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产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8° |
品牌 | DUMABIO |
货号 | DM-X6466 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | |
检测限 | |
数量 | 999 |
包装规格 | 48/96T |
标记物 | |
样本 | |
应用 | |
是否进口 | 否 |
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)酶联免疫试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
产品货号:DM-X6466
产品规格:【48T/96T】
以下是小鼠基质金属蛋白酶抑制因子 2(TIMP - 2)酶联免疫试剂盒的详细介绍:
基本信息
产品名称:小鼠基质金属蛋白酶抑制因子 2(TIMP - 2)ELISA 试剂盒。
用途:用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其他生物样本中 TIMP - 2 的含量, 科研,不可用于临床诊断。
检测原理
采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。用纯化的小鼠 TIMP - 2 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 TIMP - 2,再与 HRP 标记的 TIMP - 2 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 TIMP - 2 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠 TIMP - 2 的浓度。
试剂盒组成
酶联板:一块(96 孔或 48 孔),已包被抗小鼠 TIMP - 2 抗体。
标准品:通常为冻干品,有一支原倍标准品,可按说明书要求稀释成不同浓度梯度,如 2000pg/ml、1000pg/ml、500pg/ml、250pg/ml、125pg/ml、62.5pg/ml、31.2pg/ml 等,同时样品稀释液可作为标准浓度 0pg/ml。
样品稀释液:用于稀释标准品和待测样品。
检测稀释液 A、B:分别用于稀释检测溶液 A 和检测溶液 B。
检测溶液 A、B:临用前分别以检测稀释液 A、B 按一定比例稀释,一般为 1:100 稀释。
底物溶液:TMB 显色液,用于显色反应。
终止液:一般为 2N H?SO?,用于终止显色反应。
样本收集与处理
血清:使用一次性的无热原、无内毒素试管,将全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清。避免使用溶血,标本悬浮物应离心去除。
血浆:用 EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可,采集后 30 分钟内于 2 - 8℃、1000×g 离心 15 分钟,取上清。
组织匀浆:用预冷的 PBS(0.01M,pH = 7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎,按一定的重量体积比加入含蛋白酶抑制剂的 PBS,于冰上充分研磨,也可进行超声破碎或反复冻融, 将匀浆液于 5000×g 离心 5 - 10 分钟,取上清检测。
细胞培养上清:1000×g 离心 20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存,避免反复冻融。
试剂盒性能
特异性:不与其它蛋白、细胞因子有交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均小于 10%。
注意事项
本产品仅供科研使用,不用于临床诊断。
试剂盒应在 2 - 8℃保存,使用前需平衡至室温。
实验中使用的吸头、试管等耗材应保持清洁,避免污染。
加样时应准确、快速,避免交叉污染。
洗涤过程要充分,以减少非特异性吸附。
显色反应应在避光条件下进行,终止反应后应尽快测定 OD 值。
不同批次的试剂盒可能存在差异,应避免混用。
结果分析
绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,对应的吸光度值为纵坐标,在坐标纸上绘制标准曲线,或使用软件(如 Excel、GraphPad Prism 等)进行线性回归分析,得到标准曲线方程。
上海笃玛生物科技有限公司