人白三烯A4水解酶(LTA4H)酶联免疫试剂盒

产品货号：DM5805

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人白三烯A4水解酶(LTA4H)酶联免疫试剂盒 捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并 洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人白三烯A4水解酶(LTA4H)酶联免疫试剂盒 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

保存条件及有效期

1.本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人白三烯A4水解酶(LTA4H)酶联免疫试剂盒 的含量；

2.试剂盒保存：2-8℃；

3.有效期：6个月。

优点

• 特异性强：抗原 - 抗体的特异性结合保证了检测的准确性，能够准确识别目标物质，减少干扰。
• 灵敏度高：借助酶的催化放大作用，可检测出极低浓度的目标物质，通常能达到 pg/mL 或 ng/mL 级别。
• 重复性好：只要严格按照操作流程进行实验，不同批次的检测结果具有较高的一致性和重复性。
• 操作简便：试剂盒提供了成套的试剂和标准化的操作流程，无需复杂的仪器设备和专业技能，易于掌握。
• 应用范围广：可检测多种类型的生物分子，适用于医学、生物学、食品安全等多个领域。

1. 检测目标：明确要检测的物质是什么，例如是检测某种特定的蛋白质、抗体、激素还是细胞因子等。不同的目标物质需要选择相应的特异性试剂盒。如检测人白细胞介素 - 6（IL-6），就需要选择专门针对人 IL-6 的 ELISA 试剂盒。
2. 样本类型：确定样本来源和类型，常见的样本有血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等。不同的试剂盒可能对样本类型有要求，有些试剂盒可能只适用于血清或血浆样本，而对于细胞培养上清或组织匀浆样本的检测效果可能不佳。例如，检测血液中的某种标志物，就需要选择适用于血清或血浆检测的试剂盒。
3. 检测范围：查看试剂盒的检测范围是否符合实验需求。每个试剂盒都有其特定的检测区间，样品中目标物质的浓度应在试剂盒的检测范围内才能获得准确可靠的结果。如果样品中目标物质浓度过高，可能需要进行稀释；如果浓度过低，可能超出试剂盒的检测下限而无法准确检测。例如，某试剂盒的检测范围是 10 - 500 pg/mL，若样品中目标物质浓度为 1000 pg/mL，则需稀释后再检测。
4. 灵敏度和特异性：灵敏度高的试剂盒能够检测到低浓度的目标物质，而特异性好则可以减少非特异性反应，确保检测结果的准确性。可以参考试剂盒的说明书或相关文献，了解其灵敏度和特异性指标，也可以咨询其他使用过该试剂盒的用户。例如，灵敏度为 1 pg/mL 的试剂盒比灵敏度为 10 pg/mL 的试剂盒能检测到更低浓度的目标物。

人白三烯A4水解酶(LTA4H)酶联免疫试剂盒

ELISA试剂盒技术流程 双抗体夹心法(检测未知抗原) 间接法(检测未知抗体) 1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。 2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。 3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。 4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。 1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。 2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) 3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标 抗体(抗抗体)0.05ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤, 一遍用DDW洗涤。 4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。  ELISA试剂盒需自备的设备及试剂     1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热) 2. 单道或多道微量加液器及吸头 3. 稀释样品的EP管 4. 蒸馏水或去离子水 5. 吸水纸 22. 盛放洗液的容器