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| 产地 | 上海 |
| 保存条件 | 2~8° |
| 品牌 | DUMABIO |
| 货号 | DM-R12193 |
| 用途 | ELISA |
| 检测方法 | 电询 |
| 保质期 | 6个月 |
| 适应物种 | 兔 |
| 检测限 | 电xvn |
| 数量 | 999 |
| 包装规格 | 48/96T |
| 标记物 | 电询 |
| 样本 | 体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等 |
| 应用 | 科研实验 |
| 是否进口 | 否 |
ELISA试剂盒的四大原理

试剂盒的组成
双抗体夹心法为 ELISA 主流检测范式,借助固相捕获分子、待测靶标组分与酶标记识别分子构筑三层夹心复合物,实现对试样中靶标组分的定量解析。
洗板(核心关键步骤)
二次洗板
二次洗板重点清除游离的酶标记结合物,要把控拍干力度,孔内不能留存洗板液,也不能让孔膜出现干燥,孔板干涸会引发不可逆的非特异吸附,进而造成整体背景异常升高,直接干扰显色结果的真实性。
底物显色
加入底物工作液,于避光条件下发生酶促反应并生成有色产物,靶标组分含量与显色信号强度呈正相关,当显色信号到达设定阈值,即可开展后续操作。
终止反应与读数
添加终止液淬灭酶促催化活性,稳定显色体系;采用分光光度检测设备采集各组试样对应的吸光度值。
数据处理
先整理所有孔的 OD 数值,剔除复孔中偏差过大的异常数据,计算各组复孔平均 OD 值,扣除空白孔 OD 值得到校正后吸光度;以标准品浓度为横坐标、对应的校正 OD 值为纵坐标,采用四参数 Logistic 模型拟合标准曲线;将样本校正 OD 值代入曲线公式,算出稀释后样本浓度,再乘以样本预先设置的稀释倍数,最终得到原始样本中靶抗原真实浓度,同时结合曲线相关系数判断本次实验数据是否有效。
ELISA试剂盒核心性能评价指标
1.灵敏度:试剂盒能够检出的 待测物浓度,数值越低,检出能力越强。
2.精密度:分为批内、批间变异系数 CV,反映结果重复性,CV 值越小,重复检测数据越接近。3.特异性:看试剂盒与其他相近物质的交叉反应,交叉反应越低,越不容易误判。
4.回收率:向样本中加入已知量目标物,实测值和理论值的比值,体现样本基质对检测的干扰程度。
5.线性范围:试剂盒可以准确检测的浓度区间,样品浓度要落在该区间内,数据才可靠。
6.稳定性:试剂盒在规定储存条件下,性能可以维持的有效期。
结果计算
售后服务
上海笃玛生物科技有限公司拥有专业的技术服务团队,为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问,或对产品质量有异议,请及时联系我们的技术顾问,我们将在24小时内响应,为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。公司拥有一批专业的研发人员,我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广,品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时,提供各种常规生化试剂,库存常备产品多达10000多种,可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面,谨记公司信念:质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程,科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序,我们恪守对每一位用户的承诺:用专业的态度做专业的品牌。同时,公司组建了一支专业的技术服务队伍,能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买笃玛生物产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。
科普:
酶联免疫吸附测定作为一种固相免疫定量技术,其核心逻辑在于利用抗原‑抗体之间 的免疫识别关系,在固相介质上构建免疫复合物,再借助酶的催化效应把分子丰度转化为可仪器读取的光学信号,以此实现对复杂生物样本内靶标蛋白的定量评估。不同于很多检测技术对样本纯度有着严苛的门槛,ELISA 对粗提类科研样本兼容性较强,细胞培养上清、组织裂解物等经过简单预处理后就可以上机检测,省去复杂的纯化步骤,非常适配基础课题中大批量样本的分析需求。实验载体选用 96 孔微孔板,依靠板材表面疏水吸附特性,捕获抗体会被固定在孔底,之后加入待检样本进行恒温孵育,给抗原抗体充分的时间完成特异性结合。体系中除目标蛋白之外,还会存在大量杂蛋白,这些物质极易非特异性吸附在孔壁,抬高背景信号,因此多轮洗板就成为把控实验质量的关键,洗涤液可以冲掉孔内未参与特异性结合的游离组分, 程度降低杂分子带来的干扰,减少实验背景噪音。后续加入酶标记的识别分子,使其与已经锚定的靶标蛋白相结合,再次洗板去除多余游离标记分子,只有成功形成免疫复合物的孔位才会留存标记酶。当显色底物被加入孔中,留存的酶就会发挥催化功能,促使底物发生氧化反应生成有色物质,最终呈现出的颜色深浅,与样本中靶标蛋白的含量存在正向关联。酶标仪记录每一个孔的吸光强度,仅仅依靠吸光读数还无法直接得到蛋白浓度,所以实验必须同步设置一系列已知浓度的标准参照样本,将参照样本的信号进行拟合,建立标准曲线模型,再把待测样本的吸光值导入模型运算,换算出每份样本靶标蛋白的具体浓度。经过长期发展,ELISA 演化出直接、间接、夹心、竞争四类主流检测体系,不同体系在灵敏度、检测阈值、抗干扰能力、适用靶标大小上各有取舍,有的更适合大分子蛋白检测,有的偏向小分子物质,科研人员需要结合样本属性、靶标预估表达量、实验室硬件条件综合权衡,选定 的检测方案。96 孔板的硬件设计赋予这项技术得天独厚的高通量属性,一块微孔板就能够同时处理数十份不同来源的科研样本,极大提升检测效率。如今该技术的商业化试剂盒十分成熟,课题组既可以自主采购试剂,在本实验室完成从样本前处理、孵育洗板到读数出报告的全套流程;也可以把分装冻存好的样本整理标记,委托第三方平台开展 ELISA 代测服务,由外包人员完成整套实验操作,向课题组交付原始读板数据、标准曲线以及换算后的浓度报告,帮助课题组规避试剂盒缺失、人手不足、仪器设备短缺等现实难题,让科研人员能够把重心更多放在数据解析与后续课题设计上。正是因为操作范式成熟、样本需求量适中、高通量优势明显,即便不断涌现出新的蛋白检测手段,ELISA 依旧在大量基础生物学相关的蛋白分析课题中,承担着不可替代的角色。