兔（Rabbit）白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒

产品货号：DM-R12157

产品规格：48/96T

上海笃玛生物科技有限公司企业位于上海，主营实验室科研试剂研发与销售，同时承接各类实验检测外包业务。自有原料生产渠道和标准化质量管控体系，产品性价比优异，技术问题答疑响应迅速，合作对象涵盖各大高校、科研机构与生物研发企业，所有产品仅适用于实验室科研研究。

ELISA 是基于特异性分子结合与酶促信号放大的微量检测技术，依托微孔固相载体开展反应。整套体系成熟稳定、操作标准化、设备通用性强，支持多样本批量检测。凭借酶促显色放大效果，可识别极低浓度的目标组分，兼具定性判断与精准定量能力，实验重复性好、背景干扰低，适配各类科研检测场景。

ELISA试剂盒的四大原理

试剂盒的组成

ELISA试剂盒标准操作流程（双抗体夹心为列）

将捕获分子包被于微孔板内恒温孵育固定，洗除未结合物料；加入预处理样本恒温孵育，使目标组分与捕获分子特异性结合，再次清洗游离杂质；加入酶标记分子孵育，使其结合目标组分另一位点形成夹心结构，洗净多余标记物；避光加入显色底物进行酶促反应，显色达标后加入终止液终止反应，最终通过仪器读取吸光度，对照标准曲线计算目标组分含量。

样本前处理

将样本置于离心容器中离心分层，吸取上层澄清液体备用；针对高黏度样本，可使用适配缓冲液稀释混匀，通过过滤去除细微杂质，调整样本浓度与酸碱环境至适配实验体系，静置稳定后即可用于加样操作。

加样与孵育

按预设排布精准添加标准液、预处理样本与缓冲液，轻晃板面使液体均匀分布。将微孔板置于恒温环境静置孵育，保证孔内物质充分接触、完成特异性结合，孵育结束后取出准备洗板。

洗板（核心关键步骤）

洗板是 ELISA 实验的关键质控步骤，通过缓冲液浸润冲刷， 剥离板面未牢固结合的残留物质，大幅降低非特异性吸附造成的背景干扰，保证后续显色反应干净纯粹，有效提升实验数据的稳定性、准确性与重复性。

加酶结合物与二次孵育

向各孔洞加入酶标记试剂，轻晃板子使液体均匀铺开，恒温静置孵育，使标记分子和待测物质结合，形成完整夹心结构；孵育结束洗板， 清除未结合的游离标记试剂。

二次洗板

完成酶标记试剂恒温静置之后，倒出孔中液体。反复注入洗涤液体冲刷微孔内壁， 冲净未产生结合的游离试剂，随后将微孔板倒扣拍打，排尽内部残存液体，规避试剂残留影响后续显色效果，保证检测数据可靠。

底物显色

向微孔中加入底物溶液，避光环境下静置反应，酶会催化底物慢慢显现出深浅不一的色彩；待测物质含量越高，最终颜色就越深。显色达到合适程度后，立刻加入终止液中止催化反应，稳定色彩状态，之后便可使用仪器测定吸光数值。

终止反应与读数

待到显色深浅达到适宜程度时，向各个孔洞加入终止试剂，叫停酶的催化显色过程，让色彩状态保持稳定。之后将微孔板放入光度检测仪器，采集吸光数值，结合标准参照曲线，就能算出样品里目标物质的含量。

数据处理

先整理所有孔的 OD 数值，剔除复孔中偏差过大的异常数据，计算各组复孔平均 OD 值，扣除空白孔 OD 值得到校正后吸光度；以标准品浓度为横坐标、对应的校正 OD 值为纵坐标，采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线；将样本校正 OD 值代入曲线公式，算出稀释后样本浓度，再乘以样本预先设置的稀释倍数，最终得到原始样本中靶抗原真实浓度，同时结合曲线相关系数判断本次实验数据是否有效。

ELISA试剂盒核心性能评价指标

1.灵敏度：试剂盒能够检出的 待测物浓度，数值越低，检出能力越强。

2.精密度：分为批内、批间变异系数 CV，反映结果重复性，CV 值越小，重复检测数据越接近。3.特异性：看试剂盒与其他相近物质的交叉反应，交叉反应越低，越不容易误判。

4.回收率：向样本中加入已知量目标物，实测值和理论值的比值，体现样本基质对检测的干扰程度。

5.线性范围：试剂盒可以准确检测的浓度区间，样品浓度要落在该区间内，数据才可靠。

6.稳定性：试剂盒在规定储存条件下，性能可以维持的有效期。

结果计算

汇总各组标准品与待测样本的吸光度数据，剔除复孔中偏差较大的异常数值并计算平均 OD 值，扣除空白孔吸光度得到校正 OD 值，以标准品浓度为横坐标、校正 OD 值为纵坐标采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线并检验拟合相关系数，随后将待测样本校正 OD 值代入曲线方程反算出稀释后浓度，再乘以实验设置的样本稀释倍数得到原始样本中待测物真实浓度，若样本计算浓度超出标准曲线有效检测区间，则需要调整稀释比例重新检测以保障结果可靠。

（图片仅供参考）

售后服务

上海笃玛生物科技有限公司拥有专业的技术服务团队，为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问，或对产品质量有异议，请及时联系我们的技术顾问，我们将在24小时内响应，为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。

企业介绍：

上海笃玛生物科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业总部位于上海，并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“笃玛生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及先进的仓储和物流系统。“笃玛生物”已经得到全国科研工作者的认可。

公司拥有一批专业的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买笃玛生物产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。

科普：

ELISA 是一种高灵敏的微量组分检测技术，依托分子特异性结合与酶促显色信号放大机制工作。以微孔板作为固相载体，支持批量样本同步检测，操作流程标准化、配套设备通用。通过搭建夹心式分子结合结构，可精准捕捉微量目标组分，完成定性甄别与定量测算，实验稳定性强、数据重复性高，广泛应用于各类科研样本分析工作。