小鼠蛋白酪氨酸激酶2(PTK2)酶联免疫试剂盒
- 价格: ¥1860/盒
- 发布日期: 2025-04-16
- 更新日期: 2025-04-16
产品详请
产地 |
上海
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保存条件 |
2-8°
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品牌 |
DUMABIO
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货号 |
DM-X6700
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用途 |
科研实验
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检测方法 |
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保质期 |
6个月
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适应物种 |
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检测限 |
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数量 |
999
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包装规格 |
48/96T
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标记物 |
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样本 |
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应用 |
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是否进口 |
否
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小鼠蛋白酪氨酸激酶2(PTK2)酶联免疫试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
产品货号:DM-X6700
产品规格:【48T/96T】
小鼠蛋白酪氨酸激酶 2(PTK2)酶联免疫试剂盒通常采用双抗体夹心 ELISA 法进行检测,具体步骤如下2:
- 样本采集与处理:根据检测目的,采集合适的生物样本,如血液、血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液等。对样本进行处理,如离心、稀释等,以去除杂质和干扰物质,使样本中的 PTK2 能够与抗体充分接触。
- 包被:将针对小鼠 PTK2 的特异性抗体固定在固相载体(如 96 孔酶标板)上。这一步通常在 4℃过夜或在 37℃孵育一段时间,使抗体牢固地吸附在微孔板表面。
- 封闭:用无关蛋白质(如牛血清白蛋白)封闭固相载体上未结合抗体的位点,以减少非特异性结合,降低背景信号。
- 加样:将待检样本和标准品加入到已包被和封闭的酶标板孔中,在适当温度(如 37℃)下孵育,使样本中的 PTK2 与固相载体上的抗体发生特异性结合。
- 加酶标抗体:加入与 PTK2 特异性结合的酶标记抗体,再次孵育,使酶标抗体与已结合在固相载体上的 PTK2 形成复合物。
- 洗涤:多次用洗涤液洗涤酶标板,以去除未结合的酶标抗体以及其他杂质,避免干扰后续检测。
- 加底物:加入酶反应的底物,如 TMB(3,3',5,5'- 四甲基联苯胺),孵育一定时间,在酶的催化下,底物发生显色反应。
- 终止反应:根据底物的特性,加入终止液终止反应,使颜色稳定,便于准确测量。
- 检测:使用酶标仪在特定波长下测量各孔的吸光度(OD 值)。
- 结果分析:根据标准品的浓度和对应的 OD 值绘制标准曲线,通过待检样本的 OD 值在标准曲线上计算出样本中 PTK2 的浓度。
类型
试剂准备:从冰箱中取出试剂盒,室温平衡 30 分钟,确保所有试剂温度一致。同时,按照说明书要求配制所需的洗涤液、标准品稀释液等工作液。 样本准备:根据样本类型(血清、血浆、细胞培养上清等)和说明书要求进行处理,如血清样本需在采集后尽快离心分离,避免溶血。 仪器准备:准备好酶标仪、洗板机(可选)、移液器、吸头、蒸馏水或去离子水等。 结果分析
次实验:
标准曲线为:
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
为例,已知OD值,计算浓度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x,可以得到:
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0
绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,对应的吸光度值为纵坐标,在坐标纸上绘制标准曲线,或使用软件(如 Excel、GraphPad Prism 等)进行线性回归分析,得到标准曲线方程。
注意事项
- 本试剂盒仅用于科研实验,严禁用于临床诊断、 或其他非科研用途。使用试剂盒前,请仔细阅读说明书,熟悉操作步骤和注意事项。
- 实验过程中,应严格遵守实验室安全操作规程,穿戴好防护服、手套、护目镜等防护用品。试剂盒中的某些试剂可能具有毒性或腐蚀性,如酶标试剂、终止液等,操作时需特别小心,避免接触皮肤、眼睛和口腔。若不慎接触,应立即用大量清水冲洗,并及时就医。
- 试剂盒从冰箱取出后,需在室温下充分平衡后再使用,避免因温度差异导致实验误差。不同批次的试剂盒可能存在一定差异,请勿混用不同批次的试剂盒组分,以免影响检测结果的准确性和重复性。
- 加样过程是实验的关键步骤之一,加样量的准确性和一致性直接影响检测结果。使用移液器时,需定期校准,确保移液体积准确无误。加样过程中,要避免产生气泡,若有气泡,应轻轻弹击微孔板使气泡逸出,以免影响反应结果。
- 洗涤过程对降低背景干扰、提高检测特异性至关重要。无论是使用洗板机还是手动洗涤,都要确保洗涤充分,每孔液体被完全去除。洗涤液应现用现配,避免使用过期或受污染的洗涤液。
如何保证ELISA试剂盒的准确性和可靠性?
试剂盒选择
· 评估性能指标:查看试剂盒的说明书,关注灵敏度、特异性、重复性等性能指标。灵敏度反映了试剂盒检测低浓度目标物的能力;特异性体现了试剂盒对目标物的识别准确性,避免与其他类似物质发生交叉反应;重复性则通过多次检测同一样本的结果一致性来评估。
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