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| 产地 | 上海 |
| 保存条件 | 2~8° |
| 品牌 | DUMABIO |
| 货号 | DM-R12189 |
| 用途 | ELISA |
| 检测方法 | 电询 |
| 保质期 | 6个月 |
| 适应物种 | 兔 |
| 检测限 | 电xvn |
| 数量 | 999 |
| 包装规格 | 48/96T |
| 标记物 | 电询 |
| 样本 | 体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等 |
| 应用 | 科研实验 |
| 是否进口 | 否 |
产品货号:DM-R12189
产品规格:48/96T
上海笃玛生物本机构位于上海,专注于生物实验室科研试剂的研发、生产与供货,可承接实验检测委托服务。建立自主化原料制备工艺,落实全链条质量管控规范,技术支持响应迅速,服务对象包含高等院校、科研院所及生物研发机构,全部产品 实验室科研场景使用。
ELISA试剂盒的四大原理

试剂盒的组成
双抗体夹心法为 ELISA 主流检测范式,借助固相捕获分子、待测靶标组分与酶标记识别分子构筑三层夹心复合物,实现对试样中靶标组分的定量解析。
洗板(核心关键步骤)
二次洗板
二次洗板重点清除游离的酶标记结合物,要把控拍干力度,孔内不能留存洗板液,也不能让孔膜出现干燥,孔板干涸会引发不可逆的非特异吸附,进而造成整体背景异常升高,直接干扰显色结果的真实性。
底物显色
加入底物工作液,于避光条件下发生酶促反应并生成有色产物,靶标组分含量与显色信号强度呈正相关,当显色信号到达设定阈值,即可开展后续操作。
终止反应与读数
添加终止液淬灭酶促催化活性,稳定显色体系;采用分光光度检测设备采集各组试样对应的吸光度值。
数据处理
先整理所有孔的 OD 数值,剔除复孔中偏差过大的异常数据,计算各组复孔平均 OD 值,扣除空白孔 OD 值得到校正后吸光度;以标准品浓度为横坐标、对应的校正 OD 值为纵坐标,采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线;将样本校正 OD 值代入曲线公式,算出稀释后样本浓度,再乘以样本预先设置的稀释倍数,最终得到原始样本中靶抗原真实浓度,同时结合曲线相关系数判断本次实验数据是否有效。
ELISA试剂盒核心性能评价指标
1.灵敏度:试剂盒能够检出的 待测物浓度,数值越低,检出能力越强。
2.精密度:分为批内、批间变异系数 CV,反映结果重复性,CV 值越小,重复检测数据越接近。3.特异性:看试剂盒与其他相近物质的交叉反应,交叉反应越低,越不容易误判。
4.回收率:向样本中加入已知量目标物,实测值和理论值的比值,体现样本基质对检测的干扰程度。
5.线性范围:试剂盒可以准确检测的浓度区间,样品浓度要落在该区间内,数据才可靠。
6.稳定性:试剂盒在规定储存条件下,性能可以维持的有效期。
结果计算
售后服务
上海笃玛生物科技有限公司拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系我们的技术顾问,我们将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。公司拥有一批专业的研发人员,我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广,品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时,提供各种常规生化试剂,库存常备产品多达10000多种,可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面,谨记公司信念:质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程,科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序,我们恪守对每一位用户的承诺:用专业的态度做专业的品牌。同时,公司组建了一支专业的技术服务队伍,能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买笃玛生物产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。
科普:
作为经典的免疫定量分析手段,ELISA 跳出了传统蛋白检测对样品高纯度的硬性约束,依靠免疫识别与酶促显色的组合机制,实现对各类复杂生物样品中靶标蛋白的定量解析。不同于部分精密检测技术需要昂贵专用设备,该实验主要以 96 孔微孔板作为固相反应载体,依靠板材表面特有的物理吸附能力,将特异性识别抗体锚定在微孔底部,搭建起免疫反应的基础平台。科研人员将经过离心、稀释等简单前处理的科研样本加入孔内,设置合适的温度开展孵育,为抗原抗体之间的特异性结合提供稳定的反应环境。生物样品成分十分复杂,溶液中含有大量无关蛋白与杂质,这些物质极易松散吸附在微孔内壁,形成较高的背景噪声,干扰真实信号的读取,因此反复的洗板操作是把控实验质量不可或缺的一环。洗涤缓冲液能够冲刷掉孔内游离的各类干扰物质, 程度过滤掉非特异性吸附带来的干扰,降低假信号出现的概率,保障后续检测数据的真实性。
孵育洗板完成之后,体系中引入偶联酶分子的识别抗体,再次进行恒温孵育,让标记分子与已经被捕获的靶标蛋白完成配对结合,随后再次洗板清除所有游离未结合的标记抗体,只有成功组装成完整免疫复合物的孔位,才会留存具备催化活性的酶分子。当显色底物添加至各个反应孔,留存的酶就会发挥催化作用,驱动底物发生生化反应,生成稳定的有色产物,最终溶液呈现出的颜色深浅,和孔内靶标蛋白的实际丰度具备正向对应关系。酶标仪采集每一个微孔的吸光信号,然而光信号只能体现信号强弱,并不能直接换算出蛋白浓度,所以实验过程中必须同步设置多组已知浓度梯度的标准参照样本,利用参照样本的检测数据完成曲线拟合,构建对应的标准曲线模型。再把待测样本测得的吸光数值代入模型进行计算,就能够推算出每一份样品内部靶标蛋白的实际含量。
经过长久的技术发展与优化,ELISA 衍生出直接、间接、夹心、竞争四种主流检测架构,不同架构在操作流程复杂度、信号放大能力、检出下限、适配靶标分子大小上各有优劣。有的方案操作步骤精简,能够缩短整体实验周期;有的方案信号放大效果优异,适合检测样品中丰度很低的靶标蛋白;还有的方案更加适配小分子类靶标物质。科研人员需要综合样本来源、靶标的预估表达水平、课题组现有的试剂储备、仪器条件等多重现实因素,挑选最为契合自身课题需求的检测方案。
得益于 96 孔微孔板的载体设计,ELISA 具备极强的高通量特性,单块微孔板就可以同时处理数十份细胞培养液、组织裂解上清、蛋白粗提液等不同类型的科研样品,大幅提升大批量样本的检测效率。现如今商业化试剂盒体系已经发展得十分完备,整套检测流程标准化程度很高,科研团队拥有两种可行的实验开展路径:既可以采购成套试剂盒,在本实验室独立完成样本上板、多次孵育洗板、显色读数以及数据处理的全部工作;也可以将样本做好编号分装,妥善低温保存之后,委托第三方实验机构完成 ELISA 代测,后续接收包含原始吸光数据、标准曲线图谱、样本浓度结果在内的完整实验报告。这种灵活的模式很好化解了不少课题组面临的试剂短缺、实验人员不足、缺少酶标检测设备等现实困境。即便当下不断涌现出灵敏度更高的新型蛋白检测技术,但 ELISA 凭借成本适中、样本消耗量小、上手门槛低、结果稳定可靠等诸多长处,依旧在大量基础生物学的蛋白定量课题中占据着不可替代的地位。