小鼠谷胱甘肽-S-转移酶Kl ELISA试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-X6710

产品规格：【48T/96T】

• 紫外分光光度法7：这是一种常用的方法。GST - Kl 能够催化谷胱甘肽（GSH）与 1 - 氯 - 2,4 - 二硝基苯（CDNB）结合，其结合产物在 340nm 波长处有特征吸收峰。通过测定 340nm 波长处吸光度的上升速率，就可以计算出 GST - Kl 的活性。具体操作时，需设置空白管和测定管，空白管中加入试剂一、试剂二和试剂三，测定管中加入样品上清液、试剂二和试剂三，分别在混匀后测定初始吸光度，再经过水浴保温后测定反应后的吸光度，根据公式计算酶活性。
• 比色法：利用纳米酶的特性建立比色法来检测 GST - Kl 活性。例如，制备具有铁掺杂空心碳球（Fe / HCS）的氧化酶样纳米酶，它可将无色的 3,3',5,5' - 四甲基联苯胺（TMB）氧化为蓝色氧化态 TMB（oxTMB），而 GSH 可以还原 oxTMB 使蓝色褪色。GST - Kl 催化 GSH 与 CDNB 之间的结合反应形成加合物，降低了 GSH 的还原性，从而使 oxTMB 的褪色程度与 GST - Kl 活性相关，通过比色即可检测 GST - Kl 的活性。
• 荧光法：某些荧光底物可用于检测 GST - Kl 的活性。GST - Kl 催化荧光底物与 GSH 反应后，会导致荧光强度发生变化，通过检测荧光强度的改变来反映酶活性。这种方法灵敏度较高，但可能需要特殊的荧光检测仪器。
• 酶联免疫吸附试验（ELISA）：虽然 ELISA 主要用于检测蛋白质的含量，但也可以通过设计特定的实验来间接反映 GST - Kl 的活性。例如，使用针对 GST - Kl 的特异性抗体，通过检测酶标板上结合的 GST - Kl 与底物反应后的显色程度，来推断 GST - Kl 的活性。不过该方法相对复杂，且需要特定的试剂盒和设备。
• 报告基因法6：构建含有 GST - Kl 启动子的荧光素酶报告基因质粒，将其转染到细胞中。如果 GST - Kl 具有活性，会启动报告基因的表达，产生荧光素酶，通过检测荧光素酶的活性来间接反映 GST - Kl 的活性。例如，将构建的报告基因质粒瞬时转染到 3T3 - L1 和人胚肾（HEK）293 细胞中，48 小时后检测荧光素酶的活性，从而分析 GST - Kl 启动子的活性，进而了解 GST - Kl 的活性情况。

类型

结果分析

次实验：
标准曲线为：
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
为例，已知OD值，计算浓度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x，可以得到：
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。