小鼠转化生长因子β3(TGF-β3)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-X6483

产品规格：【48T/96T】

小鼠转化生长因子 β3（TGF -β3）酶联免疫试剂盒是用于定量检测小鼠相关样本中 TGF -β3 含量的工具，以下是其详细介绍：

基本信息
规格：常见有 48T 和 96T 两种规格，以满足不同实验规模需求。
检测波长：450nm。
运输与保存：一般 2 - 8℃低温运送和保存，从冷藏环境中取出后应在室温平衡 15 - 30 分钟后方可使用。

检测原理
采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被转化生长因子 β3 抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP 标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物 TMB 显色，TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子 β3 呈正相关，用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品含量。

试剂盒组成
20 倍浓缩洗涤液：通常为 30ml×1 瓶，使用时用蒸馏水 20 倍稀释后备用，用于洗涤微孔板，去除未结合的物质。
酶标试剂：含 HRP 标记的抗体，6ml×1 瓶，与样品中的 TGF -β3 特异性结合。
酶标包被板：12 孔 ×8 条，表面预包被有抗小鼠 TGF -β3 的抗体。
样品稀释液：6ml×1 瓶，用于稀释样品。
显色剂 A 液和 B 液：各为 6ml×1 瓶，A 液和 B 液混合后，在 HRP 酶的作用下发生显色反应。
终止液：6ml×1 瓶，用于终止显色反应，使蓝色立即转变成黄色。
标准品：一般为 0.5ml×1 瓶，已知浓度的 TGF -β3 标准品，用于绘制标准曲线。
标准品稀释液：1.5ml×1 瓶，用于稀释标准品。
说明书：1 份，详细介绍试剂盒的使用方法、注意事项等内容。
封板膜：2 张，用于在温育过程中密封微孔板，防止水分蒸发和外界污染。
密封袋：1 个，用于存放试剂盒中的试剂，保持试剂的稳定性。

操作步骤
准备：试剂盒从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL；样本孔中加入待测样本 50μL，空白孔不加。
温育与反应：除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
洗涤：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次。
显色：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
终止与测定：每孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

注意事项
实验中使用的试剂和耗材应保持清洁，避免污染。
加样时应准确、快速，使用加样器并经常校对其准确性，一次加样时间控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
温育和洗涤步骤需严格按照说明书进行，以确保实验结果的准确性。
显色反应应在避光条件下进行，避免强光照射。
不同批次的试剂盒可能存在差异，应避免混用。
如样本中含有叠氮钠，需在检测前去除，因为叠氮钠是 HRP 的抑制剂。

适用范围
适用于小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中 TGF -β3 含量的定量测量。仅用于科研实验，不得用于临床诊断。

结果分析

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。

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