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小鼠T细胞共刺激分子OX40配体ELISA试剂盒
  • 品牌：DUMABIO
  • 产地：上海
  • 型号：48/96T
  • 货号：DM-X6709
  • 价格： ￥1860/盒
  • 发布日期： 2025-04-16
  • 更新日期： 2025-04-16
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产地 上海
保存条件 2-8°
品牌 DUMABIO
货号 DM-X6709
用途 科研实验
检测方法
保质期 6个月
适应物种
检测限
数量 999
包装规格 48/96T
标记物
样本
应用
是否进口 否

小鼠T细胞共刺激分子OX40配体ELISA试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断


产品货号：DM-X6709

产品规格：【48T/96T】


小鼠 T 细胞共刺激分子 OX40 配体 ELISA 试剂盒通常采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术，其具体检测方法如下：
  1. 准备工作：准备所有试剂，包括涂板抗体、检测抗体（可能带有酶标记）、底物、阻断液、洗涤液等。准备样本和标准品，根据需要稀释样本和制备标准曲线所需的标准品。确保酶标仪和洗板机等设备正常工作。
  2. 涂板：将特异性抗小鼠 OX40 配体的抗体预包被在高亲和力的酶标板上。将微孔板在 4°C 过夜或室温下孵育数小时，以使抗体充分吸附到孔壁。
  3. 阻断：使用阻断液填充每个孔，以阻断未被抗体占据的表面，防止非特异性吸附。孵育一定时间（通常 1-2 小时）后，用洗涤液洗涤板子以去除未结合的阻断剂。
  4. 加样和孵育：向孔中加入样本和标准品，每个样本和标准品通常设置重复孔。在适当温度下孵育一定时间，允许目标抗原（OX40 配体）与捕获抗体结合。
  5. 加入检测抗体：加入经过酶标记的检测抗体，与目标抗原形成 “夹心” 复合物。再次孵育，允许检测抗体与抗原结合。
  6. 洗涤：使用洗涤液 洗涤板子，去除未结合的检测抗体。洗涤步骤对于减少背景信号和提高实验特异性至关重要。
  7. 底物反应：向每个孔中加入底物溶液。酶标记的检测抗体会催化底物产生可见光谱的产物。孵育直到颜色发展适宜，但要避免过度发色。
  8. 停止反应：加入停止液终止底物反应，常见的停止液有硫酸或盐酸。
  9. 结果读取：使用酶标仪读取各孔的吸光度（OD 值），根据标准曲线计算样本中目标抗原（OX40 配体）的浓度。
  10. 数据分析：分析吸光度数据，利用标准曲线计算样本中的目标分子浓度。

类型



试剂准备：从冰箱中取出试剂盒，室温平衡 30 分钟，确保所有试剂温度一致。同时，按照说明书要求配制所需的洗涤液、标准品稀释液等工作液。
样本准备：根据样本类型（血清、血浆、细胞培养上清等）和说明书要求进行处理，如血清样本需在采集后尽快离心分离，避免溶血。
仪器准备：准备好酶标仪、洗板机（可选）、移液器、吸头、蒸馏水或去离子水等。

结果分析

次实验：
标准曲线为：
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
为例，已知OD值，计算浓度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x，可以得到：
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0


绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。


注意事项
  1. 本试剂盒仅用于科研实验，严禁用于临床诊断、 或其他非科研用途。使用试剂盒前，请仔细阅读说明书，熟悉操作步骤和注意事项。
  1. 实验过程中，应严格遵守实验室安全操作规程，穿戴好防护服、手套、护目镜等防护用品。试剂盒中的某些试剂可能具有毒性或腐蚀性，如酶标试剂、终止液等，操作时需特别小心，避免接触皮肤、眼睛和口腔。若不慎接触，应立即用大量清水冲洗，并及时就医。
  1. 试剂盒从冰箱取出后，需在室温下充分平衡后再使用，避免因温度差异导致实验误差。不同批次的试剂盒可能存在一定差异，请勿混用不同批次的试剂盒组分，以免影响检测结果的准确性和重复性。
  1. 加样过程是实验的关键步骤之一，加样量的准确性和一致性直接影响检测结果。使用移液器时，需定期校准，确保移液体积准确无误。加样过程中，要避免产生气泡，若有气泡，应轻轻弹击微孔板使气泡逸出，以免影响反应结果。
  1. 洗涤过程对降低背景干扰、提高检测特异性至关重要。无论是使用洗板机还是手动洗涤，都要确保洗涤充分，每孔液体被完全去除。洗涤液应现用现配，避免使用过期或受污染的洗涤液。


如何保证ELISA试剂盒的准确性和可靠性？

试剂盒选择

· 评估性能指标：查看试剂盒的说明书，关注灵敏度、特异性、重复性等性能指标。灵敏度反映了试剂盒检测低浓度目标物的能力；特异性体现了试剂盒对目标物的识别准确性，避免与其他类似物质发生交叉反应；重复性则通过多次检测同一样本的结果一致性来评估。


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