小鼠S100钙结合蛋白A10 (S100A10) 酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）即酶联免疫吸附测定，是一种常用的免疫分析技术。ELISA 试剂盒则是用于进行 ELISA 检测的一系列相关试剂和材料的组合。

以下是关于小鼠 S100 钙结合蛋白 A10（S100A10）酶联免疫试剂盒的相关信息：

产品货号：DM-X6549

产品规格：【48T/96T】

基本信息

产品名称：小鼠 S100 钙结合蛋白 A10（S100A10）ELISA Kit。

用途：用于科研实验，适用于检测小鼠血清、血浆、尿液及组织等生物样品中的 S100 钙结合蛋白 A10

产地：上海

保质期：6 个月

保存条件：2 - 8℃

检测原理

采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被 S100 钙结合蛋白 A10 抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP 标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物 TMB 显色，TMB 在辣根过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 S100 钙结合蛋白 A10 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品含量。

组成
一般包含以下主要成分：
包被抗原或抗体的微孔板：作为反应的固相载体，能吸附抗原或抗体。
酶标记物：通常是酶与抗体或抗原的结合物，常见的酶有辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）等。
底物：与酶标记物反应产生可检测的信号，如 TMB（四甲基联苯胺）在 HRP 的作用下会显色。
标准品：已知浓度的抗原或抗体，用于绘制标准曲线，从而对样本中的目标物进行定量分析。
样本稀释液：用于稀释样本，使其浓度处于合适的检测范围内。
洗涤液：用于在每次反应后清洗微孔板，去除未结合的物质，减少非特异性信号。
终止液：用于终止酶促反应，使反应信号稳定，便于检测。

工作原理
主要基于抗原 - 抗体的特异性结合反应以及酶的高效催化作用。其基本步骤和原理如下：
抗原或抗体包被：将已知的抗原或抗体固定在微孔板的表面。
样本孵育：加入待检测样本，若样本中存在目标抗原或抗体，就会与包被在微孔板上的抗体或抗原结合。
洗涤：用洗涤液冲洗微孔板，去除未结合的物质。
酶标记物孵育：加入酶标记的抗体或抗原，它会与结合在微孔板上的目标物结合。
再次洗涤：去除未结合的酶标记物。
底物显色：加入底物，酶催化底物反应，产生可检测的信号，如颜色变化。
终止反应：加入终止液，终止酶促反应。
检测：使用酶标仪检测吸光度值，通过与标准曲线对比，确定样本中目标物的含量。

注意事项

• 试剂盒应在 2 - 8℃保存，避免冻结，不同试剂的保存条件可能略有差异，按说明书要求保存。
• 操作过程中使用一次性吸头和试管，避免交叉污染。
• 严格按照说明书的要求进行洗板操作，确保洗涤充分，以减少非特异性结合。
• 加样要准确，避免产生气泡，以保证检测结果的准确性。
• TMB 底物应避光保存，显色反应也需在避光条件下进行。

仪器设备

· 定期校准：酶标仪、移液器等仪器设备需要定期进行校准和维护，确保其准确性和稳定性。可以按照仪器制造商的建议，定期将仪器送专业机构进行校准。

· 日常检查：在每次使用前，对仪器设备进行检查，确保其正常运行。例如，检查酶标仪的波长准确性、吸光度线性等；检查移液器的吸液和排液功能是否正常。

质量控制

设置对照：在每次检测中，都要设置阳性对照、阴性对照和空白对照。阳性对照用于验证试剂盒的有效性和检测系统的正常运行；阴性对照用于检测是否存在非特异性反应；空白对照用于扣除背景信号。通过对照样本的检测结果，可以判断检测过程是否可靠。

绘制标准曲线：使用标准品绘制准确的标准曲线，标准品的浓度应覆盖样本中目标物的可能浓度范围。在绘制标准曲线时，要确保标准品的稀释准确，每个浓度至少设置 2 - 3 个复孔。通过标准曲线可以对样本中的目标物进行定量分析，标准曲线的线性关系和拟合度直接影响定量结果的准确性。

重复检测：对重要样本或检测结果有疑问的样本，进行重复检测。通过多次检测可以减少偶然误差，提高检测结果的可靠性。同时，计算多次检测结果的平均值和标准差，评估检测结果的重复性。

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