小鼠转铁蛋白(TRF)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-X6477

产品规格：【48T/96T】

以下是小鼠转铁蛋白（TRF）酶联免疫试剂盒的详细介绍：
基本信息
产品名称：小鼠转铁蛋白（TRF）酶联免疫试剂盒，英文名称为 Mouse TRF (Transferrin) ELISA Kit。
保存条件：2-8℃避光保存。
有效期：一般为 6 个月。
用途：用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中小鼠转铁蛋白（TRF）的含量， 体外研究使用，不用于临床诊断。

检测原理：采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先将小鼠转铁蛋白（TRF）捕获抗体包被在微孔板上，加入标本、标准品后，其中的小鼠转铁蛋白会与包被抗体结合，再加入 HRP 标记的检测抗体，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。经过温育并 洗涤后，加入底物 TMB 显色，TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠转铁蛋白（TRF）呈正相关，通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

试剂盒组成
酶标包被板：1 块，有 96 孔或者 48 孔两种规格，已包被小鼠转铁蛋白（TRF）捕获抗体。
标准品：通常为 2 瓶冻干品，浓度依次为 4000、2000、1000、500、250、0μg/mL。
样品稀释液：用于稀释样品，使样品浓度在检测范围内，一般为 1×20ml / 瓶或 3ml×1 瓶等。
生物素标记抗体稀释液：用来稀释生物素标记的抗体，通常为 1×10ml / 瓶。
辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液：用于稀释辣根过氧化物酶标记的亲和素，一般为 1×10ml / 瓶。
生物素标记抗体：与小鼠转铁蛋白（TRF）特异性结合，一般为 1×120μl / 瓶，工作浓度为 1：100。
辣根过氧化物酶标记亲和素：与生物素标记抗体特异性结合，形成免疫复合物，一般为 1×120μl / 瓶，工作浓度为 1：100。
底物溶液（TMB Substrate）：在辣根过氧化物酶的催化下发生显色反应，一般为 1×10ml / 瓶。
浓洗涤液（Wash Buffer）：用于洗涤反应板，去除未结合的物质，一般为 1×20ml / 瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释 25 倍或 20 倍等。
终止液（Stop Solution）：用于终止显色反应，一般为 1×10ml / 瓶，通常为 2N H?SO?。
封板膜：用于封住反应孔，防止液体蒸发和外界污染，2 片（48 孔板）或 2 片（96 孔板）。
密封袋：用于保存剩余的试剂盒组件，1 个。

样本处理
血清：全血标本于室温放置 2 小时或 4℃过夜后，于 1000g 离心 20 分钟，取上清即可检测，也可将标本放于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。
血浆：可用 EDTA 或肝素作为抗凝剂，标本采集后 30 分钟内于 2-8℃、1000g 离心 20 分钟，或将标本放于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。
组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01M, pH=7.4) 冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的 PBS（一般按 1:9 的重量体积比）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为进一步裂解组织细胞，可对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。 将匀浆液于 5000×g 离心 5-10 分钟，取上清检测。
细胞培养物上清或其它生物标本：1000g 离心 20 分钟，取上清即可检测，或将标本放于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。

检测性能
检测范围：125μg/mL-4000μg/mL。
灵敏度： 检测浓度小于 10μg/mL。
特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性：板内变异系数小于 10%，板间变异系数小于 15%。

结果分析

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。

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