人核孔蛋白205kda(NUP205)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM5776

产品规格：【48T/96T】

ELISA 即酶联免疫吸附测定（Enzyme - Linked Immunosorbent Assay），是一种广泛应用于生物学和医学领域的免疫检测技术，以下是对它的详细介绍：

ELISA 具有灵敏度高、特异性强、操作简便、可同时检测大量样品等优点，因此在基础研究、临床诊断、生物制药等领域都有着广泛的应用。但该方法也存在一些局限性，如需要特异性的抗体和抗原、可能存在交叉反应、对实验条件要求较高等。

原理

• 抗原 - 抗体特异性结合：抗原和抗体之间具有高度特异性的结合能力，就像钥匙和锁一样相互匹配。利用这一特性，将已知的抗原或抗体固定在固相载体（如聚苯乙烯微孔板）表面，然后加入待检测的样品，样品中的相应抗体或抗原会与固定在载体上的抗原或抗体发生特异性结合。
• 酶标记物的催化作用：通过将酶与抗体或抗原进行共价结合，形成酶标记物。当酶标记物与已结合在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合后，加入酶的底物，酶能够催化底物发生化学反应，产生可检测的信号，如颜色变化、荧光增强等。根据信号的有无或强弱，来判断样品中是否存在目标抗原或抗体以及其含量的多少。

一、技术参数与性能

1. 检测原理：
   采用双抗体夹心法，即用纯化的抗人 NUP205 单克隆抗体包被微孔板，样本中的 NUP205 与固相抗体结合后，再与 HRP 标记的检测抗体形成复合物，通过 TMB 底物显色，在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），并通过标准曲线计算样本浓度。
2. 灵敏度与检测范围：
   • 典型灵敏度为0.05-0.1 ng/mL（不同品牌略有差异），例如某品牌试剂盒的灵敏度为46.875 pg/mL，检测范围为78.125-5000 pg/mL（鹅源数据参考，人源参数需以供应商为准）。
   • 批内变异系数（CV）≤10%，批间变异系数≤15%，确保实验结果的稳定性。
3. 样本类型：
   支持血清、血浆、细胞裂解液、组织匀浆、脑脊液等多种生物样本，建议样本量≥50 μL / 孔。

应用领域

1. 生命科学研究：ELISA试剂盒可用于检测细胞因子、激素、酶、抗体等分子的含量和活性，为生理学、免疫学、分子生物学等研究领域提供有力支持。

2. 临床医学诊断：在临床医学中，ELISA试剂盒可用于检测血清中的标志物、病毒抗体、心肌酶等指标，为临床诊断及疾病监测提供重要依据。

3. 食品安全检测：ELISA试剂盒可用于检测食品中的抗生素残留、农药残留等有害物质，确保食品质量和安全。

4. 环境监测：它还可用于检测环境中的化学物质、微生物等污染物，为环境监测和污染治理提供技术支持。

5. 动物疾病防控：在动物疫病防控方面，ELISA试剂盒可用于检测动物血清中的病毒抗体、细菌抗原等指标，为动物健康保障提供有力支持。

类型

1. 评估试剂盒性能指标
   • 灵敏度：灵敏度是指试剂盒能够检测到的 目标物浓度。根据实验需求选择具有合适灵敏度的试剂盒。如果需要检测低丰度的目标物，如一些微量的细胞因子或激素，就需要选择灵敏度高的试剂盒，通常其检测下限能够达到 pg/mL 级别。
   • 特异性：特异性反映了试剂盒检测目标物的专一性，即试剂盒只对目标抗原或抗体产生反应，而与其他相关物质无交叉反应或低交叉反应。查看试剂盒说明书中关于特异性的描述，了解其对目标物的识别能力以及可能存在的交叉反应情况。可以通过查阅相关文献或咨询试剂盒供应商来获取更多关于特异性的信息。
   • 准确性：准确性是指检测结果与真实值的接近程度。一般通过回收率实验来评估试剂盒的准确性，即向已知浓度的样本中加入一定量的目标物，然后检测回收率。理想的试剂盒回收率应在 90% - 110% 之间。
   • 精密度：精密度包括批内精密度和批间精密度。批内精密度是指在同一批次试剂盒中，对同一样本进行多次检测的结果重复性；批间精密度是指不同批次试剂盒对同一样本检测结果的一致性。选择精密度高的试剂盒，能够保证实验结果的稳定性和可靠性，通常批内变异系数（CV）应小于 10%，批间 CV 应小于 15%。
2. 查看试剂盒组成和规格
   • 试剂盒组成：查看试剂盒的组成成分，确保包含所有必要的试剂，如包被板、标准品、酶标抗体、底物、洗涤液、终止液等。有些试剂盒可能还会提供样本稀释液、封闭液等辅助试剂。了解各试剂的性质、保存条件和使用方法，确保其与实验条件相匹配。
   • 规格选择：根据实验的样本数量和检测次数选择合适规格的试剂盒。试剂盒的规格通常以孔数来表示，如 96 孔板或 384 孔板。如果样本量较大，可选择大规格的试剂盒以节省成本和时间；如果是小型实验或预实验，也可以选择小规格的试剂盒。

操作步骤

结果分析

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。