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| 产地 | 上海 |
| 保存条件 | 2~8° |
| 品牌 | DUMABIO |
| 货号 | DM-R12155 |
| 用途 | ELISA |
| 检测方法 | 电询 |
| 保质期 | 6个月 |
| 适应物种 | 兔 |
| 检测限 | 电xvn |
| 数量 | 999 |
| 包装规格 | 48/96T |
| 标记物 | 电询 |
| 样本 | 体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等 |
| 应用 | 科研实验 |
| 是否进口 | 否 |
ELISA试剂盒的四大原理

预先封闭微孔板多余吸附区域,依次加入标准样品与待测样品恒温静置,使目标组分与板上分子充分结合后进行 清洗;随后添加酶标记分子继续恒温孵育,形成夹心分子结构后二次洗涤去除游离试剂;避光加入底物溶液发生显色反应,显色达标后加入终止试剂停止催化,借助仪器测定吸光数值, 参照标准曲线计算出样品中目标组分的含量。
洗板(核心关键步骤)
二次洗板
二次洗板重点清除游离的酶标记结合物,要把控拍干力度,孔内不能留存洗板液,也不能让孔膜出现干燥,孔板干涸会引发不可逆的非特异吸附,进而造成整体背景异常升高,直接干扰显色结果的真实性。
底物显色
向各个微孔中添加底物溶液,放置避光环境静置反应,依托酶的催化作用慢慢产生色彩变化,试样里目标组分的含量越高,最终显现的颜色就越深,待到显色深浅达到适宜标准即可准备收尾操作。
终止反应与读数
加入终止液可以快速改变反应体系酸碱度,直接抑制 HRP 酶活性,立刻终止酶促显色反应,孔内蓝色产物随之转变为稳定的黄色,保证各孔显色程度不再发生变化,消除因显色时长差异带来的误差;终止完成后需在规定时间内使用酶标仪检测吸光度,选择 450nm 为主检测波长,可搭配 630nm 参考波长校正孔板背景与光学干扰,读取的 OD 值将用于构建标准曲线,进而换算出样本中靶抗原浓度。
数据处理
先整理所有孔的 OD 数值,剔除复孔中偏差过大的异常数据,计算各组复孔平均 OD 值,扣除空白孔 OD 值得到校正后吸光度;以标准品浓度为横坐标、对应的校正 OD 值为纵坐标,采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线;将样本校正 OD 值代入曲线公式,算出稀释后样本浓度,再乘以样本预先设置的稀释倍数,最终得到原始样本中靶抗原真实浓度,同时结合曲线相关系数判断本次实验数据是否有效。
ELISA试剂盒核心性能评价指标
1.灵敏度:试剂盒能够检出的 待测物浓度,数值越低,检出能力越强。
2.精密度:分为批内、批间变异系数 CV,反映结果重复性,CV 值越小,重复检测数据越接近。3.特异性:看试剂盒与其他相近物质的交叉反应,交叉反应越低,越不容易误判。
4.回收率:向样本中加入已知量目标物,实测值和理论值的比值,体现样本基质对检测的干扰程度。
5.线性范围:试剂盒可以准确检测的浓度区间,样品浓度要落在该区间内,数据才可靠。
6.稳定性:试剂盒在规定储存条件下,性能可以维持的有效期。
结果计算
售后服务
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科普:
ELISA 是一种依托生物分子特异性配对与酶促显色原理的科研检测技术,通过显色强弱差异,精准判别试样中目标组分的含量水平。该技术具备批量检测、操作简便、成本可控、适配性广的优势,是生物基础研究中常用的组分定量分析方式,仅适用于实验室科研探究。