小鼠S100钙结合蛋白A8 (S100A8) 酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）即酶联免疫吸附测定，是一种常用的免疫分析技术。ELISA 试剂盒则是用于进行 ELISA 检测的一系列相关试剂和材料的组合。

以下是关于小鼠S100钙结合蛋白A8 (S100A8) 酶联免疫试剂盒的相关信息：

产品货号：DM-X6547

产品规格：【48T/96T】

基本信息

用途：用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中 S100 钙结合蛋白 A8 / 钙粒蛋白 A（S100A8）的含量。

保存条件及有效期：试剂盒通常需在 2 - 8℃保存，有效期一般为 6 个月。

检测原理

采用双抗体夹心法。用纯化的小鼠 S100A8 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 S100A8，再与 HRP 标记的 S100A8 抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 S100A8 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠 S100A8 的浓度。

组成
一般包含以下主要成分：
包被抗原或抗体的微孔板：作为反应的固相载体，能吸附抗原或抗体。
酶标记物：通常是酶与抗体或抗原的结合物，常见的酶有辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）等。
底物：与酶标记物反应产生可检测的信号，如 TMB（四甲基联苯胺）在 HRP 的作用下会显色。
标准品：已知浓度的抗原或抗体，用于绘制标准曲线，从而对样本中的目标物进行定量分析。
样本稀释液：用于稀释样本，使其浓度处于合适的检测范围内。
洗涤液：用于在每次反应后清洗微孔板，去除未结合的物质，减少非特异性信号。
终止液：用于终止酶促反应，使反应信号稳定，便于检测。

工作原理
主要基于抗原 - 抗体的特异性结合反应以及酶的高效催化作用。其基本步骤和原理如下：
抗原或抗体包被：将已知的抗原或抗体固定在微孔板的表面。
样本孵育：加入待检测样本，若样本中存在目标抗原或抗体，就会与包被在微孔板上的抗体或抗原结合。
洗涤：用洗涤液冲洗微孔板，去除未结合的物质。
酶标记物孵育：加入酶标记的抗体或抗原，它会与结合在微孔板上的目标物结合。
再次洗涤：去除未结合的酶标记物。
底物显色：加入底物，酶催化底物反应，产生可检测的信号，如颜色变化。
终止反应：加入终止液，终止酶促反应。
检测：使用酶标仪检测吸光度值，通过与标准曲线对比，确定样本中目标物的含量。

注意事项

试剂盒应在 2 - 8℃保存，避免冻结，不同试剂的保存条件可能略有差异，按说明书要求保存。

操作过程中使用一次性吸头和试管，避免交叉污染。

严格按照说明书的要求进行洗板操作，确保洗涤充分，以减少非特异性结合。

加样要准确，避免产生气泡，以保证检测结果的准确性。

TMB 底物应避光保存，显色反应也需在避光条件下进行。

质量控制

绘制标准曲线：使用标准品绘制准确的标准曲线，标准品的浓度应覆盖样本中目标物的可能浓度范围。在绘制标准曲线时，要确保标准品的稀释准确，每个浓度至少设置 2 - 3 个复孔。通过标准曲线可以对样本中的目标物进行定量分析，标准曲线的线性关系和拟合度直接影响定量结果的准确性。

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