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猪(Porcine)黄体生成素(LH)ELISA检测试剂盒
  • 品牌:DUMABIO
  • 产地:上海
  • 型号:48/96T
  • 货号:DM-P7418
  • 价格: ¥1860/千克
  • 发布日期: 2026-08-07
  • 更新日期: 2026-08-07
产品详请
产地 上海
保存条件 2~8°
品牌 DUMABIO
货号 DM-P7418
用途 ELISA
检测方法 电询
保质期 6个月
适应物种
检测限 电xvn
数量 999
包装规格 48/96T
标记物 电询
样本 体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等
应用 科研实验
是否进口

猪(Porcine)黄体生成素(LH)ELISA检测试剂盒

产品货号:DM-P7418
产品规格:48/96T
上海笃玛生物科技有限公司是国内专注科研 ELISA 试剂盒的本土高新企业,具备成熟抗原‑抗体自研配对平台,试剂盒检测性能稳定,指标覆盖物种广、冷门指标储备丰富,上万种试剂常备现货,可实现国产替代,价格相比进口更有优势,同时配套 ELISA 样本代测、各类实验外包 CRO 服务,支持多类型样本检测,周期灵活可加急,出具可用于论文发表的实验报告,还兼顾进口试剂代理,实现科研试剂采购一站式搞定,技术团队全程跟进实验技术支持,广泛服务高校、医院科研院所与生物医药企业
ELISA 即酶联免疫吸附实验,是科研中最常用的蛋白定量检测技术,核心原理利用抗原和抗体的特异性免疫结合,再通过酶催化底物发生显色反应,颜色深浅与样本中目标蛋白的含量成正比,借助酶标仪读取吸光值,结合标准曲线就能算出样本里待测物质的浓度;它操作简便、通量高,可检测血清、组织匀浆、细胞上清、尿液等多种样本。
ELISA试剂盒的四大原理

试剂盒的组成

ELISA试剂盒标准操作流程(双抗体夹心为列)
ELISA 核心原理基于抗原与抗体的特异性结合以及酶高效催化显色反应,双抗体夹心 ELISA 采用一对识别抗原不同位点的配对抗体,预包被在微孔板内的捕获抗体结合样本中的靶抗原,再与生物素化检测抗体形成夹心复合物,通过 HRP 标记链霉亲和素结合生物素完成信号标记,HRP 催化 TMB 底物产生显色反应,抗原浓度越高显色越深,酶标仪测定吸光度值,结合标准曲线即可实现靶抗原定量检测。

样本前处理
ELISA 样本前处理原理是通过离心去除样本中的细胞碎片、沉淀颗粒等杂质,避免杂质干扰抗原抗体结合与造成非特异性吸附,根据样本抗原浓度进行适度稀释,使待测物浓度落在试剂盒标准曲线有效检测区间内,同时减少样本基质中的蛋白酶、抑制物对免疫反应的干扰,维持反应体系稳定,保障后续抗原抗体特异性结合顺利开展,降低实验背景,提升检测结果准确性。

加样与孵育
加样就是把标准品、待测样品和反应试剂依次加到酶标板孔内,保证每孔加入量准确均一。孵育则是给分子相互作用留出反应时间,维持合适温度,让目标物质充分发生特异性结合。温度不够、时间不足会导致结合不充分,时间过长又容易产生非特异吸附,直接影响最终检测结果。
洗板(核心关键步骤)
洗板是 ELISA 实验里的关键操作,通过缓冲液冲洗孔板,冲掉没有结合的游离物质,减少多余分子带来的干扰。洗板次数、浸泡时间都会影响背景信号,冲洗过度可能冲掉有效结合组分,冲洗不足会造成读数失真,是保障数据准确的重要步骤。



加酶结合物与二次孵育
向微孔板加入 HRP 标记链霉亲和素,链霉亲和素能够与免疫复合物上的生物素特异性结合,使标记酶富集在夹心复合物上完成信号标记,二次孵育提供适宜温度与充足反应时间,促进二者充分结合,孵育完成后充分洗板去除未结合的游离酶结合物,防止多余酶造成背景升高,保证后续显色强度和靶抗原浓度呈良好对应关系。


二次洗板

二次洗板是酶结合物孵育结束后的关键净化步骤,主要用于 洗脱微孔内未成功结合生物素的游离 HRP 酶标试剂、残留杂蛋白与反应体系杂质,杜绝游离酶残留引发的非特异性底物催化反应,有效降低实验背景干扰、规避假阳性结果。规范操作下全程洗涤 5 次,每次加入洗涤液充分浸润孔底与孔壁 30 秒,使残留杂质充分溶解洗脱,随后 弃液、吸水纸拍干孔内残留液体,避免稀释后续底物试剂、破坏反应体系平衡,精准保障后续显色强度仅与特异性结合的夹心免疫复合物数量成正比,大幅提升 ELISA 检测的精准度与重复性。


底物显色

向微孔内加入 TMB 底物溶液,在适宜温度条件下避光开展反应,固定在免疫复合物上的 HRP 能够催化底物发生氧化反应并呈现蓝色,样本内靶抗原含量越高,结合的酶分子数量越多,显色就越深;需要统一控制显色时长,防止显色不足或者过度饱和影响线性关系,整个过程避光操作,避免底物自发氧化产生本底颜色干扰实验结果,显色完成后及时加入终止液结束酶促反应。
终止反应与读数
加入终止液可以快速改变反应体系酸碱度,直接抑制 HRP 酶活性,立刻终止酶促显色反应,孔内蓝色产物随之转变为稳定的黄色,保证各孔显色程度不再发生变化,消除因显色时长差异带来的误差;终止完成后需在规定时间内使用酶标仪检测吸光度,选择 450nm 为主检测波长,可搭配 630nm 参考波长校正孔板背景与光学干扰,读取的 OD 值将用于构建标准曲线,进而换算出样本中靶抗原浓度。


数据处理

先整理所有孔的 OD 数值,剔除复孔中偏差过大的异常数据,计算各组复孔平均 OD 值,扣除空白孔 OD 值得到校正后吸光度;以标准品浓度为横坐标、对应的校正 OD 值为纵坐标,采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线;将样本校正 OD 值代入曲线公式,算出稀释后样本浓度,再乘以样本预先设置的稀释倍数,最终得到原始样本中靶抗原真实浓度,同时结合曲线相关系数判断本次实验数据是否有效。


ELISA试剂盒核心性能评价指标

1.灵敏度:试剂盒能够检出的 待测物浓度,数值越低,检出能力越强。

2.精密度:分为批内、批间变异系数 CV,反映结果重复性,CV 值越小,重复检测数据越接近。3.特异性:看试剂盒与其他相近物质的交叉反应,交叉反应越低,越不容易误判。

4.回收率:向样本中加入已知量目标物,实测值和理论值的比值,体现样本基质对检测的干扰程度。

5.线性范围:试剂盒可以准确检测的浓度区间,样品浓度要落在该区间内,数据才可靠。

6.稳定性:试剂盒在规定储存条件下,性能可以维持的有效期。


结果计算

汇总各组标准品与待测样本的吸光度数据,剔除复孔中偏差较大的异常数值并计算平均 OD 值,扣除空白孔吸光度得到校正 OD 值,以标准品浓度为横坐标、校正 OD 值为纵坐标采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线并检验拟合相关系数,随后将待测样本校正 OD 值代入曲线方程反算出稀释后浓度,再乘以实验设置的样本稀释倍数得到原始样本中待测物真实浓度,若样本计算浓度超出标准曲线有效检测区间,则需要调整稀释比例重新检测以保障结果可靠。

(图片仅供参考)
售后服务
上海笃玛生物科技有限公司拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系我们的技术顾问,我们将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
企业介绍:
上海笃玛生物科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业总部位于上海,并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“笃玛生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,拥有专业的研发和质量检测团队以及先进的仓储和物流系统。“笃玛生物”已经得到全国科研工作者的认可。

公司拥有一批专业的研发人员,我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广,品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时,提供各种常规生化试剂,库存常备产品多达10000多种,可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面,谨记公司信念:质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程,科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序,我们恪守对每一位用户的承诺:用专业的态度做专业的品牌。同时,公司组建了一支专业的技术服务队伍,能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买笃玛生物产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。

科普:


作为固相免疫定量手段,ELISA 区别于单纯的蛋白定性实验,它依靠免疫复合物在固相载体上的富集实现信号转换,体系中游离的干扰物质会通过洗板步骤被剥离,仅保留特异性结合的组分参与后续酶促反应;该技术的灵敏度很大程度取决于标记酶的信号放大能力,即便极低浓度的靶蛋白也能够产生可检测的光信号,但基质干扰、蛋白降解以及抗体的交叉反应,都容易带来假阳性或假阴性,因此实验过程中需要同步设置各类对照孔,以此评判整套检测体系是否可靠。


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