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产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8° |
品牌 | DUMABIO |
货号 | DM-X6501 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | |
检测限 | |
数量 | 999 |
包装规格 | 48/96T |
标记物 | |
样本 | |
应用 | |
是否进口 | 否 |
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
产品货号:DM-X6501
检测原理
采用双抗体夹心法。用纯化的小鼠 TSGF 抗体包被微孔板,制成固相抗体。往包被单抗的微孔中依次加入待检测的小鼠 TSGF、HRP 标记的 TSGF 抗体,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物3。经过充分洗涤后加底物 TMB 显色,TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 TSGF 呈正相关,用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠 TSGF 的浓度。
试剂盒组成
酶标包被板:1 块(48 孔或 96 孔),作为反应的固相载体,通常在 2 - 8℃保存。
标准品:一般为浓度已知的小鼠 TSGF 标准溶液,如 2700ng/L,0.5ml×1 瓶,2 - 8℃保存。
标准品稀释液:1.5ml×1 瓶,用于稀释标准品,2 - 8℃保存。
酶标试剂:含有 HRP 标记的 TSGF 抗体,3ml×1 瓶(48 孔配置)或 6ml×1 瓶(96 孔配置),2 - 8℃保存。
样品稀释液:3ml×1 瓶(48 孔配置)或 6ml×1 瓶(96 孔配置),用于稀释样品,2 - 8℃保存。
显色剂 A 液和显色剂 B 液:各 3ml×1 瓶(48 孔配置)或 6ml×1 瓶(96 孔配置),2 - 8℃保存。
终止液:3ml×1 瓶(48 孔配置)或 6ml×1 瓶(96 孔配置),一般为 2N H?SO?,2 - 8℃保存。
浓缩洗涤液:(20ml×20 倍)×1 瓶(48 孔配置)或(20ml×30 倍)×1 瓶(96 孔配置),2 - 8℃保存。
样本类型
适用于小鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本。血浆可用 EDTA 或肝素作为抗凝剂,标本采集后 30 分钟内于 2 - 8℃、1000×g 离心 15 分钟,或将标本放于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。其它生物标本请 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可检测,同样需注意保存条件和避免反复冻融。
操作步骤
加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样时将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
加酶:每孔加入酶标试剂 100μl,空白孔除外。
温育:用封板膜封板后置 37℃温育 60 分钟。
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
显色:每孔先加入显色剂 A 50μl,再加入显色剂 B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15 分钟。
终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白孔调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
注意事项
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15 - 30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间 控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
如标本中待测物质含量过高,需先用样品稀释液稀释一定倍数后再测定,计算时需乘以总稀释倍数。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
生产厂家:上海笃玛生物科技有限公司