小鼠胆囊收缩素八肽(CCK-8)酶联免疫试剂盒
- 发布日期: 2025-04-28
- 更新日期: 2025-04-28
产品详请
产地 |
上海
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保存条件 |
2-8°
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品牌 |
DUMABIO
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货号 |
DM-X6601
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用途 |
科研实验
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检测方法 |
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保质期 |
6个月
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适应物种 |
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检测限 |
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数量 |
999
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包装规格 |
96T
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标记物 |
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样本 |
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应用 |
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是否进口 |
否
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小鼠可溶性CD14(sCD14)酶联免疫试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
产品货号:DM-X6601
产品规格:【48T/96T】
小鼠可溶性 CD14(sCD14)酶联免疫试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理,具体如下:
- 固相抗体包被:试剂盒中的微孔板已预先包被有针对小鼠 sCD14 的特异性抗体。该固相抗体能够特异性地识别并结合样品中的 sCD14 抗原。
- 抗原抗体反应:将标准品和待测样本加入到包被有抗体的微孔中,样本中的 sCD14 抗原会与固相抗体发生特异性结合。然后加入生物素标记的抗 sCD14 抗体,它会与已经结合在固相抗体上的 sCD14 抗原结合,形成 “固相抗体 - sCD14 抗原 - 生物素标记抗体” 复合物。
- 酶标物结合:加入亲和素标记的辣根过氧化物酶(HRP)。由于生物素与亲和素具有高度的特异性结合能力,HRP 通过亲和素与生物素标记的抗体结合,进一步稳定免疫复合物,同时也为后续的显色反应提供了催化酶。
- 洗涤:通过多次洗涤步骤,去除未结合的物质,包括未结合的抗原、抗体、酶标物以及其他杂质,以减少非特异性信号,确保检测的特异性和准确性。
- 底物显色:加入底物 TMB,在 HRP 酶的催化作用下,TMB 发生氧化反应,由无色转化为蓝色。随后加入酸(如硫酸)终止液,使蓝色产物转化为最终的黄色。颜色的深浅与样品中的 sCD14 浓度呈正相关。
- 定量分析:使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值)。通过将样品的 OD 值与标准曲线进行对比,即可计算出样品中小鼠 sCD14 的浓度。标准曲线是通过对一系列已知浓度的标准品进行检测,得到其 OD 值并绘制而成的。
类型
- 评估试剂盒性能指标
- 灵敏度:灵敏度是指试剂盒能够检测到的 目标物浓度。根据实验需求选择具有合适灵敏度的试剂盒。如果需要检测低丰度的目标物,如一些微量的细胞因子或激素,就需要选择灵敏度高的试剂盒,通常其检测下限能够达到 pg/mL 级别。
- 特异性:特异性反映了试剂盒检测目标物的专一性,即试剂盒只对目标抗原或抗体产生反应,而与其他相关物质无交叉反应或低交叉反应。查看试剂盒说明书中关于特异性的描述,了解其对目标物的识别能力以及可能存在的交叉反应情况。可以通过查阅相关文献或咨询试剂盒供应商来获取更多关于特异性的信息。
- 准确性:准确性是指检测结果与真实值的接近程度。一般通过回收率实验来评估试剂盒的准确性,即向已知浓度的样本中加入一定量的目标物,然后检测回收率。理想的试剂盒回收率应在 90% - 110% 之间。
- 查看试剂盒组成和规格
- 试剂盒组成:查看试剂盒的组成成分,确保包含所有必要的试剂,如包被板、标准品、酶标抗体、底物、洗涤液、终止液等。有些试剂盒可能还会提供样本稀释液、封闭液等辅助试剂。了解各试剂的性质、保存条件和使用方法,确保其与实验条件相匹配。
- 规格选择:根据实验的样本数量和检测次数选择合适规格的试剂盒。试剂盒的规格通常以孔数来表示,如 96 孔板或 384 孔板。如果样本量较大,可选择大规格的试剂盒以节省成本和时间;如果是小型实验或预实验,也可以选择小规格的试剂盒。
操作步骤
结果分析
ELISA试剂盒实验数据的计算处理方法
1、拟和曲线:
输入 行: 浓度值, 如0 10 50 100 400
输入 行:该浓度下的调整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型”中选择“xy散点图”;在“子图表类型”中选择“折线散点图”,按“下一步”;选择“系列产生在行”,按“下一步”;数据标志,可以填写:如数据y轴,OD值;数据x轴,浓度;按下一步,点击完成。可得曲线图。
单击曲线,按右键,选择“添加趋势线”,在类型中,选择多项式;在选项中,选择显示公式,选择显示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面说的方法: 双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和曲线。
2、计算浓度:
次实验:
标准曲线为:
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
特别说明:
#.一周内使用可存于4℃,需长时间存放或多次使用建议存于-20℃.
使用注意事项:严格按照试剂盒说明书进行操作,包括试剂的保存条件、使用前的平衡时间、加样量、温育时间和温度、洗涤步骤等。实验前要确保所有仪器设备正常运行,如酶标仪、洗板机等。做好质量控制,包括设置阳性对照、阴性对照和空白对照,以监测实验的准确性和可靠性。同时,注意避免交叉污染,使用一次性吸头和容器,不同批号的试剂不要混用。
上海笃玛生物科技有限公司