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| 产地 | 上海 |
| 保存条件 | 2~8° |
| 品牌 | DUMABIO |
| 货号 | DM-R12160 |
| 用途 | ELISA |
| 检测方法 | 电询 |
| 保质期 | 6个月 |
| 适应物种 | 兔 |
| 检测限 | 电xvn |
| 数量 | 999 |
| 包装规格 | 48/96T |
| 标记物 | 电询 |
| 样本 | 体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等 |
| 应用 | 科研实验 |
| 是否进口 | 否 |
ELISA试剂盒的四大原理

试剂盒的组成

预先封闭微孔板空余吸附位点,依次加入标准样品与待测样品恒温静置,使目标组分与板上分子充分结合后进行 清洗;随后添加酶标记分子继续恒温孵育,形成夹心分子结构后二次洗涤去除游离试剂;避光加入底物溶液发生显色反应,显色达标后加入终止试剂停止催化,借助仪器测定吸光数值, 参照标准曲线计算出样品中目标组分的含量。
洗板(核心关键步骤)
二次洗板
二次洗板重点清除游离的酶标记结合物,要把控拍干力度,孔内不能留存洗板液,也不能让孔膜出现干燥,孔板干涸会引发不可逆的非特异吸附,进而造成整体背景异常升高,直接干扰显色结果的真实性。
底物显色
往所有微孔中加入底物溶液,置于避光环境静置反应,在酶的催化下逐步生成颜色,样品中目标物质含量越高,显色越深,颜色深浅达到合适程度即可结束该阶段反应。
终止反应与读数
显色达到实验要求后,添加终止试剂叫停酶的催化作用,稳定色彩效果;把微孔板放入光度检测仪,依次记录每一组样品的吸光数据。
数据处理
先整理所有孔的 OD 数值,剔除复孔中偏差过大的异常数据,计算各组复孔平均 OD 值,扣除空白孔 OD 值得到校正后吸光度;以标准品浓度为横坐标、对应的校正 OD 值为纵坐标,采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线;将样本校正 OD 值代入曲线公式,算出稀释后样本浓度,再乘以样本预先设置的稀释倍数,最终得到原始样本中靶抗原真实浓度,同时结合曲线相关系数判断本次实验数据是否有效。
ELISA试剂盒核心性能评价指标
1.灵敏度:试剂盒能够检出的 待测物浓度,数值越低,检出能力越强。
2.精密度:分为批内、批间变异系数 CV,反映结果重复性,CV 值越小,重复检测数据越接近。3.特异性:看试剂盒与其他相近物质的交叉反应,交叉反应越低,越不容易误判。
4.回收率:向样本中加入已知量目标物,实测值和理论值的比值,体现样本基质对检测的干扰程度。
5.线性范围:试剂盒可以准确检测的浓度区间,样品浓度要落在该区间内,数据才可靠。
6.稳定性:试剂盒在规定储存条件下,性能可以维持的有效期。
结果计算
售后服务
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科普:
ELISA 是生物实验室定量分析技术,依托分子特异性结合与酶促显色原理工作。优势为可批量检测、操作简便、设备门槛低、成本可控;会受样品条件、人为操作影响,检测量程存在边界,多用于基础生物科研。