检测原理

试剂盒组成

• 酶标包被板：1 块（96 孔或 48 孔），已包被 L - 精氨酸抗原，2 - 8℃保存。
• 标准品：通常为已知浓度的 L - 精氨酸标准溶液，如 0、15.625、31.25、62.5、125、250、500、1000ng/mL 等不同浓度，用于绘制标准曲线，一般为 0.5mL×1 瓶，2 - 8℃保存。
• 样品稀释液：用于稀释样本，使样本中的 L - 精氨酸浓度处于试剂盒的检测范围内，3mL×1 瓶或 6mL×1 瓶，2 - 8℃保存。
• 显色剂 A 液和 B 液：一般为无色液体，A 液和 B 液混合后在酶的催化下会发生显色反应，生成蓝色产物，加入终止液后变为黄色，各 3mL×1 瓶或 6mL×1 瓶，2 - 8℃保存，避光。
• 终止液：通常为硫酸溶液，用于终止显色反应，使颜色稳定，便于酶标仪读数，3mL×1 瓶或 6mL×1 瓶，2 - 8℃保存。
• 浓缩洗涤液：为 20 倍或 30 倍浓缩液，使用时需稀释，用于洗涤微孔板，去除未结合的物质，减少非特异性吸附，（20mL×20 倍）×1 瓶或（20mL×30 倍）×1 瓶，2 - 8℃保存。
• 封板膜：2 片（48 孔）或 2 片（96 孔），用于在温育过程中密封微孔板，防止水分蒸发和外界污染。
• 说明书：1 份，包含试剂盒的详细使用方法、注意事项、性能指标等信息。

样本处理及要求

• 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可。或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。
• 血浆：用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的 30 分钟内于 2 - 8℃、1000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。上清也可置于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。
• 组织匀浆：用预冷的 PBS（0.01M，pH = 7.4）冲洗组织，去除残留血液。称重后将组织剪碎，按 1:9 的重量体积比（如 1g 组织样品对应 9mL PBS，可根据实验需要适当调整）加入 PBS 和蛋白酶抑制剂，于冰上充分研磨。也可对匀浆液进行超声破碎或反复冻融， 将匀浆液于 5000×g 离心 5 - 10 分钟，取上清检测。
• 细胞培养物上清或其它生物标本：1000×g 离心 20 分钟，取上清即可检测，或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。需注意，标本溶血会影响 检测结果，溶血标本不宜进行此项检测。

检测范围、灵敏度、特异性和重复性

• 检测范围：不同试剂盒的检测范围有所不同，需详见产品说明书。
• 灵敏度： 检测浓度小于 0.1U/L。
• 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。