白介素8受体α(IL8Rα)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-X6645

产品规格：【48T/96T】

白介素 8 受体 α（IL8Rα）酶联免疫试剂盒通常采用双抗体夹心 ELISA 法，以下是其相关信息：

• 检测原理：以小鼠 IL8Rα ELISA试剂盒为例，试剂盒中的微孔板已预先包被针对 IL8Rα 的特异性抗体。加入标本（如组织匀浆、细胞裂解液等）和标准品后，其中的 IL8Rα 会与包被在微孔板表面的抗体特异性结合27。接着加入生物素标记的抗 IL8Rα 抗体，它也会与 IL8Rα 结合，形成抗体 - 抗原 - 生物素标记抗体复合物7。随后加入亲和素 - HRP，生物素与亲和素特异性结合，从而将 HRP 连接到复合物上。加入底物 TMB 后，在 HRP 的催化下，TMB 转化为蓝色，再加入硫酸溶液终止反应，颜色转变为黄色。通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），样品中 IL8Rα 的浓度与 OD 值呈正相关，将样品的 OD 值与标准曲线对比，即可计算出样品中 IL8Rα 的浓度。
• 试剂盒组成：通常包含预包被的 96 孔板、标准品、生物素标记的检测抗体、亲和素 - HRP、稀释用缓冲液、显色液（A、B）、洗涤液、终止液、封板膜和说明书等。
• 样本类型：常见的有组织匀浆、细胞裂解液、血清、血浆及其他生物液体。
• 检测范围：不同试剂盒的检测范围有所差异，如有的试剂盒检测范围是 0.15 - 10ng/mL。

仪器准备：准备好酶标仪、洗板机（可选）、移液器、吸头、蒸馏水或去离子水等。

ELISA试剂盒操作步骤：
1.使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8.取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果分析

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。