产品展厅
兔(Rabbit)结合珠蛋白(HP)ELISA检测试剂盒
  • 品牌:DUMABIO
  • 产地:上海
  • 型号:48/96T
  • 货号:DM-R12147
  • 价格: ¥1860/千克
  • 发布日期: 2026-08-07
  • 更新日期: 2026-09-20
产品详请
产地 上海
保存条件 2~8°
品牌 DUMABIO
货号 DM-R12147
用途 ELISA
检测方法 电询
保质期 6个月
适应物种
检测限 电xvn
数量 999
包装规格 48/96T
标记物 电询
样本 体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等
应用 科研实验
是否进口

兔(Rabbit)结合珠蛋白(HP)ELISA检测试剂盒

产品货号:DM-R12147
产品规格:48/96T
上海笃玛生物科技有限公司坐落于上海,主打实验室科研试剂研发与售卖业务,还可承接实验检测委托工作。拥有自研原料生产线和规范化品质管控流程,产品性价比更高,技术咨询回复效率快,合作群体为高校、科研院所、生物研发企业,产品 实验室科研场景使用。
利用生物分子专属配对特性结合酶催化显色原理完成检测,灵敏度和辨识度较佳,能够一次性批量检测多份试样;操作简便,无需大型精密设备,整体开销适中,可判定目标物质有无、测算具体含量,适配多种液态实验样品。检测结果容易受样品品质影响,数值测定范围存在局限,检测精细度比不上发光类检测方式,多用于实验室基础探究。
ELISA试剂盒的四大原理

试剂盒的组成

ELISA试剂盒标准操作流程(双抗体夹心为列)

预先在微孔板上固定捕获分子,再封闭板面多余吸附空位;加入标准试样与待测试样恒温静置,目标物质和板面分子结合后清洗板面;放入酶标记分子再次恒温静置,形成夹心分子结构,再次洗涤去除多余游离物质;加入显色试剂避光反应,随后终止显色,仪器读取光度数值,参照标准曲线算出试样内目标物质含量。

样本前处理
样本前处理主要是去除样品里的碎片、沉淀物等干扰杂质,通过离心获取澄清液体,避免颗粒物质吸附在酶标板孔内造成背景偏高;同时规避反复冻融防止待测蛋白降解,必要时对样品进行适度稀释,使待测物质处于试剂盒可检测范围,减少基质带来的检测偏差。液态试样经过离心处理,提取上层澄清液体;固态试样研磨搅匀后再离心获取上清液;全程低温储存,避免样品内部成分发生变质,浑浊、变质失效的样品直接丢弃,处理合格才可投入后续检测。


加样与孵育
加样时准确吸取标准品与待测样品依次加入酶标板,尽量缩短加样时长,减小孔间反应时间差;孵育阶段维持恒定温度,保证免疫分子充分接触发生结合,避免板位受强光直射,孵育结束后立刻进入下一步,防止非特异性吸附不断累积影响实验结果。


洗板(核心关键步骤)

每个孔洞加满洗涤液后倒净,重复数次操作,将微孔板倒扣拍打,排尽内部残留液体,冲刷掉未发生特异性结合的多余物质,减少无效吸附带来的数据偏差。



加酶结合物与二次孵育
向各孔洞加入酶标记试剂,轻晃微孔板使液体均匀铺满孔底,恒温环境静置一段时间,标记分子与待测物质相互结合,搭建完整夹心结构;孵育结束后开展洗板工作,完全清除没有结合的游离标记试剂。


二次洗板

二次洗板是酶结合物孵育结束后的关键净化步骤,主要用于 洗脱微孔内未成功结合生物素的游离 HRP 酶标试剂、残留杂蛋白与反应体系杂质,杜绝游离酶残留引发的非特异性底物催化反应,有效降低实验背景干扰、规避假阳性结果。规范操作下全程洗涤 5 次,每次加入洗涤液充分浸润孔底与孔壁 30 秒,使残留杂质充分溶解洗脱,随后 弃液、吸水纸拍干孔内残留液体,避免稀释后续底物试剂、破坏反应体系平衡,精准保障后续显色强度仅与特异性结合的夹心免疫复合物数量成正比,大幅提升 ELISA 检测的精准度与重复性。


底物显色

向微孔内加入 TMB 底物溶液,在适宜温度条件下避光开展反应,固定在免疫复合物上的 HRP 能够催化底物发生氧化反应并呈现蓝色,样本内靶抗原含量越高,结合的酶分子数量越多,显色就越深;需要统一控制显色时长,防止显色不足或者过度饱和影响线性关系,整个过程避光操作,避免底物自发氧化产生本底颜色干扰实验结果,显色完成后及时加入终止液结束酶促反应。
终止反应与读数
加入终止液可以快速改变反应体系酸碱度,直接抑制 HRP 酶活性,立刻终止酶促显色反应,孔内蓝色产物随之转变为稳定的黄色,保证各孔显色程度不再发生变化,消除因显色时长差异带来的误差;终止完成后需在规定时间内使用酶标仪检测吸光度,选择 450nm 为主检测波长,可搭配 630nm 参考波长校正孔板背景与光学干扰,读取的 OD 值将用于构建标准曲线,进而换算出样本中靶抗原浓度。


数据处理

先整理所有孔的 OD 数值,剔除复孔中偏差过大的异常数据,计算各组复孔平均 OD 值,扣除空白孔 OD 值得到校正后吸光度;以标准品浓度为横坐标、对应的校正 OD 值为纵坐标,采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线;将样本校正 OD 值代入曲线公式,算出稀释后样本浓度,再乘以样本预先设置的稀释倍数,最终得到原始样本中靶抗原真实浓度,同时结合曲线相关系数判断本次实验数据是否有效。


ELISA试剂盒核心性能评价指标

1.灵敏度:试剂盒能够检出的 待测物浓度,数值越低,检出能力越强。

2.精密度:分为批内、批间变异系数 CV,反映结果重复性,CV 值越小,重复检测数据越接近。3.特异性:看试剂盒与其他相近物质的交叉反应,交叉反应越低,越不容易误判。

4.回收率:向样本中加入已知量目标物,实测值和理论值的比值,体现样本基质对检测的干扰程度。

5.线性范围:试剂盒可以准确检测的浓度区间,样品浓度要落在该区间内,数据才可靠。

6.稳定性:试剂盒在规定储存条件下,性能可以维持的有效期。


结果计算

汇总各组标准品与待测样本的吸光度数据,剔除复孔中偏差较大的异常数值并计算平均 OD 值,扣除空白孔吸光度得到校正 OD 值,以标准品浓度为横坐标、校正 OD 值为纵坐标采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线并检验拟合相关系数,随后将待测样本校正 OD 值代入曲线方程反算出稀释后浓度,再乘以实验设置的样本稀释倍数得到原始样本中待测物真实浓度,若样本计算浓度超出标准曲线有效检测区间,则需要调整稀释比例重新检测以保障结果可靠。

(图片仅供参考)
售后服务
上海笃玛生物科技有限公司拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系我们的技术顾问,我们将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
企业介绍:
上海笃玛生物科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业总部位于上海,并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“笃玛生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,拥有专业的研发和质量检测团队以及先进的仓储和物流系统。“笃玛生物”已经得到全国科研工作者的认可。

公司拥有一批专业的研发人员,我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广,品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时,提供各种常规生化试剂,库存常备产品多达10000多种,可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面,谨记公司信念:质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程,科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序,我们恪守对每一位用户的承诺:用专业的态度做专业的品牌。同时,公司组建了一支专业的技术服务队伍,能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买笃玛生物产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。

科普:

ELISA 全称酶联免疫吸附测定,是生物实验室常用的检测手段。依靠两类生物分子专属结合特性,借助酶的催化作用让显色试剂产生色彩变化,颜色深浅对应试样中目标物质的含量多少。这项技术批量检测效率高、上手难度小、适用试样种类多、成本实惠,多用于各类生物活性物质测定;但样品状态、操作细节都会影响最终数据,检测精度存在上限,主要应用在各类基础科研领域。


联系方式
手机:15587230602
手机:15559619545
手机:15214367449
手机:15974848712
Q Q:
微信扫一扫