小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-X6468

产品规格：【48T/96T】

以下是小鼠基质金属蛋白酶抑制因子 4（TIMP - 4）酶联免疫试剂盒的详细介绍：
基本信息
产品名称：小鼠基质金属蛋白酶抑制因子 4（TIMP - 4）ELISA 试剂盒。
规格：有 48T 和 96T 两种。
储存条件：2 - 8℃。
用途：用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其他生物样本中 TIMP - 4 的含量， 科研使用，不得用于临床诊断。

检测原理
通常采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测法。将捕获抗体包被于酶标板上，用于捕获样品及标准品中的 TIMP - 4 蛋白。生物素化的检测抗体与 TIMP - 4 蛋白结合，然后 SABC 复合物与生物素化检测抗体结合，形成免疫复合物2。加入 TMB 显色液后，若反应孔中有 TIMP - 4 蛋白则显蓝色，加入终止液后变为黄色。用酶标仪在 450nm 处测 OD 值，TIMP - 4 蛋白浓度与 OD 值之间呈正比，通过绘制标准曲线可计算出标本中 TIMP - 4 的浓度。

样本收集与处理
血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激。将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可。也可将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。
血浆：用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的 30 分钟内于 2 - 8℃、1000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。
细胞培养物上清或其它生物标本：1000×g 离心 20 分钟，取上清即可检测。或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。
组织匀浆：用预冷的 PBS（0.01M，pH = 7.4）冲洗组织，去除残留血液。称重后将组织剪碎，按 1:9 的重量体积比（如 1g 组织样品对应 9mL PBS，可根据实验需要适当调整）加入含蛋白酶抑制剂的 PBS，于冰上充分研磨。为进一步裂解组织细胞，可对匀浆液进行超声破碎或反复冻融， 将匀浆液于 5000×g 离心 5 - 10 分钟，取上清检测。

试剂盒组成
酶标板：已包被抗小鼠 TIMP - 4 抗体的微孔板。
标准品：已知浓度的小鼠 TIMP - 4 蛋白，用于绘制标准曲线。
样品稀释液：用于稀释标准品和样品。
生物素化的检测抗体：与 TIMP - 4 抗原特异性结合。
HRP 标记的亲和素：与生物素化抗体结合，用于催化显色反应。
底物 TMB：在 HRP 酶的作用下发生显色反应。
终止液：一般为硫酸等，用于终止显色反应。
浓缩洗涤液：用蒸馏水稀释后用于洗涤酶标板，去除未结合的物质。
说明书：详细介绍试剂盒的使用方法、注意事项等。

试剂盒性能
特异性：不与其它蛋白、细胞因子有交叉反应。
重复性：板内、板间变异系数均小于 10%。

注意事项
试剂盒应在 2 - 8℃保存，使用前需平衡至室温。
实验中使用的吸头、试管等耗材应保持清洁，避免污染。
加样时应准确、快速，避免交叉污染。
洗涤过程要充分，以减少非特异性吸附。
显色反应应在避光条件下进行，终止反应后应尽快测定 OD 值。
不同批次的试剂盒可能存在差异，应避免混用。

结果分析

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。

上海笃玛生物科技有限公司