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产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8° |
品牌 | DUMABIO |
货号 | DM-X6477 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | |
检测限 | |
数量 | 999 |
包装规格 | 48/96T |
标记物 | |
样本 | |
应用 | |
是否进口 | 否 |
小鼠转铁蛋白(TRF)酶联免疫试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
产品货号:DM-X6477
产品规格:【48T/96T】
以下是小鼠转铁蛋白(TRF)酶联免疫试剂盒的详细介绍:
基本信息
产品名称:小鼠转铁蛋白(TRF)酶联免疫试剂盒,英文名称为 Mouse TRF (Transferrin) ELISA Kit。
保存条件:2-8℃避光保存。
有效期:一般为 6 个月。
用途:用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中小鼠转铁蛋白(TRF)的含量, 体外研究使用,不用于临床诊断。
检测原理:采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。预先将小鼠转铁蛋白(TRF)捕获抗体包被在微孔板上,加入标本、标准品后,其中的小鼠转铁蛋白会与包被抗体结合,再加入 HRP 标记的检测抗体,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。经过温育并 洗涤后,加入底物 TMB 显色,TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠转铁蛋白(TRF)呈正相关,通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
试剂盒组成
酶标包被板:1 块,有 96 孔或者 48 孔两种规格,已包被小鼠转铁蛋白(TRF)捕获抗体。
标准品:通常为 2 瓶冻干品,浓度依次为 4000、2000、1000、500、250、0μg/mL。
样品稀释液:用于稀释样品,使样品浓度在检测范围内,一般为 1×20ml / 瓶或 3ml×1 瓶等。
生物素标记抗体稀释液:用来稀释生物素标记的抗体,通常为 1×10ml / 瓶。
辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液:用于稀释辣根过氧化物酶标记的亲和素,一般为 1×10ml / 瓶。
生物素标记抗体:与小鼠转铁蛋白(TRF)特异性结合,一般为 1×120μl / 瓶,工作浓度为 1:100。
辣根过氧化物酶标记亲和素:与生物素标记抗体特异性结合,形成免疫复合物,一般为 1×120μl / 瓶,工作浓度为 1:100。
底物溶液(TMB Substrate):在辣根过氧化物酶的催化下发生显色反应,一般为 1×10ml / 瓶。
浓洗涤液(Wash Buffer):用于洗涤反应板,去除未结合的物质,一般为 1×20ml / 瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释 25 倍或 20 倍等。
终止液(Stop Solution):用于终止显色反应,一般为 1×10ml / 瓶,通常为 2N H?SO?。
封板膜:用于封住反应孔,防止液体蒸发和外界污染,2 片(48 孔板)或 2 片(96 孔板)。
密封袋:用于保存剩余的试剂盒组件,1 个。
样本处理
血清:全血标本于室温放置 2 小时或 4℃过夜后,于 1000g 离心 20 分钟,取上清即可检测,也可将标本放于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
血浆:可用 EDTA 或肝素作为抗凝剂,标本采集后 30 分钟内于 2-8℃、1000g 离心 20 分钟,或将标本放于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
组织匀浆:用预冷的 PBS (0.01M, pH=7.4) 冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的 PBS(一般按 1:9 的重量体积比)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为进一步裂解组织细胞,可对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。 将匀浆液于 5000×g 离心 5-10 分钟,取上清检测。
细胞培养物上清或其它生物标本:1000g 离心 20 分钟,取上清即可检测,或将标本放于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
检测性能
检测范围:125μg/mL-4000μg/mL。
灵敏度: 检测浓度小于 10μg/mL。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内变异系数小于 10%,板间变异系数小于 15%。
结果分析
绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,对应的吸光度值为纵坐标,在坐标纸上绘制标准曲线,或使用软件(如 Excel、GraphPad Prism 等)进行线性回归分析,得到标准曲线方程。
上海笃玛生物科技有限公司