人脂肪酸结合蛋白3(FABP3)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-5830

ELISA试剂盒优势：

1、抗体----高效、灵敏、特异性好

2、规范包被操作----吸附均匀、吸附性好、空白值低、孔底透明度高

3、优化方案----重复性高，可靠性强

4、高标准技术服务要求：灵敏度高，特异性强

5、适用范围广：血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本

以下是关于人脂肪酸结合蛋白3(FABP3)酶联免疫试剂盒的相关介绍：

1. 检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。试剂盒中预包被有抗人脂肪酸结合蛋白 3（FABP3）的单克隆抗体。当加入样本（血清、血浆、细胞培养上清等）时，样本中的 FABP3 会与包被在微孔板上的抗体特异性结合。之后加入生物素标记的抗 FABP3 二抗，形成 “固相抗体 - FABP3 - 生物素化抗体” 免疫复合物。再加入亲和素 - 辣根过氧化物酶（HRP）工作液，生物素与亲和素特异性结合，从而使 HRP 连接到免疫复合物上。加入显色底物（如四甲基联苯胺，TMB）后，在 HRP 的催化作用下，TMB 被氧化显色，颜色的深浅与样本中 FABP3 的含量成正比。 加入终止液终止反应，通过酶标仪在特定波长（通常为 450nm）下检测吸光度（OD 值），并根据标准曲线计算出样本中 FABP3 的浓度。

试剂盒组成

• 预包被板：已包被抗人 FABP3 单克隆抗体的微孔板，一般有 96 孔（可检测 90 个样本和 6 个标准品复孔）或 48 孔（可检测 42 个样本和 6 个标准品复孔）规格。

• 标准品：一系列已知浓度的人 FABP3 标准品，用于绘制标准曲线，浓度梯度如 0、0.312、0.625、1.25、2.5、5、10ng/mL 等，具体浓度范围依试剂盒不同而有差异。

• 生物素化抗体工作液：含生物素标记的抗人 FABP3 抗体及相关缓冲液成分。

• 酶结合物工作液：亲和素 - HRP 溶液及缓冲液。

• 底物溶液：如 TMB 溶液，用于显色反应。

• 终止液：通常为 2M 硫酸溶液，用于终止显色反应。

• 浓缩洗涤液：用于洗涤微孔板，稀释后使用，一般为 20× 浓缩液。

• 说明书：详细介绍试剂盒的使用方法、注意事项、性能指标等。

• 封板膜：用于在孵育过程中密封微孔板，防止溶液挥发和污染。

操作步骤

1. 准备工作：将试剂盒从冷藏环境中取出，平衡至室温（20 - 25℃），约 30 分钟。同时将浓缩洗涤液按说明书要求稀释成工作洗涤液。

1. 加样：设置标准品孔和样本孔。标准品孔中分别加入不同浓度的标准品 50μL；样本孔中加入 50μL 待测样本（如为血清、血浆需稀释的样本，应先按要求稀释后再加入）。每个样本和标准品均需设复孔。

1. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

1. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去孔内液体，甩干，每孔加满工作洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复洗涤 5 次， 一次洗涤后应尽量甩干。

1. 加生物素化抗体工作液：每孔加入 50μL 生物素化抗体工作液，用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

1. 二次洗涤：重复步骤 4 的洗涤操作。

1. 加酶结合物工作液：每孔加入 100μL 酶结合物工作液（注意不要触及孔壁），用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

1. 三次洗涤：重复步骤 4 的洗涤操作。

1. 显色：每孔先加入 50μL 底物 A，再加入 50μL 底物 B，轻轻振荡混匀，37℃避光显色 15 - 20 分钟（显色时间可根据实际情况适当调整，但不宜过长，以免本底过高）。

1. 终止反应：每孔加入 50μL 终止液，此时蓝色立即转变为黄色。

1. 读数：在终止反应后 15 分钟内，使用酶标仪在 450nm 波长下读取各孔的 OD 值。

计算方法

以标准品浓度为横坐标，对应的 OD 值为纵坐标，绘制标准曲线（一般使用四参数拟合曲线）。根据样本的 OD 值，在标准曲线上查出其对应的浓度。若样本为稀释后检测，需将查得的浓度乘以样本的稀释倍数，才是样本实际的 FABP3 浓度。

试剂盒性能指标

• 灵敏度：一般可达 0.1ng/mL 以下，不同厂家产品灵敏度略有差异，如某些试剂盒灵敏度为 0.05ng/mL。

• 特异性：与其他相关蛋白（如 FABP1、FABP4 等）无明显交叉反应，对人 FABP3 具有高度特异性。

• 重复性：板内变异系数（CV）一般小于 10%，板间变异系数小于 15%。即同一批次内不同孔间检测结果的差异以及不同批次试剂盒间检测结果的差异在可接受范围内。

• 线性范围：在一定浓度范围内（如 0.312 - 10ng/mL），检测结果与样本中 FABP3 实际浓度呈良好线性关系。

品牌与价格

• 上海笃玛生物科技有限公司：特异性强、灵敏度高、稳定性好、免费代测，价格需询价。