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基本原理标记方法ELISA方法的基本类型、用途及操作程序
根据ELISA所用的固相载体而区分为三大类型：一是采用聚苯乙烯微量板为载体的ELISA，即我们通常所指的ELISA（微量板ELISA）；另一类是用硝酸纤维膜为载体的ELISA，称为斑点ELISA（Dot-ELISA）；再一类是采用疏水性聚脂布作为载体的ELISA，称为布ELISA（C－ELISA）。在微量板ELISA中，又根据其性质不同分为间接ELISA、双抗体夹心ELISA、双夹心ELISA、竞争ELISA、阻断ELISA及抗体捕捉ELISA。
间接ELISA
本法主要用于检测抗体。以鸭（DVH）抗体的ELISA为例，间接ELISA的操作程序如下。
⑴ 材料
① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液；
② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清；待检鸭血清；
③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。
⑵ 方法步骤
① 加抗原包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 加待检血清 → 37℃ 2小时，洗涤三次、抛干
③ 加酶标抗体 → 37℃ 2小时，洗涤三次、抛干
④ 加底物液 → 37℃ 30分钟，加终止液
⑤ 用ELISA检测仪测定OD值，并计算出P/N比值。
⑶ 结果判定 已知阳性血清与已知阴性血清的比值（P/N）≥2.1，而且已知阳性血清的OD值≥0.4；在上述条件成立的情况下，如果待检血清与已知阴性血清的比值（P/N）≥2.1，而且待检血清的OD值≥0.4，则判为阳性，否则判为阴性。
双抗体夹心
本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡病毒（IBDV）的双夹心抗体ELISA为例介绍本法的操作程序。
① 加抗体包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干
③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干
④ 加底物液 → 37℃ 15分钟，加终止液
⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。
系从小牛肠粘膜和大肠杆菌中提取，由多个同功酶组成。它们的底物种类很多，常用者为硝基苯磷酸盐，廉价无毒性。酶解产物呈黄色，可溶， 吸收值在400nm。酶的活性以在pH10反应系统中，37℃1分钟水解1μg磷酸苯二钠为一个单位。

一、纳米颗粒分析的特点

纳米颗粒分析是一种先进的检测技术，主要用于研究纳米尺度的物质性质和行为。其特点主要表现在以下几个方面：

1. 高灵敏度：纳米颗粒分析可以检测到极低浓度的纳米颗粒，从而实现对纳米材料的 测量和分析。
2. 多样性：纳米颗粒分析可以针对不同性质的纳米颗粒进行检测，包括金属、半导体、聚合物等，从而为材料科学、医学等领域的研究提供有力支持。
3. 原位实时性：纳米颗粒分析可以在不破坏样品的情况下进行原位实时检测，从而更好地了解纳米材料在实际应用中的性能和变化。
4. 操作简便：纳米颗粒分析的实验操作相对简单，可以快速获得实验结果，为科研和生产提供便利。

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二、纳米颗粒分析的优点

1. 度高：纳米颗粒分析技术可以对纳米材料进行 的测量和分析，从而为科学研究提供可靠的数据支持。
2. 适用范围广：纳米颗粒分析可以应用于不同领域的研究，如材料科学、医学、环境科学等，从而为这些领域的发展提供有力支持。
3. 实验周期短：纳米颗粒分析的实验操作相对简单，可以快速获得实验结果，缩短实验周期，提高科研效率。
4. 可重复性好：纳米颗粒分析技术具有很好的可重复性，实验结果可靠，有利于科学研究的规范化和标准化。

三、纳米颗粒分析的缺点

1. 设备成本高：纳米颗粒分析需要高精度的实验设备和仪器，导致设备成本较高，增加了研究的成本负担。
2. 数据分析复杂：由于纳米颗粒分析涉及大量的数据采集和处理，数据分析过程较为复杂，需要专业人员进行数据处理和分析。
3. 对环境和样品要求高：纳米颗粒分析需要严格的实验条件和环境控制，同时对样品的要求也比较高，对于某些特殊样品的分析可能会存在困难。
4. 技术更新快：随着科学技术的不断发展，纳米颗粒分析技术也在不断更新和完善。因此，研究人员需要不断跟进 的技术进展，以便更好地应用该技术进行科学研究。

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