检测原理

试剂盒组成

• 包被板：一般为 96 孔或 48 孔的微孔板，表面已预包被抗 REG1β 抗体。
• 标准品：一系列已知浓度的 REG1β 标准品，用于绘制标准曲线，通常有 6 - 8 个不同浓度梯度。
• 酶标抗体：如辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗 REG1β 抗体，与 REG1β 结合后用于催化底物显色。
• 底物：常用四甲基联苯胺（TMB），在酶的作用下发生显色反应，在酸性条件下呈蓝色，加入终止液后变为黄色。
• 终止液：通常为硫酸溶液，用于终止显色反应，使颜色稳定以便于酶标仪读数。
• 样本稀释液：用于稀释血清、血浆、细胞培养上清液等样本，使样本中的 REG1β 浓度在试剂盒的检测范围内。
• 洗涤液：用于洗涤微孔板，去除未结合的物质，减少非特异性反应。

试剂盒性能

• 准确性：回收率一般在 80% - 120% 之间，与其他可靠检测方法的相关系数（r）大于 0.9。
• 精密度：批内精密度的变异系数（CV）小于 10%，批间精密度的 CV 小于 15%。
• 灵敏度：能检测到的 REG1β 浓度通常在 pg/mL 级别，比如 5 - 10 pg/mL。
• 特异性：抗体与 REG1β 特异性结合，与其他相关蛋白无明显交叉反应。

注意事项

• 试剂盒需在 2 - 8℃冷藏保存，使用前需平衡至室温，避免温度波动影响试剂盒性能。
• 样本采集要规范，如采集血液样本时要防止溶血，采集后及时检测或按要求保存。
• 加样要准确，使用加样器时要确保其准确性，避免交叉污染，加样量的准确与否直接影响检测结果。
• 严格按照说明书进行洗涤步骤，既要充分洗涤去除杂质，又不能过度洗涤导致复合物洗脱。
• 底物需避光保存，使用时避免接触氧化剂等，酶标仪波长根据底物正确设置，一般 TMB 底物在 450 nm 波长读数。