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产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8° |
品牌 | DUMABIO |
货号 | DM-X6467 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | |
检测限 | |
数量 | 999 |
包装规格 | 48/96T |
标记物 | |
样本 | |
应用 | |
是否进口 | 否 |
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)酶联免疫试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
产品货号:DM-X6467
产品规格:【48T/96T】
以下是小鼠基质金属蛋白酶抑制因子 3(TIMP - 3)酶联免疫试剂盒的详细介绍:
基本信息
产品名称:小鼠基质金属蛋白酶抑制因子 3(TIMP - 3)ELISA 试剂盒。
用途:用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其他生物样本中 TIMP - 3 的含量, 科研,不可用于临床诊断。
检测原理
通常采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测法。将捕获抗体包被于酶标板上,用于捕获样品及标准品中的 TIMP - 3 蛋白。生物素化的检测抗体与 TIMP - 3 蛋白结合,然后 SABC 复合物与生物素化检测抗体结合,形成免疫复合物。加入 TMB 显色液后,若反应孔中有 TIMP - 3 蛋白则显蓝色,加入终止液后变为黄色。用酶标仪在 450nm 处测 OD 值,TIMP - 3 蛋白浓度与 OD 值之间呈正比,通过绘制标准曲线可计算出标本中 TIMP - 3 的浓度。
试剂盒组成
酶联板:一块(96 孔),已包被抗小鼠 TIMP - 3 抗体。
标准品:2 瓶(冻干品),每瓶临用前以样品稀释液稀释至 1ml,浓度为 2000pg/ml,做系列倍比稀释后可得 2000pg/mL、1000pg/mL、500pg/mL、250pg/mL、125pg/mL、62.5pg/mL、31.2pg/mL,样品稀释液直接作为标准浓度 0pg/ml,临用前 15 分钟内配制。
样品稀释液:1×20ml / 瓶。
检测稀释液 A:1×10ml / 瓶。
检测稀释液 B:1×10ml / 瓶。
检测溶液 A:1×120ul / 瓶(1:100),临用前以检测稀释液 A 1:100 稀释。
检测溶液 B:1×120ul / 瓶(1:100),临用前以检测稀释液 B 1:100 稀释。
底物溶液:1×10ml / 瓶。
终止液:1×10ml / 瓶(2N H?SO?)。
样本收集与处理
血清、血浆:使用一次性的无热原、无内毒素试管,血清、血浆避免使用溶血,标本悬浮物应离心去除。血清可将全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清;血浆用 EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可,采集后 30 分钟内于 2 - 8℃、1000×g 离心 15 分钟,取上清。待测样本 2 - 8℃保存 48 小时,更长时间须冷冻(-20℃或 - 80℃)保存,避免反复冻融。
组织匀浆:用预冷的 PBS(0.01M,pH = 7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎,按一定的重量体积比加入含蛋白酶抑制剂的 PBS,于冰上充分研磨,也可进行超声破碎或反复冻融, 将匀浆液于 5000×g 离心 5 - 10 分钟,取上清检测。
细胞培养上清:1000×g 离心 20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存,避免反复冻融。
试剂盒性能
特异性:不与其它蛋白、细胞因子有交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均小于 10%。
注意事项
本产品仅供科研使用,不用于临床诊断。
试剂盒应在 2 - 8℃保存,使用前需平衡至室温。
实验中使用的吸头、试管等耗材应保持清洁,避免污染。
加样时应准确、快速,避免交叉污染。
洗涤过程要充分,以减少非特异性吸附。
显色反应应在避光条件下进行,终止反应后应尽快测定 OD 值。
不同批次的试剂盒可能存在差异,应避免混用。
结果分析
绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,对应的吸光度值为纵坐标,在坐标纸上绘制标准曲线,或使用软件(如 Excel、GraphPad Prism 等)进行线性回归分析,得到标准曲线方程。
上海笃玛生物科技有限公司