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产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8° |
品牌 | DUMABIO |
货号 | DM-X6483 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | |
检测限 | |
数量 | 999 |
包装规格 | 48/96T |
标记物 | |
样本 | |
应用 | |
是否进口 | 否 |
小鼠转化生长因子β3(TGF-β3)酶联免疫试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
产品货号:DM-X6483
产品规格:【48T/96T】
小鼠转化生长因子 β3(TGF -β3)酶联免疫试剂盒是用于定量检测小鼠相关样本中 TGF -β3 含量的工具,以下是其详细介绍:
基本信息
规格:常见有 48T 和 96T 两种规格,以满足不同实验规模需求。
检测波长:450nm。
运输与保存:一般 2 - 8℃低温运送和保存,从冷藏环境中取出后应在室温平衡 15 - 30 分钟后方可使用。
检测原理
采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被转化生长因子 β3 抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP 标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物 TMB 显色,TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子 β3 呈正相关,用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品含量。
试剂盒组成
20 倍浓缩洗涤液:通常为 30ml×1 瓶,使用时用蒸馏水 20 倍稀释后备用,用于洗涤微孔板,去除未结合的物质。
酶标试剂:含 HRP 标记的抗体,6ml×1 瓶,与样品中的 TGF -β3 特异性结合。
酶标包被板:12 孔 ×8 条,表面预包被有抗小鼠 TGF -β3 的抗体。
样品稀释液:6ml×1 瓶,用于稀释样品。
显色剂 A 液和 B 液:各为 6ml×1 瓶,A 液和 B 液混合后,在 HRP 酶的作用下发生显色反应。
终止液:6ml×1 瓶,用于终止显色反应,使蓝色立即转变成黄色。
标准品:一般为 0.5ml×1 瓶,已知浓度的 TGF -β3 标准品,用于绘制标准曲线。
标准品稀释液:1.5ml×1 瓶,用于稀释标准品。
说明书:1 份,详细介绍试剂盒的使用方法、注意事项等内容。
封板膜:2 张,用于在温育过程中密封微孔板,防止水分蒸发和外界污染。
密封袋:1 个,用于存放试剂盒中的试剂,保持试剂的稳定性。
操作步骤
准备:试剂盒从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;样本孔中加入待测样本 50μL,空白孔不加。
温育与反应:除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
洗涤:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次。
显色:每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
终止与测定:每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
注意事项
实验中使用的试剂和耗材应保持清洁,避免污染。
加样时应准确、快速,使用加样器并经常校对其准确性,一次加样时间控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
温育和洗涤步骤需严格按照说明书进行,以确保实验结果的准确性。
显色反应应在避光条件下进行,避免强光照射。
不同批次的试剂盒可能存在差异,应避免混用。
如样本中含有叠氮钠,需在检测前去除,因为叠氮钠是 HRP 的抑制剂。
适用范围
适用于小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中 TGF -β3 含量的定量测量。仅用于科研实验,不得用于临床诊断。
结果分析
绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,对应的吸光度值为纵坐标,在坐标纸上绘制标准曲线,或使用软件(如 Excel、GraphPad Prism 等)进行线性回归分析,得到标准曲线方程。
上海笃玛生物科技有限公司