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小鼠细胞色素P450 1A2(CYP1A2)酶联免疫试剂盒
  • 品牌:DUMABIO
  • 产地:上海
  • 型号:48/96T
  • 货号:DM-X6678
  • 价格: ¥1860/盒
  • 发布日期: 2025-04-18
  • 更新日期: 2025-04-18
产品详请
产地 上海
保存条件 2-8°
品牌 DUMABIO
货号 DM-X6678
用途 科研实验
检测方法
保质期 6个月
适应物种
检测限
数量 999
包装规格 48/96T
标记物
样本
应用
是否进口

小鼠细胞色素P450 1A2(CYP1A2)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断


产品货号:DM-X6678

产品规格:【48T/96T】

以下是关于小鼠细胞色素 P450 1A2(CYP1A2)酶联免疫试剂盒的相关信息:

检测原理

通常采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。在微孔板上预包被抗小鼠 CYP1A2 的特异性抗体,加入待测样本和标准品后,样本中的 CYP1A2 抗原会与固相抗体结合。再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗 CYP1A2 抗体,形成固相抗体 - 抗原 - 酶标抗体的夹心复合物。经过洗涤去除未结合的物质后,加入底物 TMB。在 HRP 的催化下,TMB 发生显色反应,颜色的深浅与样本中 CYP1A2 的含量呈正相关。通过酶标仪在特定波长下测定吸光度值,与标准曲线对比,即可计算出样本中 CYP1A2 的浓度

基本参数

  • 检测指标:小鼠细胞色素 P450 1A2(CYP1A2)
  • 检测范围:如 United States Biological 公司的试剂盒检测范围为 0.156 - 10ng/ml
  • 敏感性:例如 United States Biological 公司的试剂盒敏感性为 0.094ng/ml
  • 特异性:试剂盒与小鼠 CYP1A2 特异性结合,与其他细胞色素 P450 家族成员或其他蛋白无明显交叉反应。
  • 产品规格:常见的有 48T、96T 等

产品组成

  • 酶标板:已预包被抗小鼠 CYP1A2 抗体的 96 孔或 48 孔板,通常为可拆卸式,方便使用
  • 标准品:一般为已知浓度的小鼠 CYP1A2 蛋白,用于制作标准曲线,以便对样本中的 CYP1A2 进行定量分析。
  • 酶标抗体:辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗小鼠 CYP1A2 抗体,用于与结合在固相抗体上的 CYP1A2 抗原结合,形成夹心结构,并催化底物显色。
  • 底物 TMB:在 HRP 的作用下发生颜色反应,通常为蓝色,加入终止液后变为黄色,便于酶标仪检测
  • 终止液:如 3M H?SO?等强酸溶液,用于终止酶促反应,使颜色稳定,以便准确读取吸光度值
  • 洗涤缓冲液:用于洗涤酶标板,去除未结合的抗原、抗体及其他杂质,保证检测的特异性和准确性。
  • 其他:还可能包括样本稀释液、抗体稀释液、封板膜等。



试剂准备:从冰箱中取出试剂盒,室温平衡 30 分钟,确保所有试剂温度一致。同时,按照说明书要求配制所需的洗涤液、标准品稀释液等工作液。
样本准备:根据样本类型(血清、血浆、细胞培养上清等)和说明书要求进行处理,如血清样本需在采集后尽快离心分离,避免溶血。

仪器准备:准备好酶标仪、洗板机(可选)、移液器、吸头、蒸馏水或去离子水等。


ELISA试剂盒操作步骤:
1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的OD值。



结果分析

绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,对应的吸光度值为纵坐标,在坐标纸上绘制标准曲线,或使用软件(如 Excel、GraphPad Prism 等)进行线性回归分析,得到标准曲线方程。


注意事项
  1. 本试剂盒仅用于科研实验,严禁用于临床诊断、 或其他非科研用途。使用试剂盒前,请仔细阅读说明书,熟悉操作步骤和注意事项。
  1. 实验过程中,应严格遵守实验室安全操作规程,穿戴好防护服、手套、护目镜等防护用品。试剂盒中的某些试剂可能具有毒性或腐蚀性,如酶标试剂、终止液等,操作时需特别小心,避免接触皮肤、眼睛和口腔。若不慎接触,应立即用大量清水冲洗,并及时就医。
  1. 试剂盒从冰箱取出后,需在室温下充分平衡后再使用,避免因温度差异导致实验误差。不同批次的试剂盒可能存在一定差异,请勿混用不同批次的试剂盒组分,以免影响检测结果的准确性和重复性。
  1. 加样过程是实验的关键步骤之一,加样量的准确性和一致性直接影响检测结果。使用移液器时,需定期校准,确保移液体积准确无误。加样过程中,要避免产生气泡,若有气泡,应轻轻弹击微孔板使气泡逸出,以免影响反应结果。
  1. 洗涤过程对降低背景干扰、提高检测特异性至关重要。无论是使用洗板机还是手动洗涤,都要确保洗涤充分,每孔液体被完全去除。洗涤液应现用现配,避免使用过期或受污染的洗涤液。

试剂盒选择

· 评估性能指标:查看试剂盒的说明书,关注灵敏度、特异性、重复性等性能指标。灵敏度反映了试剂盒检测低浓度目标物的能力;特异性体现了试剂盒对目标物的识别准确性,避免与其他类似物质发生交叉反应;重复性则通过多次检测同一样本的结果一致性来评估。


上海笃玛生物科技有限公司

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