检测原理

试剂盒组成

• 微孔板：已包被抗小鼠 β2 - MG 抗体。
• 标准品：一系列已知浓度的小鼠 β2 - MG 标准品，用于绘制标准曲线。
• 酶标抗体：辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗小鼠 β2 - MG 抗体。
• 底物溶液：一般为四甲基联苯胺（TMB）等，在酶的作用下会发生显色反应。
• 终止液：通常为硫酸或盐酸等，用于终止酶促反应。
• 洗涤缓冲液：用于洗涤微孔板，去除未结合的物质。
• 样本稀释液：用于稀释样本，使样本中的 β2 - MG 浓度在试剂盒的检测范围内。

操作步骤

1. 准备工作：将试剂盒从冰箱中取出，平衡至室温。配制洗涤缓冲液，将所需的微孔板条插入微孔板框架中。
2. 加样：分别将标准品、待测样本加入到相应的微孔中，设置空白对照孔（只加缓冲液）。轻轻振荡混匀，室温孵育一段时间，使样本中的 β2 - MG 与包被抗体充分结合。
3. 洗涤：弃去孔内液体，用洗涤缓冲液洗涤微孔板数次，每次浸泡一定时间后拍干，以去除未结合的物质。
4. 加酶标抗体：向每孔中加入适量的酶标抗体，轻轻振荡混匀，室温孵育，使酶标抗体与结合在包被抗体上的 β2 - MG 结合。
5. 洗涤：重复步骤 4 中的洗涤操作。
6. 显色：加入底物溶液，轻轻振荡混匀，室温避光孵育，酶催化底物反应显色。
7. 终止反应：加入终止液，轻轻振荡混匀，终止酶促反应。此时溶液颜色由蓝色变为黄色。
8. 读数：在规定时间内，使用酶标仪在特定波长下测定各孔的吸光度值。

注意事项

1. 试剂盒应在规定的温度下保存，避免反复冻融。
2. 操作过程中应严格按照说明书的要求进行加样、孵育、洗涤等操作，确保实验结果的准确性。
3. 加样时应使用移液器，并注意避免交叉污染。
4. 显色反应应在避光条件下进行，避免光照影响显色结果。
5. 酶标仪的波长应根据试剂盒的要求进行设置，读数应在规定的时间内完成。
6. 对于浓度较高的样本，应进行适当稀释后再进行检测，以确保结果的准确性。