人黑色素瘤相关抗原(MAGE)酶联免疫试剂盒

产品货号：DM5795

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人黑色素瘤相关抗原(MAGE)酶联免疫试剂盒 捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并 洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人黑色素瘤相关抗原(MAGE)酶联免疫试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

保存条件及有效期

1.本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人黑色素瘤相关抗原(MAGE)酶联免疫试剂盒 的含量；

2.试剂盒保存：2-8℃；

3.有效期：6个月。

人黑色素瘤相关抗原(MAGE)酶联免疫试剂盒

ELISA试剂盒技术流程 双抗体夹心法(检测未知抗原) 间接法(检测未知抗体) 1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。 2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。 3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。 4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。 1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。 2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) 3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标 抗体(抗抗体)0.05ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤, 一遍用DDW洗涤。 4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。  ELISA试剂盒需自备的设备及试剂     1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热) 2. 单道或多道微量加液器及吸头 3. 稀释样品的EP管 4. 蒸馏水或去离子水 5. 吸水纸 22. 盛放洗液的容器

ELISA检测试剂盒承诺

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