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小鼠神经型一氧化氮合酶(NOS1/nNOS)酶联免疫试剂盒
  • 品牌:DUMABIO
  • 产地:上海
  • 型号:96T
  • 货号:DM-X6545
  • 价格: ¥1860/盒
  • 发布日期: 2025-05-09
  • 更新日期: 2025-05-09
产品详请
产地 上海
保存条件 2-8°
品牌 DUMABIO
货号 DM-X6545
用途 科研实验
检测方法
保质期 6个月
适应物种
检测限
数量 999
包装规格 96T
标记物
样本
应用
是否进口

小鼠神经型一氧化氮合酶(NOS1/nNOS)酶联免疫试剂盒


产品货号:DM-X6545

以下是小鼠神经型一氧化氮合酶(NOS1/nNOS)酶联免疫试剂盒的介绍:

基本信息
用途: 于科研实验,不能用于临床诊断等其他用途。
产地:上海
保质期:6 个月
检测原理:一般采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。试剂盒中的微孔板预先包被有针对神经型一氧化氮合酶的抗体。检测时,依次加入标本、标准品以及 HRP 标记的检测抗体,经过温育和洗涤步骤后,去除未结合的物质。然后加入底物 TMB,TMB 在辣根过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的神经型一氧化氮合酶含量呈正相关。 用酶标仪在特定波长下(如 450nm)测定吸光度(OD 值),通过与标准曲线对比来计算样品中 NOS1/nNOS 的含量。
样本要求:可检测血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液、组织匀浆液及尿液等生物样品。但需要注意,样本不能含叠氮钠(NaN?),因为叠氮钠是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂,会影响检测结果。对于植物萃取液或其它相关样本,需 1000 x g 离心 20 分钟,取上清进行检测。

ELISA试剂盒技术流程

双抗体夹心法(检测未知抗原)

间接法(检测未知抗体)

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标 抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。


ELISA试剂盒需自备的设备及试剂

1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用提预热)

2. 单道或多道微量加液器及吸头

3. 稀释样品的EP管

4. 蒸馏水或去离子水

5. 吸水纸

6. 盛放洗液的容器


ELISA试剂盒优点:
1、高效、灵敏、特异的抗体;
2、重复性和可靠性高;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;


注意事项剂盒的储存及有效期

1. 未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液,终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。

2. 使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。


须知:

试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在次实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。

1、ELISA标准曲线;

2、详细的实验步骤;

3、完整的实验报告(试剂耗材,实验方法,实验结果及结果说明);


[样本处理及要求]

1.  血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

2.  血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4.  细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。



[需要而未提供的试剂和器材]

1.酶标仪(450nm)

2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

4.蒸馏水或去离子水


ELISA检测试剂盒承诺

公司长期与各大高校、医院及 科研单位保持着良好的合作关系,公司的产品质量及服务态度得到了他们的一致认可。笃玛生物本着客户至上的原则为客户提供 产品,公司承诺产品有任何质量的问题免费包退换(非人为因素造成的)。公司提供免费代测服务,并且承诺收到样本七个工作日出结果,确保数据的准确性。


上海笃玛生物科技有限公司



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