小鼠肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶1(MuRF1)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-X6474

产品规格：【48T/96T】

以下是小鼠肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶 1（MuRF1）酶联免疫试剂盒的详细介绍：
基本信息
规格：常见有 96T 和 48T 两种规格，分别可进行 96 次和 48 次检测。
保存条件：需在 2 - 8℃冷藏保存。
有效期：一般为 6 个月。
用途：用于科研实验，可体外定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等样本中 MuRF1 的含量，不可用于临床诊断。

检测原理
采用双抗体夹心法。试剂盒中的微孔板预包被有针对小鼠 MuRF1 的特异性抗体。加入标准品或样本后，其中的 MuRF1 会与包被抗体结合，接着加入生物素化的检测抗体，它会特异性结合 MuRF1，形成抗体 - 抗原 - 生物素化抗体复合物。随后加入亲和素 - 辣根过氧化物酶（HRP）共轭物，与生物素结合。经过 洗涤去除未结合的物质后，加入底物溶液，在 HRP 的催化下，底物发生显色反应，呈现蓝色。加入终止液后，反应终止，颜色转变为黄色。通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），OD 值与样本中 MuRF1 的浓度成正比，根据标准曲线即可计算出样本中 MuRF1 的浓度。

试剂盒组成
酶标包被板：1 块 96 孔或 48 孔板，表面包被有能特异性结合小鼠 MuRF1 的抗体。
标准品：为已知浓度的 MuRF1 蛋白，一般为冻干品，复溶后可用于绘制标准曲线。
样品稀释液：用于稀释待检测的样品，使样品浓度在试剂盒的检测范围内。
生物素化检测抗体工作液：含有能特异性识别小鼠 MuRF1 的生物素化抗体，与结合在固相抗体上的 MuRF1 抗原特异性结合。
亲和素 - HRP 共轭物工作液：与生物素化检测抗体结合，通过 HRP 催化底物显色。
底物溶液：如 TMB 溶液，在 HRP 酶的作用下发生显色反应，产生蓝色产物，加入终止液后变为黄色。
洗涤液：通常为浓缩液，使用时需按说明书要求稀释，用于洗涤酶标板，去除未结合的物质，减少非特异性吸附干扰。
终止液：一般为强酸溶液，如 2N H?SO?，用于终止显色反应，使颜色稳定以便酶标仪读取 OD 值。
封板膜：用于在温育过程中封住酶标板，防止液体蒸发和外界污染。

样本处理
血清：使用不含热原和内毒素的试管，收集小鼠血液后，3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆：用 EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。如果样本收集后不及时检测，按一次用量分装，冻存于 - 20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

检测性能
检测范围：一般为 31.25 - 2000pg/mL 或 0.3125 - 10ng/mL 。
灵敏度：可达 18.75pg/mL。
特异性：对小鼠 MuRF1 具有高度特异性，与其他相关蛋白或生物分子的交叉反应率极低。
重复性：板内和板间变异系数通常分别小于 10% 和 15%，以保证检测结果的准确性和可靠性。

结果分析

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。

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