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兔(Rabbit)肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒
  • 品牌:DUMABIO
  • 产地:上海
  • 型号:48/96T
  • 货号:DM-R12155
  • 价格: ¥1860/千克
  • 发布日期: 2026-08-13
  • 更新日期: 2026-09-14
产品详请
产地 上海
保存条件 2~8°
品牌 DUMABIO
货号 DM-R12155
用途 ELISA
检测方法 电询
保质期 6个月
适应物种
检测限 电xvn
数量 999
包装规格 48/96T
标记物 电询
样本 体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等
应用 科研实验
是否进口

兔(Rabbit)zhongliu坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒

产品货号:DM-R12155
产品规格:48/96T
上海笃玛生物坐落于上海的生物科研配套企业,主营实验室自研试剂的生产与发售,还可为各大院校、科研机构承接实验测试委托项目。公司自有原料加工渠道,配套完整的品质把控流程,产品价格亲民;实验相关技术问题能够快速响应解答,全部产品 实验室科研场景使用。
ELISA 依靠两种特定生物分子 对应的结合属性,结合酶 的催化作用引发色彩改变,借助颜色深浅的区别,界定试样里目标组分的含量多少,以此实现定量检测。


ELISA试剂盒的四大原理


试剂盒的组成
ELISA试剂盒标准操作流程(双抗体夹心为列)

预先封闭微孔板多余吸附区域,依次加入标准样品与待测样品恒温静置,使目标组分与板上分子充分结合后进行 清洗;随后添加酶标记分子继续恒温孵育,形成夹心分子结构后二次洗涤去除游离试剂;避光加入底物溶液发生显色反应,显色达标后加入终止试剂停止催化,借助仪器测定吸光数值, 参照标准曲线计算出样品中目标组分的含量。

样本前处理
取待测样本置于离心容器中,设定适宜转速与时长进行离心处理,分层后小心吸取上层澄清液体留存备用;若样本黏稠度过高,可加入适配缓冲溶剂轻柔混匀稀释,必要时经过滤去除细微固态杂质,调整液体酸碱度与浓度至适配实验体系标准,静置稳定后即可用于后续检测环节。液态试样经离心处理分离出上层清澈液体,固态试样充分研磨混匀后再次离心收集上清液;全程低温储存防止试样组分发生变质,浑浊、性状异常的试样直接废弃,处理合格的上清液才可用于后续实验操作。


加样与孵育
将梯度浓度的参照试样与处理完毕的待测试样依次添加至微孔板各孔中,置于恒温环境静置孵育,让试样中的目标组分和板底固定分子充分结合,孵育完成后倒掉孔内全部液体。


洗板(核心关键步骤)

清洗微孔板孔位,多次加注洗涤液充分冲刷孔壁, 洗脱未结合的游离物料与残留杂质,通过倒扣拍干的方式去除残余液体, 程度规避非特异性吸附,保障后续实验数据精准稳定。



加酶结合物与二次孵育
向各个孔洞倒入酶标记试剂,轻晃微孔板使液体均匀铺满孔底,恒温环境静置一段时间,标记分子与待测物质相互贴合,搭建完整的夹心分子结构,孵育结束准备二次洗涤。


二次洗板

二次洗板重点清除游离的酶标记结合物,要把控拍干力度,孔内不能留存洗板液,也不能让孔膜出现干燥,孔板干涸会引发不可逆的非特异吸附,进而造成整体背景异常升高,直接干扰显色结果的真实性。


底物显色

向各个微孔中添加底物溶液,放置避光环境静置反应,依托酶的催化作用慢慢产生色彩变化,试样里目标组分的含量越高,最终显现的颜色就越深,待到显色深浅达到适宜标准即可准备收尾操作。


终止反应与读数

加入终止液可以快速改变反应体系酸碱度,直接抑制 HRP 酶活性,立刻终止酶促显色反应,孔内蓝色产物随之转变为稳定的黄色,保证各孔显色程度不再发生变化,消除因显色时长差异带来的误差;终止完成后需在规定时间内使用酶标仪检测吸光度,选择 450nm 为主检测波长,可搭配 630nm 参考波长校正孔板背景与光学干扰,读取的 OD 值将用于构建标准曲线,进而换算出样本中靶抗原浓度。


数据处理

先整理所有孔的 OD 数值,剔除复孔中偏差过大的异常数据,计算各组复孔平均 OD 值,扣除空白孔 OD 值得到校正后吸光度;以标准品浓度为横坐标、对应的校正 OD 值为纵坐标,采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线;将样本校正 OD 值代入曲线公式,算出稀释后样本浓度,再乘以样本预先设置的稀释倍数,最终得到原始样本中靶抗原真实浓度,同时结合曲线相关系数判断本次实验数据是否有效。


ELISA试剂盒核心性能评价指标

1.灵敏度:试剂盒能够检出的 待测物浓度,数值越低,检出能力越强。

2.精密度:分为批内、批间变异系数 CV,反映结果重复性,CV 值越小,重复检测数据越接近。3.特异性:看试剂盒与其他相近物质的交叉反应,交叉反应越低,越不容易误判。

4.回收率:向样本中加入已知量目标物,实测值和理论值的比值,体现样本基质对检测的干扰程度。

5.线性范围:试剂盒可以准确检测的浓度区间,样品浓度要落在该区间内,数据才可靠。

6.稳定性:试剂盒在规定储存条件下,性能可以维持的有效期。


结果计算

仪器采集完毕吸光数值后,先依据一系列已知浓度的标准试样数据绘制标准参照曲线。将待测样品的光度数值带入曲线公式进行换算,便可推算出样品内部目标物质的具体浓度数值。

(图片仅供参考)


售后服务

上海笃玛生物科技有限公司拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系我们的技术顾问,我们将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。
企业介绍:
企业坐落于上海,主营生物实验室科研试剂的研发、生产与销售,同时承接实验检测委托业务。企业自主搭建原料生产链路,配备完善的质量把控体系,产品性价比优势明显;实验相关技术咨询回复高效顺畅,服务对象涵盖高校、科研院所以及生物研发企业,全部产品仅适用于实验室科研研究场景。

公司拥有一批专业的研发人员,我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广,品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时,提供各种常规生化试剂,库存常备产品多达10000多种,可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面,谨记公司信念:质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程,科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序,我们恪守对每一位用户的承诺:用专业的态度做专业的品牌。同时,公司组建了一支专业的技术服务队伍,能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买笃玛生物产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。

科普:

ELISA 是一种依托生物分子特异性配对与酶促显色原理的科研检测技术,通过显色强弱差异,精准判别试样中目标组分的含量水平。该技术具备批量检测、操作简便、成本可控、适配性广的优势,是生物基础研究中常用的组分定量分析方式,仅适用于实验室科研探究。

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