人基质Gla蛋白(MGP)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-5838

ELISA试剂盒优势：

1、抗体----高效、灵敏、特异性好

2、规范包被操作----吸附均匀、吸附性好、空白值低、孔底透明度高

3、优化方案----重复性高，可靠性强

4、高标准技术服务要求：灵敏度高，特异性强

5、适用范围广：血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本

以下是关于人基质Gla蛋白(MGP)酶联免疫试剂盒 的相关介绍：

基本信息

• 英文名称：Human MGP (Matrix Gla Protein) ELISA Kit 。
• 常用规格：48T/96T。
• 适用范围：主要用于科研实验，禁用于临床诊断。

检测原理

• 双抗体夹心法：将特异性抗人 MAT 抗体预包被在酶标板上，加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，样本中存在的 MAT 与固相抗体和检测抗体结合，洗涤后加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，再加入显色底物 TMB，颜色反应的深浅与样本中 MAT 的浓度成正比。
• 竞争法：将已知抗原包被在酶标板上，加入待测样本和酶标记的抗原，样本中的抗体与酶标记抗原竞争结合包被抗原，洗涤后加入底物显色，颜色深浅与样本中抗体含量成反比。

试剂盒组成

• 固相载体：已包被抗原或抗体的 96 孔聚苯乙烯酶标板。
• 酶标记物：酶标记的抗原或抗体。
• 底物：如 TMB，在酶的作用下发生显色反应。
• 对照品：阴性对照品和阳性对照品用于定性测定，参考标准品用于定量测定。
• 稀释液：用于稀释结合物及标本。
• 洗涤液：常用含 0.05% 吐温 20 磷酸缓冲盐水。
• 终止液：如硫酸，用于终止酶反应。

ELISA试剂盒实验数据的计算处理方法
1、拟和曲线：
输入 行： 浓度值， 如0 10 50 100 400
输入 行：该浓度下的调整后的od值，如0 0.586 1.397 1.997 3.42
选择这些输入的数据，用插入里的图表按钮，进入图表向导，在“标准类型”中选择“xy散点图”;在“子图表类型”中选择“折线散点图”，按“下一步”;选择“系列产生在行”，按“下一步”;数据标志，可以填写：如数据y轴，OD值;数据x轴，浓度;按下一步，点击完成。可得曲线图。
单击曲线，按右键，选择“添加趋势线”，在类型中，选择多项式;在选项中，选择显示公式，选择显示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面说的方法： 双击图表，把它输入到图表的数据中，就可以拟和曲线。
2、计算浓度：
次实验：
标准曲线为：
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
为例，已知OD值，计算浓度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x，可以得到：
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0

人基质Gla蛋白(MGP)酶联免疫试剂盒 

四、试剂盒使用小技巧

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是**加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 

3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。 

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。 

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。 洗板方法 手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 计算 以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 

人基质Gla蛋白(MGP)酶联免疫试剂盒 

五、技术小提示

1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。

2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。 

3. 一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 

4. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。 

5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请乘以稀释倍数。 

6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。 

7. 底物请避光保存。 

8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 

人基质Gla蛋白(MGP)酶联免疫试剂盒 

六、注意事项

1.收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4 ℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本， 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。

2.标本2 -8 ℃可保存48 小时，-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。

3.部分激素类标本需添加抑肽酶。 

4.计算方法：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 

人基质Gla蛋白(MGP)酶联免疫试剂盒 

七、试剂盒性能

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。

2.批内与批见应分别小于9%和15% 

样本类型

包括血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆液等液体样本。

操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能

1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2. 灵敏度： 检测浓度小于10 pg/mL。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6个月

品牌与价格

• 上海笃玛生物科技有限公司：特异性强、灵敏度高、稳定性好、免费代测，价格需询价。