产品展厅
小鼠转化生长因子α(TGF-α)酶联免疫试剂盒
  • 品牌:DUMABIO
  • 产地:上海
  • 型号:48/96T
  • 货号:DM-X6481
  • 价格: ¥1860/盒
  • 发布日期: 2025-05-30
  • 更新日期: 2025-05-30
产品详请
产地 上海
保存条件 2-8°
品牌 DUMABIO
货号 DM-X6481
用途 科研实验
检测方法
保质期 6个月
适应物种
检测限
数量 999
包装规格 48/96T
标记物
样本
应用
是否进口

小鼠转化生长因子α(TGF-α)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断


产品货号:DM-X6481

产品规格:【48T/96T】


小鼠转化生长因子 α(TGF -α)酶联免疫试剂盒是用于定量检测小鼠相关样本中 TGF -α 含量的试剂盒,以下是其详细介绍:
基本信息
规格:常见的有 48T 和 96T 两种规格,以满足不同实验规模的需求。
保存条件:一般需在 2 - 8℃保存,具体可参考试剂盒说明书。
检测波长:通常为 450nm,也可能根据底物等因素有所不同。


检测原理
采用双抗体夹心法 ELISA。用纯化的抗小鼠 TGF -α 抗体包被微孔板,制成固相抗体。往包被单抗的微孔中依次加入 TGF -α、HRP 标记的抗 TGF -α 抗体,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过 洗涤后加底物显色。底物在 HRP 酶的催化下发生颜色变化,颜色的深浅和样品中的 TGF -α 呈正相关,用酶标仪在特定波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中 TGF -α 的浓度。


试剂盒组成
酶标包被板:1 块(96T)或半块(48T),表面预包被有抗小鼠 TGF -α 的抗体。
标准品:通常为冻干品,2 瓶。临用前以样品稀释液稀释至 1ml,浓度为 100ng/ml,然后做系列倍比稀释,可分别稀释成 100ng/ml、50ng/ml、25ng/ml、12.5ng/ml、6.25ng/ml、3.12ng/ml、1.56ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度 0ng/ml。
样品稀释液:1×20ml / 瓶,用于稀释样品和标准品。
检测稀释液 A 和 B:各 1×10ml / 瓶,分别用于稀释检测溶液 A 和检测溶液 B4。
检测溶液 A 和 B:各 1×120ul / 瓶(1:100),临用前分别以检测稀释液 A 和检测稀释液 B 按 1:100 稀释。
底物溶液:1×10ml / 瓶,一般为 TMB 底物,在 HRP 酶作用下显色。
浓洗涤液:1×30ml / 瓶,使用时用蒸馏水稀释 25 倍。
终止液:1×10ml / 瓶,通常为 2N H?SO?,用于终止显色反应。
说明书:1 份,详细介绍试剂盒的使用方法、注意事项、性能指标等。
封板膜:2 片(48T)或 2 片(96T),用于温育过程中密封微孔板。
密封袋:1 个,用于存放试剂盒中的试剂。


操作步骤
准备:试剂盒从冷藏环境中取出后在室温平衡 20 - 30 分钟。取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
加样:设置标准品孔和样本孔。标准品孔各加不同浓度的标准品 100μL;样本孔中加入待测样本 100μL,设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液 100μL,另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液 100μL。
温育与反应:酶标板置 4℃包被过夜。之后进行洗板,吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍,之后将洗涤液注满板孔,浸泡 1 - 2 分钟,间歇摇动,甩去孔内液体后在吸水纸上拍干,重复洗涤 3 - 4 次。阴性对照孔每孔加入 PBS 50μL,样品孔及空白孔每孔加入相应的抗体工作液 50μL,酶标板置 37℃培养箱的湿盒内,孵育 60 分钟。再次洗板,步骤同前。每孔加 HRP - 标记的二抗工作液 100μL,酶标板置 37℃培养箱的湿盒内,孵育 60 分钟。
显色:再次洗板后,每孔加 TMB 显色液 100μL,轻轻混匀 10s,置 37℃暗处反应 15 - 20 分钟。
终止与测定:每孔加 100μL 2mol/L H?SO?终止反应,在规定时间内,用酶标仪在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值,最终测得的 OD 值为 450nm 吸光值减去 630nm 吸光值,以减少光干扰6。通过标准曲线计算样品中 TGF -α 的浓度。


注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀释后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不同批号的试剂不要混用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物 A、B 液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
底物对光敏感,应避免长时间暴露于光下。实验完成后应立即读取 OD 值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。


适用范围
适用于小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液等生物样本中 TGF -α 含量的定量测定,仅用于科研实验,不得用于临床诊断。


结果分析

绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,对应的吸光度值为纵坐标,在坐标纸上绘制标准曲线,或使用软件(如 Excel、GraphPad Prism 等)进行线性回归分析,得到标准曲线方程。




上海笃玛生物科技有限公司

新闻资讯
联系方式
手机:15214367449
Q Q:
微信扫一扫