兔免疫球蛋白G Fc段受体II(FcγR II/CD32)ELISA试剂盒

定性和定量是ELISA测定按其表示测定结果的方式分为的两大类。定性测定是对标本中是否存在待测抗原或抗体作出结论，分别用“阳性"和“阴性"来表示。由此可见病原体的抗原或抗体通常是用的定性测定，以此判断特定病原体感染的存在与否。

定量测定基本上是用于非病原体抗原物质的测定，是对标本中待测抗原的数量进行量值测定，以具体数值来表示。定量测定，如激素、细胞因子、标志物、小分子药物等FP，hCG、细胞因子等的定量测定。

ELISA定性测定的“阴性"和“阳性"的判定依据是试剂盒所确定的阳性判定值(cut-off)。elisa试剂盒中所带标准品同时测定得出的剂量反应曲线(又称标准曲线)是定量测定的量值依据。

兔免疫球蛋白G Fc段受体II(FcγR II/CD32)ELISA试剂盒

ELISA定性测定结果判定中常用的一些缩写也可以帮助您看明白ELISA实验结果：

(1)S／CO：其中S为sample(样本)或specimen(标本)的简写，表示的是标本测定的吸光度值，CO为cut-off值的简写。除竞争抑制法外，其他ELISA定性测定模式中，当S／CO值大于或等于1时，标本的测定为阳性，小于1时为阴性。

(2)S／N或P／N：其中S同(1)，N为negative(阴性对照)的简写，P为patient(患者)的简写。较早的试剂盒很多都使用S／N或P／N≥2．1为阳性判定标准。

标曲显色过强无明显梯度

1、主要怀疑点：洗板不充分：

1.1、机器洗版：确保机器设置的针头能吸干孔中液体，并且加液针头能加液大于350ul，加液针头没有被异物或者结晶盐堵住。

1.2、手动洗板，严格按照步骤，使用干净灭菌的枪头和加样槽，使用无氧化剂的吸水纸。加350ul洗液，静置90秒，在吸水纸上拍干孔中液体后再加入下一步洗液或者试剂。

1.3、特别注意，在加入TMB前的洗板步骤极其重要，残留的HRP酶会直接导致TMB显色。

2、次要怀疑点：

2.1、TMB 已经污染，检测TMB是否透明无色，如果偏蓝就是污染了。

2.2、检查配制洗液的水是否污染，要求使用的水是双蒸水，三蒸水或无离子水，水中的Fe3+,Cu3+,Co3+等过渡金属，以及HClO都会氧化TMB。

2.3、酶标板受潮，长霉，或者试剂过期。

2.4、环境污染，空气中有导致显色的物质或者粉尘。

稀释过的样本OD 值比没有稀释的样本值高些

1、血清有基质效应，会导致试剂盒回收率下降。所以用原液检测数值会低于稀释后的数据。

2、FineTest®ELISA试剂盒提供的稀释液有抗基质成分，说明书要求样品至少稀释1倍以上

3、血清的基质的一类异嗜性抗体或者溶血后的物质，这些物质会封闭捕获抗体，导致抗体无法结合样品中的蛋白，当稀释后 这类物质效应下降，回收率就升高。

标曲方程选择问题

一般我们选择曲线平滑上升或者下降，所有点都在曲线上，R值接近于1的方程

检查试剂盒进行过哪些质控

质控数据在说明书中即可找到，在购买前检查试剂盒是否进行过严格的质控实验，包括批次内(Intra-Assay)及批次间(Inter-Assay)、掺入回收实验、线性稀释实验及交叉反应测试等，每个数据 都看一下，确保 的结果重现性及准确性。