人肌球蛋白重链1(MYH1)酶联免疫试剂盒 

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-5829

ELISA试剂盒优势：

1、抗体----高效、灵敏、特异性好

2、规范包被操作----吸附均匀、吸附性好、空白值低、孔底透明度高

3、优化方案----重复性高，可靠性强

4、高标准技术服务要求：灵敏度高，特异性强

5、适用范围广：血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本

以下是关于人肌球蛋白重链1(MYH1)酶联免疫试剂盒 的相关介绍：

1. 检测原理

人肌球蛋白重链 1（MYH1）酶联免疫试剂盒通常采用双抗体夹心 ELISA 技术。试剂盒中的微孔板已预先包被了针对人 MYH1 的特异性抗体。当加入样本（如血清、血浆、细胞裂解液等）时，样本中的 MYH1 抗原会与包被在微孔板上的抗体相结合。随后加入生物素标记的另一种抗 MYH1 抗体，它会与已结合在固相抗体上的 MYH1 抗原形成 “固相抗体 - MYH1 - 生物素化抗体” 的夹心结构。接着加入亲和素 - 辣根过氧化物酶（HRP）结合物，由于生物素与亲和素具有高度特异性结合能力，HRP 便连接到免疫复合物上。加入显色底物（如四甲基联苯胺，TMB）后，在 HRP 的催化作用下，TMB 发生显色反应，颜色的深浅与样本中 MYH1 的含量成正比。 加入终止液终止反应，通过酶标仪在特定波长（通常为 450nm）下检测吸光度（OD 值），并依据标准曲线计算出样本中 MYH1 的浓度。

2. 样本类型及处理

• 血清：使用无热原、无内毒素的采血管采集血液，让血液在室温下自然凝固 10 - 20 分钟，然后以 1000×g 的离心力离心 15 分钟，小心吸取上层血清。避免使用溶血或脂血样本，因为溶血会释放细胞内成分干扰检测

，脂血可影响试剂与样本的反应。能血浆：可采用 EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂。采血后立即以 1000×g 离心 15 分钟获取血浆。同样要避免使用溶血或脂血样本。

• 细胞裂解液：对于细胞培养样本，收集细胞后用合适的细胞裂解缓冲液裂解细胞。裂解过程需在冰上进行，以防止蛋白降解。裂解后，12000×g 离心 15 分钟，取上清用于检测。若样本不能立即检测，应将其分装后冻存于 - 20℃或 - 80℃，避免反复冻融，因为这会导致蛋白变性，影响检测结果。

3. 试剂盒组成

• 预包被板：包被有抗人 MYH1 抗体的微孔板，常见规格有 96 孔（可检测 90 个样本和 6 个标准品复孔）和 48 孔（可检测 42 个样本和 6 个标准品复孔）。

• 标准品：一系列已知浓度的人 MYH1 标准品，用于绘制标准曲线。例如浓度梯度可能为 0、0.156、0.312、0.625、1.25、2.5、5ng/mL 等，不同厂家试剂盒的标准品浓度范围会有所不同。

• 生物素化抗体工作液：包含生物素标记的抗 MYH1 抗体以及相关缓冲成分，用于与样本中的 MYH1 抗原结合形成夹心结构。

• 酶结合物工作液：即亲和素 - HRP 溶液及缓冲液，用于连接生物素化抗体并催化显色反应。

• 底物溶液：如 TMB 溶液，在 HRP 催化下发生显色反应，使溶液颜色发生变化，便于检测。

• 终止液：通常为 2M 硫酸溶液，用于终止显色反应，使溶液颜色稳定，便于读数。

• 浓缩洗涤液：用于洗涤微孔板，去除未结合的物质，一般为 20× 浓缩液，使用时需按要求稀释。

• 说明书：详细阐述试剂盒的使用方法、注意事项、性能指标等重要信息。

• 封板膜：在孵育过程中用于密封微孔板，防止溶液挥发和外界污染。

4. 操作步骤

1. 准备工作：将试剂盒从冷藏环境（2 - 8℃）取出，在室温（20 - 25℃）下平衡 30 分钟。同时，将浓缩洗涤液按照说明书要求稀释成工作洗涤液。

1. 加样：设置标准品孔和样本孔。在标准品孔中依次加入不同浓度的标准品 50μL；在样本孔中加入 50μL 待测样本（若样本为血清、血浆且需稀释，应先按规定稀释后再加入）。每个样本和标准品都要设置复孔，以提高检测准确性。

1. 温育：用封板膜密封微孔板，将其置于 37℃恒温培养箱中温育 30 分钟。温育过程中确保微孔板放置平稳，避免震动，使反应充分进行。

1. 洗涤：小心揭去封板膜，弃去孔内液体，将微孔板倒扣在吸水纸上轻轻甩干。每孔加满工作洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复洗涤 5 次。 一次洗涤后，要尽量将微孔板内的液体甩干，以免残留的洗涤液影响后续反应。

1. 加生物素化抗体工作液：每孔加入 50μL 生物素化抗体工作液，再次用封板膜封板，37℃温育 30 分钟。操作过程中注意移液器的准确性，避免交叉污染。

1. 二次洗涤：重复步骤 4 的洗涤操作，确保 去除未结合的生物素化抗体。

1. 加酶结合物工作液：每孔加入 100μL 酶结合物工作液，注意不要让液体触及孔壁。封板后 37℃温育 30 分钟。

1. 三次洗涤：再次重复步骤 4 的洗涤操作，以去除未结合的酶结合物，减少非特异性背景。

1. 显色：每孔先加入 50μL 底物 A，再加入 50μL 底物 B，轻轻振荡混匀，在 37℃避光环境下显色 15 - 20 分钟。显色时间可根据实际情况适当调整，但不宜过长，否则本底会过高；也不宜过短，以免显色不充分导致结果不准确。

1. 终止反应：每孔加入 50μL 终止液，此时溶液颜色会立即从蓝色转变为黄色。加入终止液后应尽快进行读数。

1. 读数：在终止反应后的 15 分钟内，使用酶标仪在 450nm 波长下读取各孔的 OD 值。读取时确保酶标仪已预热并校准，保证读数的准确性。

5. 计算方法

以标准品浓度为横坐标，对应的 OD 值为纵坐标，通过绘图软件或酶标仪自带的数据分析软件绘制标准曲线（常用四参数拟合曲线）。根据样本的 OD 值，在标准曲线上查找对应的浓度。如果样本是经过稀释后检测的，需要将查得的浓度乘以样本的稀释倍数，才是样本中 MYH1 的实际浓度。

6. 试剂盒性能指标

• 灵敏度：一般能够达到 0.1ng/mL 以下，不同厂家生产的试剂盒灵敏度会有差异，部分 试剂盒灵敏度可低至 0.05ng/mL，这意味着试剂盒能够检测到极低浓度的 MYH1。

• 特异性：试剂盒对人 MYH1 具有高度特异性，与其他肌球蛋白重链亚型（如 MYH2、MYH3 等）以及其他相关蛋白无明显交叉反应，保证了检测结果反映的是人 MYH1 的真实含量。

• 重复性：板内变异系数（CV）一般小于 10%，即同一批次试剂盒在同一微孔板内不同孔间检测结果的差异较小；板间变异系数小于 15%，表示不同批次试剂盒之间检测结果的差异在可接受范围内，说明试剂盒具有良好的重复性和稳定性。

• 线性范围：在一定的浓度区间内（例如 0.312 - 10ng/mL），检测得到的 OD 值与样本中 MYH1 的实际浓度呈现良好的线性关系，在此范围内的检测结果可靠，可用于准确计算样本中 MYH1 的浓度。

7. 应用领域

• 肌肉疾病研究：在研究肌肉萎缩、肌肉营养不良等疾病时，检测肌肉组织或血液中 MYH1 的表达水平，有助于了解疾病的发病机制。例如，在某些肌肉萎缩疾病中，MYH1 的表达可能会发生异常改变，通过试剂盒检测其含量变化，可为疾病的诊断和 提供依据。

• 运动生理学研究：用于研究运动对肌肉蛋白表达的影响。运动员在进行高强度训练前后，肌肉中 MYH1 的含量可能会发生变化，通过该试剂盒检测，可以深入了解运动训练对肌肉结构和功能的调节机制，为制定科学合理的训练计划提供参考。

• 药物研发：在研发 肌肉相关疾病的药物时，可利用该试剂盒监测药物对 MYH1 表达的影响，评估药物的 和作用机制。例如，观察药物干预后，患者血液或肌肉组织中 MYH1 水平是否恢复正常，以此判断药物是否有效。

品牌与价格

• 上海笃玛生物科技有限公司：特异性强、灵敏度高、稳定性好、免费代测，价格需询价。