小鼠过氧化氢酶(CAT)酶联免疫试剂盒
- 价格: ¥1860/盒
- 发布日期: 2025-04-23
- 更新日期: 2025-04-23
产品详请
产地 |
上海
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保存条件 |
2-8°
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品牌 |
DUMABIO
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货号 |
DM-X6641
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用途 |
科研实验
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检测方法 |
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保质期 |
6个月
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适应物种 |
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检测限 |
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数量 |
999
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包装规格 |
48/96T
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标记物 |
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样本 |
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应用 |
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是否进口 |
否
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小鼠过氧化氢酶(CAT)酶联免疫试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
产品货号:DM-X6641
产品规格:【48T/96T】
小鼠过氧化氢酶(CAT)酶联免疫试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等样本中 CAT 含量的试剂盒。以下是其相关信息:
- 检测原理:通常采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒中的微孔板已预先包被针对小鼠 CAT 的特异性抗体。加入标本和标准品后,其中的 CAT 会与包被在微孔板表面的抗体特异性结合。接着加入生物素标记的抗 CAT 抗体,它也会与 CAT 结合,形成抗体 - 抗原 - 生物素标记抗体复合物。随后加入亲和素 - HRP,生物素与亲和素特异性结合,从而将 HRP 连接到复合物上。加入底物 TMB 后,在 HRP 的催化下,TMB 转化为蓝色,再加入硫酸溶液终止反应,颜色转变为黄色。通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),样品中 CAT 的浓度与 OD 值呈正相关,将样品的 OD 值与标准曲线对比,即可计算出样品中 CAT 的浓度。
- 试剂盒组成:一般包含预包被抗体的微孔板、CAT 标准品、生物素标记的检测抗体、亲和素 - HRP、标准稀释液、检测试剂 A 和 B、底物 TMB、阳性对照、终止液、洗涤液等。
- 样本类型:常见的有血清、血浆、细胞培养上清液、组织 homogenates 等。
- 检测范围与灵敏度:不同试剂盒的检测范围和灵敏度有所不同。如 CUSABIO 公司的试剂盒检测范围是 15.6 - 1000pg/mL,灵敏度为 3.9pg/mL。
- 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右(2000 - 3000 转 / 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS(PH7.2 - 7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右(2000 - 3000 转 / 分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
- 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2 - 8℃的温度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右(2000 - 3000 转 / 分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
- 其他:标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于 - 20℃保存,但应避免反复冻融。不能检测含 NaN?的样品,因 NaN?抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
主要基于抗原 - 抗体的特异性结合反应以及酶的高效催化作用。其基本步骤和原理如下:
1. 抗原或抗体包被:将已知的抗原或抗体固定在微孔板的表面。
2. 样本孵育:加入待检测样本,若样本中存在目标抗原或抗体,就会与包被在微孔板上的抗体或抗原结合。
3. 洗涤:用洗涤液冲洗微孔板,去除未结合的物质。
4. 酶标记物孵育:加入酶标记的抗体或抗原,它会与结合在微孔板上的目标物结合。
5. 再次洗涤:去除未结合的酶标记物。
6. 底物显色:加入底物,酶催化底物反应,产生可检测的信号,如颜色变化。
7. 终止反应:加入终止液,终止酶促反应。
8. 检测:使用酶标仪检测吸光度值,通过与标准曲线对比,确定样本中目标物的含量。
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