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兔(Rabbit)C-反应蛋白(CRP)ELISA检测试剂盒
  • 品牌:DUMABIO
  • 产地:上海
  • 型号:48/96T
  • 货号:DM-R12149
  • 价格: ¥1860/千克
  • 发布日期: 2026-08-10
  • 更新日期: 2026-09-14
产品详请
产地 上海
保存条件 2~8°
品牌 DUMABIO
货号 DM-R12149
用途 ELISA
检测方法 电询
保质期 6个月
适应物种
检测限 电xvn
数量 999
包装规格 48/96T
标记物 电询
样本 体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等
应用 科研实验
是否进口

兔(Rabbit)C-反应蛋白(CRP)ELISA检测试剂盒

产品货号:DM-R12149
产品规格:48/96T
上海笃玛生物这家企业坐落于上海,主打科研实验配套试剂研发售卖,同时承接各类实验检测委托业务,自有原料生产与品质管控环节,产品性价比更高,技术答疑跟进效率快,服务各大院校、科研院所与研发企业,产品 实验室科研使用。
依靠生物分子专属配对特性结合酶促显色原理完成检测,分辨效果好、灵敏度可观,能够一次性批量处理多份样品,操作简单,无需大型专业设备,花费适中,可测算物质含量高低,适配多种液态实验样品;检测结果易受样品状态干扰,数值区间有局限,精细程度比不上高端发光检测方式,多用于实验室基础研究。


ELISA试剂盒的四大原理


试剂盒的组成
ELISA试剂盒标准操作流程(双抗体夹心为列)

酶标板预先固定捕获分子并遮盖空余吸附位点,放入校准样品和待测样品恒温静置,待测物质与板上分子结合后清洗板面;加入酶标记分子再次恒温静置,组合形成夹心结构,再次清洗多余游离物质;加入显色试剂避光静置显色,结束后终止反应,仪器读取数值,对照校准曲线算出样品内物质含量。

样本前处理
样本前处理主要是去除样品里的碎片、沉淀物等干扰杂质,通过离心获取澄清液体,避免颗粒物质吸附在酶标板孔内造成背景偏高;同时规避反复冻融防止待测蛋白降解,必要时对样品进行适度稀释,使待测物质处于试剂盒可检测范围,减少基质带来的检测偏差。血液样本离心获取上清液,组织经研磨匀浆后离心取上清,全程低温存放防止蛋白降解,剔除溶血、浑浊不合格样本,处理完成后即可用于检测。液态样品通过离心获取上层清液,固态样品研磨混匀后再离心收取上清液体,全程低温存放避免样品成分变质,浑浊、破损失效样品直接舍弃,处理完毕才可用于后续检测。


加样与孵育
把梯度校准液和处理完毕的待测样品依次加入微孔板,恒温环境静置放置,让目标物质和板底固定分子充分结合,静置结束倒出孔内液体。


洗板(核心关键步骤)

每孔加满清洗液体后倒掉,重复数次操作,将板子倒扣拍净内部残留液体,冲刷掉没有结合的多余物质,减少无关吸附带来的数据偏差。



加酶结合物与二次孵育
向微孔内倒入酶标记结合试剂,轻微晃动板子使液体分布均匀,恒温环境静置一段时间,让标记分子和待测物质相互结合,搭建完整夹心组合;静置完成后进行洗板, 清除未发生结合的游离标记试剂。


二次洗板

二次洗板重点清除游离的酶标记结合物,要把控拍干力度,孔内不能留存洗板液,也不能让孔膜出现干燥,孔板干涸会引发不可逆的非特异吸附,进而造成整体背景异常升高,直接干扰显色结果的真实性。


底物显色

向微孔内加入 TMB 底物溶液,在适宜温度条件下避光开展反应,固定在免疫复合物上的 HRP 能够催化底物发生氧化反应并呈现蓝色,样本内靶抗原含量越高,结合的酶分子数量越多,显色就越深;需要统一控制显色时长,防止显色不足或者过度饱和影响线性关系,整个过程避光操作,避免底物自发氧化产生本底颜色干扰实验结果,显色完成后及时加入终止液结束酶促反应。
终止反应与读数
加入终止液可以快速改变反应体系酸碱度,直接抑制 HRP 酶活性,立刻终止酶促显色反应,孔内蓝色产物随之转变为稳定的黄色,保证各孔显色程度不再发生变化,消除因显色时长差异带来的误差;终止完成后需在规定时间内使用酶标仪检测吸光度,选择 450nm 为主检测波长,可搭配 630nm 参考波长校正孔板背景与光学干扰,读取的 OD 值将用于构建标准曲线,进而换算出样本中靶抗原浓度。


数据处理

先整理所有孔的 OD 数值,剔除复孔中偏差过大的异常数据,计算各组复孔平均 OD 值,扣除空白孔 OD 值得到校正后吸光度;以标准品浓度为横坐标、对应的校正 OD 值为纵坐标,采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线;将样本校正 OD 值代入曲线公式,算出稀释后样本浓度,再乘以样本预先设置的稀释倍数,最终得到原始样本中靶抗原真实浓度,同时结合曲线相关系数判断本次实验数据是否有效。


ELISA试剂盒核心性能评价指标

1.灵敏度:试剂盒能够检出的 待测物浓度,数值越低,检出能力越强。

2.精密度:分为批内、批间变异系数 CV,反映结果重复性,CV 值越小,重复检测数据越接近。3.特异性:看试剂盒与其他相近物质的交叉反应,交叉反应越低,越不容易误判。

4.回收率:向样本中加入已知量目标物,实测值和理论值的比值,体现样本基质对检测的干扰程度。

5.线性范围:试剂盒可以准确检测的浓度区间,样品浓度要落在该区间内,数据才可靠。

6.稳定性:试剂盒在规定储存条件下,性能可以维持的有效期。


结果计算

汇总各组标准品与待测样本的吸光度数据,剔除复孔中偏差较大的异常数值并计算平均 OD 值,扣除空白孔吸光度得到校正 OD 值,以标准品浓度为横坐标、校正 OD 值为纵坐标采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线并检验拟合相关系数,随后将待测样本校正 OD 值代入曲线方程反算出稀释后浓度,再乘以实验设置的样本稀释倍数得到原始样本中待测物真实浓度,若样本计算浓度超出标准曲线有效检测区间,则需要调整稀释比例重新检测以保障结果可靠。

(图片仅供参考)
售后服务
上海笃玛生物科技有限公司拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系我们的技术顾问,我们将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
企业介绍:
上海笃玛生物科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业总部位于上海,并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“笃玛生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,拥有专业的研发和质量检测团队以及先进的仓储和物流系统。“笃玛生物”已经得到全国科研工作者的认可。

公司拥有一批专业的研发人员,我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广,品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时,提供各种常规生化试剂,库存常备产品多达10000多种,可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面,谨记公司信念:质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程,科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序,我们恪守对每一位用户的承诺:用专业的态度做专业的品牌。同时,公司组建了一支专业的技术服务队伍,能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买笃玛生物产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。

科普:


ELISA 全称酶联免疫吸附测定,是实验室常用的生物检测手段,核心依靠两类生物分子专一配对,借助酶的催化作用让试剂产生颜色变化,色彩深浅对应样品里目标物质的多少。它批量检测效率高、上手门槛低、适用样品范围广、花销亲民,常用来测定各类体内活性物质、标记物等;缺点是样品品质、操作细节容易干扰最终结果,检测精度存在上限,主要运用于院校与企业的基础科研工作。


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