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小鼠（Mouse）半胱氨酸（Cys）ELISA检测试剂盒
  • 品牌：DUMABIO
  • 产地：上海
  • 型号：48/96T
  • 货号：DM-X6760
  • 价格： ￥1860/盒
  • 发布日期： 2025-04-14
  • 更新日期： 2025-04-14
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产地 上海
保存条件 2-8°
品牌 DUMABIO
货号 DM-X6760
用途 科研实验
检测方法
保质期 6个月
适应物种
检测限
数量 999
包装规格 48/96T
标记物
样本
应用
是否进口 否

小鼠（Mouse）半胱氨酸（Cys）ELISA检测试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断


产品货号：DM-X6760

产品规格：【48T/96T】


一、产品概述
本小鼠半胱氨酸（Cys）ELISA 检测试剂盒，旨在为科研工作者提供一种高效、准确检测小鼠样本中半胱氨酸含量的工具。试剂盒货号为 [具体货号]，属于酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒类型，规格为 96 孔板，可进行 96 次检测，适用于小鼠血清、血浆等多种样本类型。
二、检测原理
本试剂盒采用竞争法 ELISA 原理。试剂盒中的包被板预先包被有半胱氨酸抗原，当加入标准品、样本和酶标记半胱氨酸抗体时，样本或标准品中的半胱氨酸与包被板上的半胱氨酸抗原竞争结合酶标记半胱氨酸抗体。反应一段时间后，洗去未结合的物质，再加入底物显色。颜色的深浅与样本中半胱氨酸的含量呈反比，通过酶标仪在特定波长下测定吸光度（OD 值），根据标准曲线即可计算出样本中半胱氨酸的含量。
三、试剂盒组成
  1. ELISA 微孔板（可拆卸）：8×12 条，-20°C 保存。板上已包被好半胱氨酸抗原，用于与样本及试剂发生免疫反应。
  1. 冻干标准品：2 瓶，-20°C 保存。使用时需按照说明书进行复溶，用于绘制标准曲线，以确定样本中半胱氨酸的含量。
  1. 样本稀释液：20 ml，-20°C 保存。用于稀释样本，确保样本浓度在试剂盒的检测范围内，同时维持样本的稳定性。
  1. 检测试剂 A：60 μl，-20°C 保存。为酶标记半胱氨酸抗体，在反应中与半胱氨酸结合。
  1. 检测试剂 B：120 μl，-20°C 保存。在检测过程中发挥关键作用，参与最终的显色反应。
  1. 洗涤缓冲液：30ml，4°C 保存。用于洗涤微孔板，去除未结合的物质，减少非特异性反应，保证检测结果的准确性。
  1. 底物：10 ml，4°C 保存。与酶标记半胱氨酸抗体结合后，在合适条件下发生显色反应，通过颜色变化反映样本中半胱氨酸的含量。
  1. 终止液：10 ml，4°C 保存。用于终止显色反应，使反应结果稳定，便于酶标仪准确读取 OD 值。
  1. 封板膜：5 张，用于在反应过程中密封微孔板，防止液体蒸发和外界污染，保证反应体系的稳定性。
四、检测范围
本试剂盒的检测范围为 0.312 - 20 μg/ml，在此范围内，试剂盒能够准确检测小鼠样本中的半胱氨酸含量，具有较高的灵敏度和可靠性。若样本中半胱氨酸含量超出此范围，建议对样本进行适当稀释后重新检测。
五、样本要求
  1. 血清：若使用血清分离管，需将样本在室温下静置 30 分钟使其凝固，然后以 1,000 x g 的离心力离心 10 分钟，收集血清层。所得血清可立即进行检测，若暂时不检测，需分装后储存于 - 80°C，避免反复冻融。若不使用血清分离管，则将样本在 2 - 8°C 下静置过夜使其凝固，后续离心及储存步骤同上。
  1. 血浆：使用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集血浆样本。采集后 30 分钟内，在 4°C 下以 1000 × g 的离心力离心 15 分钟，收集血浆层。血浆可立即检测，若需保存，同样分装后储存于 - 80°C，避免反复冻融。注意，严重溶血的样本不适合本试剂盒检测。
  1. 其他样本（如尿液、脑脊液、细胞培养上清液等）：尿液（留取中段尿）收集于无菌容器中，以 2000 - 3000 rpm 的转速离心 20 分钟，取上清液立即检测。若有沉淀，需重复离心步骤。脑脊液样本处理方法类似。细胞培养上清液通过移液器收集后，在 4°C 下以 1500 rpm 的转速离心 20 分钟，取清亮的上清液立即检测。
六、操作步骤
  1. 准备工作：提前将试剂盒从冰箱中取出，平衡至室温（约 20 - 25°C）。准备好所需的实验器材，如酶标仪、移液器、离心机、涡旋振荡器等，并确保酶标仪波长设置为 450 nm，提前预热仪器。
  1. 加样：向微孔板中每孔分别加入 50 μl 标准品、空白对照（加入样本稀释液）或处理好的样本。加样时，移液器枪头应尽量接近孔底，避免接触孔壁，同时注意避免产生气泡。
  1. 加入检测试剂 A：加样完毕后，立即向每孔中加入 50 μl 检测试剂 A 工作液，使用封板膜密封微孔板，轻轻振荡微孔板，确保液体充分混合。将微孔板置于 37°C 恒温培养箱中孵育 1 小时。若检测试剂 A 出现浑浊，需将其放置于室温下，待溶液澄清均匀后再使用。
  1. 洗涤：孵育结束后，小心吸取孔内液体，可使用洗板机或手动洗涤。洗涤时，向每孔中加入约 400 μl 洗涤缓冲液（可使用喷壶、多道移液器、分液漏斗或自动洗板机加液），静置 1 - 2 分钟后， 去除孔内液体。重复洗涤步骤 3 次，每次洗涤后需将微孔板倒置在干净的吸水纸上，拍干残留液体，确保每一步液体都被完全去除。
  1. 加入检测试剂 B：向每孔中加入 100 μl 检测试剂 B 工作液，再次用封板膜密封微孔板，轻轻振荡混匀后，将微孔板放回 37°C 恒温培养箱中孵育 45 分钟。
  1. 二次洗涤：孵育结束后，按照步骤 4 的方法，对微孔板进行 5 次洗涤，确保 去除未结合的物质。
  1. 加入底物：洗涤完成后，向每孔中加入 90 μl 底物溶液，使用新的封板膜密封微孔板，将微孔板置于 37°C 恒温培养箱中避光孵育 10 - 20 分钟。孵育过程中需密切观察标准品孔的颜色变化，当标准品孔出现明显的梯度颜色变化时，即可终止反应。若颜色变化不明显，可适当延长孵育时间，但最长不超过 30 分钟。
  1. 加入终止液：向每孔中加入 50 μl 终止液，轻轻振荡微孔板，使溶液充分混合。若颜色变化不均匀，可适当轻拍微孔板。
  1. 读取 OD 值：立即使用酶标仪在 450 nm 波长下测定每孔的吸光度（OD 值）。读取 OD 值前，需确保酶标仪已预热并设置好正确的参数。
  1. 结果计算：根据标准品的 OD 值绘制标准曲线，以标准品浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，使用合适的软件或绘图工具绘制曲线。然后根据样本的 OD 值，从标准曲线上查得对应的半胱氨酸浓度。若样本进行了稀释，需将查得的浓度乘以稀释倍数，得到样本中实际的半胱氨酸含量。
七、注意事项
  1. 本试剂盒仅用于科研实验，不得用于临床诊断等其他用途。
  1. 实验过程中应严格遵守实验室安全操作规程，穿戴好防护服、手套、护目镜等防护用品。检测试剂 A 和检测试剂 B 可能含有有害物质，操作时需特别小心，避免接触皮肤和眼睛。若不慎接触，应立即用大量清水冲洗，并及时就医。
  1. 试剂盒从冰箱取出后，应平衡至室温后再使用，避免因温度差异导致实验误差。不同批次的试剂盒成分可能略有差异，请勿混用不同批次的试剂盒。
  1. 加样过程中要准确、快速，尽量减少各孔之间的加样时间差异，以保证实验结果的准确性和重复性。使用移液器时，需定期校准，确保移液体积准确。
  1. 洗涤过程至关重要，洗涤不充分会导致非特异性结合增加，使背景值升高，影响检测结果的准确性。因此，务必严格按照操作步骤进行洗涤，并确保每孔液体被完全去除。
  1. 底物溶液对光敏感，使用和保存时需避光。显色反应时间应严格控制，避免过长或过短，否则会影响结果的准确性。
  1. 实验结束后，所有试剂应按照规定的储存温度分别保存，直至有效期。剩余的试剂盒应妥善保存，避免受潮、受热和阳光直射。废弃的试剂盒及实验废弃物应按照实验室废弃物处理规定进行处理，避免对环境造成污染。




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