷冻可抑制酶活性衰减和蛋白降解,需注意分装为小体积,防止反复冻融导致活性丧失。
-80℃超低温保存:针对特殊敏感组分(如 RNA 酶抑制剂、高活性蛋白、稀有标准品),长期保存需超低温环境,降低分子运动速率,延长保质期。
室温保存(15~25℃): 部分稳定性极高的组分,如干燥剂、终止液(强酸 / 强碱类)、固体试剂等,需密封置于阴凉干燥处,避免潮湿和阳光直射。
关键保存注意事项
避免反复冻融:冷冻试剂 解冻后,建议按需分装成若干小份,后续使用时仅解冻所需量,反复冻融会破坏蛋白和酶的空间结构,导致活性下降。
避光保存:显色剂、荧光底物、酶标记物等对光照敏感,需用棕色瓶或锡箔纸包裹容器,防止光照引发氧化反应,影响试剂性能。
密封防污染:所有试剂瓶需拧紧瓶盖,防止挥发、渗漏或微生物污染;开封后建议标注开封日期,优先使用。
温度稳定性控制:转运或取放试剂时,需使用冰袋或低温保温箱,缩短室温暴露时间(<30 min);避免将试剂置于冰箱冷冻室与冷藏室交界处,防止温度反复波动。
特殊组分单独保存:部分试剂盒含易挥发(如有机溶剂)、易潮解组分,需单独密封存放,必要时放置干燥剂。