基本原理

• 通常采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。即往预先包被有小鼠凝血因子 XI 捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP 标记的检测抗体，经过温育并 洗涤后，用底物 TMB 显色4。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色，颜色的深浅和样品中的小鼠凝血因子 XI 含量呈正相关，通过酶标仪在特定波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度4。

样本要求4

• 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可，或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。
• 血浆：用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8℃ 1000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测，或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。
• 组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01M, pH=7.4) 冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的 PBS 按一定重量体积比（如 1:9）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为进一步裂解组织细胞，可对匀浆液进行超声破碎或反复冻融， 将匀浆液于 5000×g 离心 5-10 分钟，取上清检测。
• 细胞培养物上清或其它生物标本：1000×g 离心 20 分钟，取上清即可检测，或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。同时，标本溶血会影响 检测结果，溶血标本不宜进行此项检测。