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产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8° |
品牌 | DUMABIO |
货号 | DM-X6496 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | |
检测限 | |
数量 | 999 |
包装规格 | 48/96T |
标记物 | |
样本 | |
应用 | |
是否进口 | 否 |
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
产品货号:DM-X6496
检测原理
通常采用双抗体夹心法。以纯化的小鼠 TNF -β 抗体包被微孔板,制成固相抗体,依次向包被单抗的微孔中加入含 TNF -β 的样品、标准品,再与 HRP 标记的 TNF -β 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经 洗涤后加底物 TMB 显色4。TMB 在 HRP 酶催化下转化为蓝色,在酸作用下转化为最终的黄色4。颜色深浅与样品中的 TNF -β 含量呈正相关,通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),依据标准曲线计算样品中小鼠 TNF -β 的浓度。
样本类型
血清:全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜,1000×g 离心 20 分钟,取上清。也可将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
血浆:用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,在采集后的 30 分钟内于 2 - 8℃ 1000×g 离心 15 分钟,取上清检测。上清也可置于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
组织匀浆:用预冷的 PBS(0.01M,pH = 7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后剪碎组织。按重量体积比(如 1:9)将组织与 PBS 加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为进一步裂解组织细胞,可对匀浆液进行超声破碎或反复冻融, 5000×g 离心 5 - 10 分钟,取上清检测。
细胞培养物上清或其它生物标本:1000×g 离心 20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
试剂盒组成
酶联板:通常为 96 孔板或 48 孔板,已包被纯化的小鼠 TNF -β 抗体。
标准品:一般为冻干品,需用样品稀释液复溶,复溶后稀释成不同浓度的标准品,用于绘制标准曲线。
检测稀释液:用于稀释检测溶液和样品等。
检测溶液:包括检测溶液 A 和 B,通常为 HRP 标记的抗体等,临用前需用检测稀释液按一定比例稀释。
底物溶液:如 TMB 溶液,用于显色反应。
终止液:一般为强酸溶液,如 2N H?SO?,用于终止显色反应。
洗涤液:用于洗涤酶联板,去除未结合的物质。
保存条件与有效期
保存条件:试剂盒通常需在 2 - 8℃保存,部分试剂如底物溶液等需避光保存。
有效期:一般为 6 - 12 个月左右,具体以试剂盒说明书为准。
注意事项
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15 - 30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
加样时需使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间 控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
生产厂家:上海笃玛生物科技有限公司