兔（Rabbit）白介素1β(IL-1β)ELISA检测试剂盒

产品货号：DM-R12156

产品规格：48/96T

上海笃玛生物科技有限公司企业位于上海，主营实验室科研试剂研发与销售，同时承接各类实验检测外包业务。自有原料生产渠道和标准化质量管控体系，产品性价比优异，技术问题答疑响应迅速，合作对象涵盖各大高校、科研机构与生物研发企业，所有产品仅适用于实验室科研研究。

Elisa依靠特异性分子识别搭配酶促显色放大信号完成检测，微孔固相载体便于洗涤去除多余杂质，检测灵敏度高，能够检出微量物质；可使用多孔板批量处理样本，操作流程简便，配套设备普及度高，既可定性区分有无目标物质，也可定量测算含量，实验体系成熟稳定，数据可重复性优异，适配各类科研样本，使用成本适中，可灵活调整实验模式满足不同检测需求。

ELISA试剂盒的四大原理

试剂盒的组成

ELISA试剂盒标准操作流程（双抗体夹心为列）

先把捕获分子包被在微孔板孔内恒温孵育完成固定，洗涤除去未结合原料；加入预处理待测样本恒温孵育，让样本内目标物质和捕获分子充分结合，再次洗涤游离杂质；加入酶标记识别分子继续孵育，使其结合在目标物质另一结合位点，形成夹心结构，再次洗涤多余标记试剂；加入显色底物避光反应，标记酶催化底物产生颜色变化；反应结束加入终止液停止显色，仪器读取吸光数值，对照标准曲线换算出样本中目标物质含量。

样本前处理

将待测样本放入离心管，设置对应转速和时长离心分层，吸取上层澄清液体备用；黏稠样本可加入缓冲液稀释混匀，必要时过滤除去细微固体杂质，调整酸碱度与浓度适配实验条件，静置平稳后即可用于后续操作。

加样与孵育

向微孔板每孔加注洗涤缓冲液充分浸润孔壁，短暂静置后倒净液体，重复数次冲刷孔内未特异性结合的游离组分；每次洗涤结束倒扣微孔板，轻柔拍干内部残留液体，规范把控洗涤次数与操作力度，减少无效附着物堆积，降低背景干扰，为后续反应营造洁净环境。

洗板（核心关键步骤）

每孔灌满洗涤液后倒掉，反复操作数次，将微孔板倒扣拍干残留液体，冲除未特异性结合的游离物质，降低无效吸附引发的数据误差。

加酶结合物与二次孵育

向各孔洞加入酶标记试剂，轻晃板子使液体均匀铺开，恒温静置孵育，使标记分子和待测物质结合，形成完整夹心结构；孵育结束洗板， 清除未结合的游离标记试剂。

二次洗板

完成酶标记试剂恒温静置之后，倒出孔中液体。反复注入洗涤液体冲刷微孔内壁， 冲净未产生结合的游离试剂，随后将微孔板倒扣拍打，排尽内部残存液体，规避试剂残留影响后续显色效果，保证检测数据可靠。

底物显色

向微孔中加入底物溶液，避光环境下静置反应，酶会催化底物慢慢显现出深浅不一的色彩；待测物质含量越高，最终颜色就越深。显色达到合适程度后，立刻加入终止液中止催化反应，稳定色彩状态，之后便可使用仪器测定吸光数值。

终止反应与读数

待到显色深浅达到适宜程度时，向各个孔洞加入终止试剂，叫停酶的催化显色过程，让色彩状态保持稳定。之后将微孔板放入光度检测仪器，采集吸光数值，结合标准参照曲线，就能算出样品里目标物质的含量。

数据处理

先整理所有孔的 OD 数值，剔除复孔中偏差过大的异常数据，计算各组复孔平均 OD 值，扣除空白孔 OD 值得到校正后吸光度；以标准品浓度为横坐标、对应的校正 OD 值为纵坐标，采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线；将样本校正 OD 值代入曲线公式，算出稀释后样本浓度，再乘以样本预先设置的稀释倍数，最终得到原始样本中靶抗原真实浓度，同时结合曲线相关系数判断本次实验数据是否有效。

ELISA试剂盒核心性能评价指标

1.灵敏度：试剂盒能够检出的 待测物浓度，数值越低，检出能力越强。

2.精密度：分为批内、批间变异系数 CV，反映结果重复性，CV 值越小，重复检测数据越接近。3.特异性：看试剂盒与其他相近物质的交叉反应，交叉反应越低，越不容易误判。

4.回收率：向样本中加入已知量目标物，实测值和理论值的比值，体现样本基质对检测的干扰程度。

5.线性范围：试剂盒可以准确检测的浓度区间，样品浓度要落在该区间内，数据才可靠。

6.稳定性：试剂盒在规定储存条件下，性能可以维持的有效期。

结果计算

汇总各组标准品与待测样本的吸光度数据，剔除复孔中偏差较大的异常数值并计算平均 OD 值，扣除空白孔吸光度得到校正 OD 值，以标准品浓度为横坐标、校正 OD 值为纵坐标采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线并检验拟合相关系数，随后将待测样本校正 OD 值代入曲线方程反算出稀释后浓度，再乘以实验设置的样本稀释倍数得到原始样本中待测物真实浓度，若样本计算浓度超出标准曲线有效检测区间，则需要调整稀释比例重新检测以保障结果可靠。

（图片仅供参考）

售后服务

上海笃玛生物科技有限公司拥有专业的技术服务团队，为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问，或对产品质量有异议，请及时联系我们的技术顾问，我们将在24小时内响应，为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。

企业介绍：

上海笃玛生物科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业总部位于上海，并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“笃玛生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及先进的仓储和物流系统。“笃玛生物”已经得到全国科研工作者的认可。

公司拥有一批专业的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买笃玛生物产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。

科普：

ELISA 是一种依托特异性分子结合与酶促显色信号放大原理的微量检测技术，以微孔板为固相反应载体，拥有成熟标准化的操作体系。可批量处理样本，通过多级反应、洗涤纯化、显色读数的完整流程，实现对样本中目标组分的精准定性与定量分析。整体操作简便、配套设备通用、检测灵敏度高，能捕捉微量物质，实验数据稳定性与重复性出色，适配各类科研样本分析场景，是科研领域应用广泛的基础检测手段。