人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM5765

产品规格：【48T/96T】

上海笃玛生物科技有限公司的 ELISA 试剂盒具有以下特点：

• 种类丰富：涵盖多种种属和指标的检测，如犬免疫球蛋白 E、鸡晶体蛋白、人激活素 B 等，还包括大鼠的多种指标检测试剂盒，能满足不同科研需求。
• 性能优良
  • 准确性高：标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值大于等于 0.9900。
  • 灵敏度高：如犬免疫球蛋白 E 的 ELISA 试剂盒检测浓度小于 1.0pg/mL，鸡晶体蛋白的 ELISA 试剂盒检测浓度小于 10pg/mL。
  • 特异性强：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
  • 重复性好：板内、板间变异系数均小于 15%。
• 组成齐全：以犬免疫球蛋白 E (IgE) ELISA 试剂盒为例，包含微孔酶标板、标准品、样本稀释液、检测抗体 - HRP、20× 洗涤缓冲液、底物 A、底物 B、终止液、封板膜、说明书、自封袋等。
• 适用样本类型多样：适用于血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种标本类型。
• 保存条件及有效期明确：通常保存在 2-8℃，避光防潮保存，有效期一般为 6 个月。

上海笃玛生物科技有限公司的 ELISA 试剂盒检测时间因具体试剂盒和操作步骤而异。以人可溶性髓系细胞触发受体 -1（sTREM -1）ELISA 试剂盒为例，其检测时间约为 2.5 小时，具体步骤及时间如下：

1. 温育：从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，设置标准品孔、样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL，待测样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL，随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 50μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
2. 洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板），此过程约 10 分钟。
3. 显色：所有孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
4. 终止及检测：所有孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

此外，该公司的小鼠肺表面活性物质相关蛋白 C ELISA 试剂盒的检测时间为 2 小时3。还有部分试剂盒采用原装进口，一步孵育、一步洗板，操作时间仅需 90 分钟。

ELISA 具有灵敏度高、特异性强、操作简便、可同时检测大量样品等优点，因此在基础研究、临床诊断、生物制药等领域都有着广泛的应用。但该方法也存在一些局限性，如需要特异性的抗体和抗原、可能存在交叉反应、对实验条件要求较高等。

ELISA试剂盒技术流程  

双抗体夹心法(检测未知抗原)

间接法(检测未知抗体)

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。 2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。 3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。 4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。 2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) 3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标 抗体(抗抗体)0.05ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤, 一遍用DDW洗涤。 4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

原理

• 抗原 - 抗体特异性结合：抗原和抗体之间具有高度特异性的结合能力，就像钥匙和锁一样相互匹配。利用这一特性，将已知的抗原或抗体固定在固相载体（如聚苯乙烯微孔板）表面，然后加入待检测的样品，样品中的相应抗体或抗原会与固定在载体上的抗原或抗体发生特异性结合。
• 酶标记物的催化作用：通过将酶与抗体或抗原进行共价结合，形成酶标记物。当酶标记物与已结合在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合后，加入酶的底物，酶能够催化底物发生化学反应，产生可检测的信号，如颜色变化、荧光增强等。根据信号的有无或强弱，来判断样品中是否存在目标抗原或抗体以及其含量的多少。

应用领域

1. 生命科学研究：ELISA试剂盒可用于检测细胞因子、激素、酶、抗体等分子的含量和活性，为生理学、免疫学、分子生物学等研究领域提供有力支持。

2. 临床医学诊断：在临床医学中，ELISA试剂盒可用于检测血清中的标志物、病毒抗体、心肌酶等指标，为临床诊断及疾病监测提供重要依据。

3. 食品安全检测：ELISA试剂盒可用于检测食品中的抗生素残留、农药残留等有害物质，确保食品质量和安全。

4. 环境监测：它还可用于检测环境中的化学物质、微生物等污染物，为环境监测和污染治理提供技术支持。

5. 动物疾病防控：在动物疫病防控方面，ELISA试剂盒可用于检测动物血清中的病毒抗体、细菌抗原等指标，为动物健康保障提供有力支持。

类型

1. 评估试剂盒性能指标
   • 灵敏度：灵敏度是指试剂盒能够检测到的 目标物浓度。根据实验需求选择具有合适灵敏度的试剂盒。如果需要检测低丰度的目标物，如一些微量的细胞因子或激素，就需要选择灵敏度高的试剂盒，通常其检测下限能够达到 pg/mL 级别。
   • 特异性：特异性反映了试剂盒检测目标物的专一性，即试剂盒只对目标抗原或抗体产生反应，而与其他相关物质无交叉反应或低交叉反应。查看试剂盒说明书中关于特异性的描述，了解其对目标物的识别能力以及可能存在的交叉反应情况。可以通过查阅相关文献或咨询试剂盒供应商来获取更多关于特异性的信息。
   • 准确性：准确性是指检测结果与真实值的接近程度。一般通过回收率实验来评估试剂盒的准确性，即向已知浓度的样本中加入一定量的目标物，然后检测回收率。理想的试剂盒回收率应在 90% - 110% 之间。
   • 精密度：精密度包括批内精密度和批间精密度。批内精密度是指在同一批次试剂盒中，对同一样本进行多次检测的结果重复性；批间精密度是指不同批次试剂盒对同一样本检测结果的一致性。选择精密度高的试剂盒，能够保证实验结果的稳定性和可靠性，通常批内变异系数（CV）应小于 10%，批间 CV 应小于 15%。
2. 查看试剂盒组成和规格
   • 试剂盒组成：查看试剂盒的组成成分，确保包含所有必要的试剂，如包被板、标准品、酶标抗体、底物、洗涤液、终止液等。有些试剂盒可能还会提供样本稀释液、封闭液等辅助试剂。了解各试剂的性质、保存条件和使用方法，确保其与实验条件相匹配。
   • 规格选择：根据实验的样本数量和检测次数选择合适规格的试剂盒。试剂盒的规格通常以孔数来表示，如 96 孔板或 384 孔板。如果样本量较大，可选择大规格的试剂盒以节省成本和时间；如果是小型实验或预实验，也可以选择小规格的试剂盒。

操作步骤

结果分析

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。

使用注意事项：严格按照试剂盒说明书进行操作，包括试剂的保存条件、使用前的平衡时间、加样量、温育时间和温度、洗涤步骤等。实验前要确保所有仪器设备正常运行，如酶标仪、洗板机等。做好质量控制，包括设置阳性对照、阴性对照和空白对照，以监测实验的准确性和可靠性。同时，注意避免交叉污染，使用一次性吸头和容器，不同批号的试剂不要混用。

ELISA检测试剂盒承诺

公司长期与各大高校、医院及 科研单位保持着良好的合作关系，公司的产品质量及服务态度得到了他们的一致认可。笃玛生物本着客户至上的原则为客户提供 产品，公司承诺产品有任何质量的问题免费包退换（非人为因素造成的）。公司提供免费代测服务，并且承诺收到样本七个工作日出结果，确保数据的准确性。

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