小鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-X6467

产品规格：【48T/96T】

以下是小鼠基质金属蛋白酶抑制因子 3（TIMP - 3）酶联免疫试剂盒的详细介绍：
基本信息
产品名称：小鼠基质金属蛋白酶抑制因子 3（TIMP - 3）ELISA 试剂盒。
用途：用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其他生物样本中 TIMP - 3 的含量， 科研，不可用于临床诊断。

检测原理
通常采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测法。将捕获抗体包被于酶标板上，用于捕获样品及标准品中的 TIMP - 3 蛋白。生物素化的检测抗体与 TIMP - 3 蛋白结合，然后 SABC 复合物与生物素化检测抗体结合，形成免疫复合物。加入 TMB 显色液后，若反应孔中有 TIMP - 3 蛋白则显蓝色，加入终止液后变为黄色。用酶标仪在 450nm 处测 OD 值，TIMP - 3 蛋白浓度与 OD 值之间呈正比，通过绘制标准曲线可计算出标本中 TIMP - 3 的浓度。

试剂盒组成
酶联板：一块（96 孔），已包被抗小鼠 TIMP - 3 抗体。
标准品：2 瓶（冻干品），每瓶临用前以样品稀释液稀释至 1ml，浓度为 2000pg/ml，做系列倍比稀释后可得 2000pg/mL、1000pg/mL、500pg/mL、250pg/mL、125pg/mL、62.5pg/mL、31.2pg/mL，样品稀释液直接作为标准浓度 0pg/ml，临用前 15 分钟内配制。
样品稀释液：1×20ml / 瓶。
检测稀释液 A：1×10ml / 瓶。
检测稀释液 B：1×10ml / 瓶。
检测溶液 A：1×120ul / 瓶（1：100），临用前以检测稀释液 A 1：100 稀释。
检测溶液 B：1×120ul / 瓶（1：100），临用前以检测稀释液 B 1：100 稀释。
底物溶液：1×10ml / 瓶。
终止液：1×10ml / 瓶（2N H?SO?）。

样本收集与处理
血清、血浆：使用一次性的无热原、无内毒素试管，血清、血浆避免使用溶血，标本悬浮物应离心去除。血清可将全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 1000×g 离心 20 分钟，取上清；血浆用 EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可，采集后 30 分钟内于 2 - 8℃、1000×g 离心 15 分钟，取上清。待测样本 2 - 8℃保存 48 小时，更长时间须冷冻（-20℃或 - 80℃）保存，避免反复冻融。
组织匀浆：用预冷的 PBS（0.01M，pH = 7.4）冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎，按一定的重量体积比加入含蛋白酶抑制剂的 PBS，于冰上充分研磨，也可进行超声破碎或反复冻融， 将匀浆液于 5000×g 离心 5 - 10 分钟，取上清检测。
细胞培养上清：1000×g 离心 20 分钟，取上清即可检测，或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存，避免反复冻融。

试剂盒性能
特异性：不与其它蛋白、细胞因子有交叉反应。
重复性：板内、板间变异系数均小于 10%。

注意事项
本产品仅供科研使用，不用于临床诊断。
试剂盒应在 2 - 8℃保存，使用前需平衡至室温。
实验中使用的吸头、试管等耗材应保持清洁，避免污染。
加样时应准确、快速，避免交叉污染。
洗涤过程要充分，以减少非特异性吸附。
显色反应应在避光条件下进行，终止反应后应尽快测定 OD 值。
不同批次的试剂盒可能存在差异，应避免混用。

结果分析

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。

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