人甲基化酶(Methylase)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-5867

产品规格：【48T/96T】

检测原理：

酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，简称ELISA）是一种基于抗原-抗体反应的生物化学分析技术，广泛应用于检测蛋白质、抗体、激素、药物等生物分子。其检测原理主要基于以下几个关键步骤：

1. 抗原-抗体特异性结合ELISA的核心是利用抗原与抗体之间的特异性结合。抗原和抗体之间通过互补的结构相互识别并结合，这种结合具有高度的特异性和亲和力。例如，如果要检测某种特定的蛋白质（抗原），就需要使用针对该抗原的特异性抗体。

2. 固相化技术ELISA实验中，抗原或抗体通常被固定在固相载体上（如塑料微孔板）。这种固相化过程使得抗原或抗体能够稳定地吸附在微孔板表面，便于后续的反应和检测。固相化的抗原或抗体被称为“捕获相”，而加入的样本中的抗原或抗体则被称为“检测相”。

3. 酶标记技术为了实现检测信号的放大和可视化，ELISA中通常使用酶标记的抗体或抗原。常用的酶包括辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）。酶标记的抗体或抗原与固相化的抗原或抗体结合后，酶会与底物反应，产生可检测的信号（如颜色变化或荧光信号）。

4. 底物反应与信号检测酶与底物反应后，会产生颜色变化或荧光信号。这种信号的强度与样本中目标分子的浓度成正比。例如，辣根过氧化物酶（HRP）可以催化过氧化氢分解，使无色的底物（如TMB）变为蓝色，加入酸终止反应后变为黄色，通过分光光度计测量吸光度即可定量分析目标分子的浓度。

5. 检测模式ELISA主要有以下几种检测模式：

直接ELISA：抗原固定在固相载体上，加入酶标记的抗体与抗原结合， 通过底物反应检测信号。

间接ELISA：抗原固定在固相载体上，先加入未标记的特异性抗体，再加入酶标记的二抗（针对一抗的抗体）， 通过底物反应检测信号。

夹心ELISA：固相载体上固定捕获抗体，加入样本中的抗原，再加入酶标记的检测抗体， 通过底物反应检测信号。夹心ELISA是检测蛋白质等大分子最常用的方法。竞争ELISA：样本中的抗原与固相载体上的抗原竞争结合酶标记的抗体，通过检测酶标记抗体的结合量来推断样本中抗原的浓度。

6. 定量分析ELISA的检测结果可以通过标准曲线进行定量分析。标准曲线是通过一系列已知浓度的标准品进行检测，绘制吸光度（或荧光强度）与浓度的关系曲线。根据样本的吸光度或荧光强度，通过标准曲线可以计算出样本中目标分子的浓度。

样品收集、处理及保存方法

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

• 特异性强：利用抗原与抗体的特异性结合原理，能够准确识别目标物质，有效减少其他无关物质的干扰，从而保证检测结果的准确性和可靠性。例如在检测特定病原体抗体时，只对该病原体的特异性抗体产生反应，而不会与其他病原体的抗体或人体自身的其他蛋白质发生非特异性结合。
• 灵敏度高：具备高度灵敏的检测能力，能够检测出样品中极低浓度的目标物质，通常可以达到 pg/mL 或 ng/mL 级别。这使得它可以用于检测一些在生物体内含量极少但具有重要生理或病理意义的物质，如某些细胞因子、激素等。
• 操作简便：试剂盒通常提供了成套的试剂和详细的标准化操作流程，实验步骤相对简单，无需复杂的仪器设备和专业技能。一般实验室技术人员经过适当培训后即可熟练操作，易于在不同实验室和临床检测中推广应用。
• 重复性好：只要严格按照试剂盒的操作说明进行实验，在相同的实验条件下，不同批次的检测结果具有较高的一致性和重复性。这为科研实验和临床诊断提供了稳定可靠的数据基础，有利于结果的比较和分析。
• 高通量检测：采用微孔板作为反应载体，可同时对大量样品进行检测，大大提高了检测效率。适合于大规模的筛查和研究，如在疾病流行病学调查、药物筛选等方面，可以同时处理大量样本，节省时间和成本。
• 应用范围广：可以用于检测各种生物分子，包括蛋白质、多肽、抗体、激素、细胞因子、病原体抗原等，涵盖了医学诊断、生物学研究、药物研发等多个领域。通过选择不同的特异性抗原或抗体，能够满足不同的检测需求。

生产厂家：上海笃玛生物科技有限公司