人肌腱蛋白R(TNR)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-5823

ELISA试剂盒优势：

1、抗体----高效、灵敏、特异性好

2、规范包被操作----吸附均匀、吸附性好、空白值低、孔底透明度高

3、优化方案----重复性高，可靠性强

4、高标准技术服务要求：灵敏度高，特异性强

5、适用范围广：血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本

以下是关于人肌腱蛋白R(TNR)酶联免疫试剂盒盒的相关介绍：

人肌腱蛋白R(TNR)酶联免疫试剂盒

1. 检测原理

采用双抗体夹心 ELISA 法，具体步骤如下：

1. 固相包被：微孔板预包被抗人 MYO 单克隆抗体，用于捕获样本中的 MYO 抗原。
2. 抗原抗体结合：加入样本后，MYO 与包被抗体特异性结合；随后加入生物素标记的抗 MYO 二抗，形成 “固相抗体 - MYO - 生物素化抗体” 夹心复合物。
3. 酶联反应：加入亲和素 - 辣根过氧化物酶（HRP）结合物，通过生物素 - 亲和素特异性结合，将 HRP 连接至夹心复合物。
4. 显色定量：加入底物 TMB（四甲基联苯胺），HRP 催化 TMB 显色（蓝色），加入终止液（硫酸）后变为黄色，吸光度（OD 值）与 MYO 浓度呈正相关，通过标准曲线计算样本浓度。

人肌腱蛋白R(TNR)酶联免疫试剂盒

2. 样本类型及处理

适用样本

• 血清：室温凝固后离心（1000×g，15 分钟），取上清，避免溶血（红细胞破裂会释放 MYO，导致结果偏高）。
• 血浆：EDTA、柠檬酸钠或肝素抗凝，离心后取上清，避免脂血。
• 组织匀浆：骨骼肌或心肌组织加入预冷匀浆缓冲液，冰上匀浆后离心（12000×g，15 分钟），取上清。
• 其他：细胞培养上清、尿液（需稀释）等，根据实验需求调整处理方法。

ELISA 试剂盒在多个领域广泛应用，主要有以下优势：

• 特异性强：利用抗原与抗体的特异性结合原理，能够准确识别目标物质，有效减少其他无关物质的干扰，从而保证检测结果的准确性和可靠性。例如在检测特定病原体抗体时，只对该病原体的特异性抗体产生反应，而不会与其他病原体的抗体或人体自身的其他蛋白质发生非特异性结合。
• 灵敏度高：具备高度灵敏的检测能力，能够检测出样品中极低浓度的目标物质，通常可以达到 pg/mL 或 ng/mL 级别。这使得它可以用于检测一些在生物体内含量极少但具有重要生理或病理意义的物质，如某些细胞因子、激素等。
• 操作简便：试剂盒通常提供了成套的试剂和详细的标准化操作流程，实验步骤相对简单，无需复杂的仪器设备和专业技能。一般实验室技术人员经过适当培训后即可熟练操作，易于在不同实验室和临床检测中推广应用。
• 重复性好：只要严格按照试剂盒的操作说明进行实验，在相同的实验条件下，不同批次的检测结果具有较高的一致性和重复性。这为科研实验和临床诊断提供了稳定可靠的数据基础，有利于结果的比较和分析。
• 高通量检测：采用微孔板作为反应载体，可同时对大量样品进行检测，大大提高了检测效率。适合于大规模的筛查和研究，如在疾病流行病学调查、药物筛选等方面，可以同时处理大量样本，节省时间和成本。
• 应用范围广：可以用于检测各种生物分子，包括蛋白质、多肽、抗体、激素、细胞因子、病原体抗原等，涵盖了医学诊断、生物学研究、药物研发等多个领域。通过选择不同的特异性抗原或抗体，能够满足不同的检测需求。

注意事项

• 样本保存：暂不检测的样本需分装冻存于 - 20℃或 - 80℃，避免反复冻融。
• 溶血样本：严格避免，溶血指数＞0.1% 时需重新采样。

3. 试剂盒组成

组件名称	规格 / 描述
预包被板	96 孔 / 48 孔，包被抗人 MYO 抗体，铝箔袋密封，含干燥剂。
标准品	系列浓度（如 0、25、50、100、200、400、800ng/mL），冻干品，需按说明复溶。
生物素化抗体	液体试剂，稀释后使用，特异性识别 MYO 抗原。
酶结合物工作液	亲和素 - HRP 溶液，临用前稀释。
底物溶液	TMB 溶液，避光保存，使用前平衡至室温。
终止液	2M 硫酸溶液，无色透明液体。
浓缩洗涤液	20× 浓缩液，含吐温 - 20，使用时用蒸馏水稀释至 1×。
说明书	含操作步骤、注意事项、性能参数等。

4. 操作步骤

基础流程（以 96 孔板为例）

1. 试剂准备：
   • 试剂盒从 2-8℃取出，室温平衡 30 分钟；洗涤液按 1:20 稀释。
   • 标准品复溶：加入指定体积蒸馏水，静置 10 分钟，涡旋混匀。
2. 加样：
   • 标准品孔：每孔加入 50μL 不同浓度标准品（设 2 复孔）。
   • 样本孔：每孔加入 50μL 待测样本（如需稀释，用样本稀释液预稀释）。
3. 温育与洗涤：
   • 封板，37℃温育 30 分钟；弃液，甩干，每孔加 300μL 洗涤液，静置 30 秒，弃液，重复 5 次， 拍干。
4. 酶联反应：
   • 加入 50μL 生物素化抗体工作液，37℃温育 30 分钟，洗涤 5 次。
   • 加入 100μL 酶结合物工作液，37℃温育 30 分钟，洗涤 5 次。
5. 显色与终止：
   • 加入 50μL 底物 A 和 50μL 底物 B，轻轻混匀，37℃避光显色 10-15 分钟（避免过度显色）。
   • 加入 50μL 终止液，立即在 450nm 波长处读取 OD 值（15 分钟内完成）。

数据处理

• 以标准品浓度为横坐标，OD 值（扣除空白孔）为纵坐标，绘制四参数拟合曲线，计算样本中 MYO 浓度（若样本稀释，需乘以稀释倍数）。
  

常见问题及解决方案

问题现象	可能原因	解决方法
标准曲线异常	标准品复溶错误 / 过期	重新配制标准品，检查保质期
样本结果为负值	样本浓度低于 检测限	报告 “＜ 检测限” 或浓缩样本后重新检测
背景信号过高	洗涤不 / 底物污染	增加洗涤次数，使用新鲜底物
重复性差	加样误差 / 温育温度不均	使用多通道移液器，确保培养箱温度稳定

保存与运输

• 保存条件：未开封试剂盒于**2-8℃**避光保存，有效期 12 个月；开封后试剂需在 1 周内用完，避免反复冻融。
• 运输条件：冷藏运输（2-8℃），短途可用冰袋，长途需加干冰，确保试剂活性不受损。

品牌与价格

• 上海笃玛生物科技有限公司：特异性强、灵敏度高、稳定性好、免费代测，价格需询价。