小鼠α1抗胰蛋白酶(α1-AT)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-X6599

产品规格：【48T/96T】

1. 固相抗体包被：将纯化的抗小鼠 α1 - AT 抗体包被在微孔板上，形成固相载体。该抗体能够特异性地识别并结合样品中的 α1 - AT 抗原。
2. 抗原抗体反应：向包被有抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗 α1 - AT 抗体。标本或标准品中的 α1 - AT 抗原与固相抗体结合，然后生物素化的抗 α1 - AT 抗体与已结合在固相抗体上的 α1 - AT 抗原结合，形成 “固相抗体 - α1 - AT 抗原 - 生物素化抗体” 复合物。
3. 酶标物结合：加入 HRP 标记的亲和素。由于生物素与亲和素具有高度的特异性结合能力，HRP 通过亲和素与生物素化的抗体结合，进一步稳定免疫复合物，同时为后续的显色反应提供催化酶。
4. 洗涤：通过多次洗涤步骤，去除未结合的物质，包括未结合的抗原、抗体、酶标物以及其他杂质，以减少非特异性信号，确保检测的特异性和准确性。
5. 底物显色：加入底物 TMB，在 HRP 酶的催化作用下，TMB 发生氧化反应，由无色转化为蓝色。随后加入酸（如硫酸）终止液，使蓝色产物转化为最终的黄色。颜色的深浅与样品中的 α1 - AT 浓度呈正相关。
6. 定量分析：使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值）。以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，绘制标准曲线。根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

应用领域

1. 生命科学研究：ELISA试剂盒可用于检测细胞因子、激素、酶、抗体等分子的含量和活性，为生理学、免疫学、分子生物学等研究领域提供有力支持。

2. 临床医学诊断：在临床医学中，ELISA试剂盒可用于检测血清中的标志物、病毒抗体、心肌酶等指标，为临床诊断及疾病监测提供重要依据。

3. 食品安全检测：ELISA试剂盒可用于检测食品中的抗生素残留、农药残留等有害物质，确保食品质量和安全。

4. 环境监测：它还可用于检测环境中的化学物质、微生物等污染物，为环境监测和污染治理提供技术支持。

5. 动物疾病防控：在动物疫病防控方面，ELISA试剂盒可用于检测动物血清中的病毒抗体、细菌抗原等指标，为动物健康保障提供有力支持。

类型

1. 评估试剂盒性能指标
   • 灵敏度：灵敏度是指试剂盒能够检测到的 目标物浓度。根据实验需求选择具有合适灵敏度的试剂盒。如果需要检测低丰度的目标物，如一些微量的细胞因子或激素，就需要选择灵敏度高的试剂盒，通常其检测下限能够达到 pg/mL 级别。
   • 特异性：特异性反映了试剂盒检测目标物的专一性，即试剂盒只对目标抗原或抗体产生反应，而与其他相关物质无交叉反应或低交叉反应。查看试剂盒说明书中关于特异性的描述，了解其对目标物的识别能力以及可能存在的交叉反应情况。可以通过查阅相关文献或咨询试剂盒供应商来获取更多关于特异性的信息。
   • 准确性：准确性是指检测结果与真实值的接近程度。一般通过回收率实验来评估试剂盒的准确性，即向已知浓度的样本中加入一定量的目标物，然后检测回收率。理想的试剂盒回收率应在 90% - 110% 之间。
   • 精密度：精密度包括批内精密度和批间精密度。批内精密度是指在同一批次试剂盒中，对同一样本进行多次检测的结果重复性；批间精密度是指不同批次试剂盒对同一样本检测结果的一致性。选择精密度高的试剂盒，能够保证实验结果的稳定性和可靠性，通常批内变异系数（CV）应小于 10%，批间 CV 应小于 15%。

操作步骤

结果分析

ELISA试剂盒实验数据的计算处理方法
1、拟和曲线：
输入 行： 浓度值， 如0 10 50 100 400
输入 行：该浓度下的调整后的od值，如0 0.586 1.397 1.997 3.42
选择这些输入的数据，用插入里的图表按钮，进入图表向导，在“标准类型”中选择“xy散点图”;在“子图表类型”中选择“折线散点图”，按“下一步”;选择“系列产生在行”，按“下一步”;数据标志，可以填写：如数据y轴，OD值;数据x轴，浓度;按下一步，点击完成。可得曲线图。
单击曲线，按右键，选择“添加趋势线”，在类型中，选择多项式;在选项中，选择显示公式，选择显示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面说的方法： 双击图表，把它输入到图表的数据中，就可以拟和曲线。
2、计算浓度：
次实验：
标准曲线为：
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745

特别说明:
#.一周内使用可存于4℃，需长时间存放或多次使用建议存于-20℃.