检测原理

• 包被抗体：将抗小鼠 PDPN 的特异性抗体包被在酶标板的微孔表面。当含有 PDPN 的样本加入到微孔中时，样本中的 PDPN 会特异性地结合到包被抗体上，形成抗原 - 抗体复合物。
• 加入酶标抗体：洗去未结合的物质后，向微孔中加入酶标记的另一种抗 PDPN 的特异性抗体。这种酶标抗体能够与已经结合在包被抗体上的 PDPN 结合，形成 “包被抗体 - PDPN - 酶标抗体” 的夹心结构。
• 底物显色：再次洗涤去除未结合的酶标抗体后，加入酶的底物。酶标抗体上的酶会催化底物发生化学反应，产生有色产物。颜色的深浅与样本中 PDPN 的含量成正比。
• 结果测定：使用酶标仪测定微孔板中溶液在特定波长下的吸光度值。通过与已知浓度的 PDPN 标准品所绘制的标准曲线进行对比，计算出样本中 PDPN 的浓度。

试剂盒组成

• 预包被板：已包被抗小鼠 PDPN 抗体的微孔板。
• 标准品：一系列已知浓度的小鼠 PDPN 标准蛋白，用于制作标准曲线。
• 酶标工作液：含有酶标记的抗小鼠 PDPN 抗体的溶液。
• 底物溶液：一般为四甲基联苯胺（TMB）等，可在酶的作用下发生显色反应。
• 终止液：通常为硫酸或盐酸等，用于终止酶促反应。
• 浓缩洗涤液：用于洗涤微孔板，去除未结合的物质，使用时需稀释。
• 样本稀释液：用于稀释样本，使样本中 PDPN 的浓度处于试剂盒的检测范围内。

注意事项

1. 试剂盒应在规定的温度下保存，避免反复冻融和过期使用。
2. 实验操作过程中要严格按照说明书进行，加样要准确，避免交叉污染。
3. 洗涤过程要充分，以减少非特异性结合，但不要过度洗涤以免影响检测结果。
4. 显色反应需要在避光条件下进行，避免光线对显色的干扰。
5. 酶标仪的波长设置要准确，读数时间要严格按照说明书要求，以保证结果的准确性。
6. 对于浓度过高或过低的样本，应进行适当稀释或浓缩后再进行检测。