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产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8° |
品牌 | DUMABIO |
货号 | DM-X6468 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | |
检测限 | |
数量 | 999 |
包装规格 | 48/96T |
标记物 | |
样本 | |
应用 | |
是否进口 | 否 |
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)酶联免疫试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
产品货号:DM-X6468
产品规格:【48T/96T】
以下是小鼠基质金属蛋白酶抑制因子 4(TIMP - 4)酶联免疫试剂盒的详细介绍:
基本信息
产品名称:小鼠基质金属蛋白酶抑制因子 4(TIMP - 4)ELISA 试剂盒。
规格:有 48T 和 96T 两种。
储存条件:2 - 8℃。
用途:用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其他生物样本中 TIMP - 4 的含量, 科研使用,不得用于临床诊断。
检测原理
通常采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测法。将捕获抗体包被于酶标板上,用于捕获样品及标准品中的 TIMP - 4 蛋白。生物素化的检测抗体与 TIMP - 4 蛋白结合,然后 SABC 复合物与生物素化检测抗体结合,形成免疫复合物2。加入 TMB 显色液后,若反应孔中有 TIMP - 4 蛋白则显蓝色,加入终止液后变为黄色。用酶标仪在 450nm 处测 OD 值,TIMP - 4 蛋白浓度与 OD 值之间呈正比,通过绘制标准曲线可计算出标本中 TIMP - 4 的浓度。
样本收集与处理
血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激。将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可。也可将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
血浆:用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的 30 分钟内于 2 - 8℃、1000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测。或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
细胞培养物上清或其它生物标本:1000×g 离心 20 分钟,取上清即可检测。或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
组织匀浆:用预冷的 PBS(0.01M,pH = 7.4)冲洗组织,去除残留血液。称重后将组织剪碎,按 1:9 的重量体积比(如 1g 组织样品对应 9mL PBS,可根据实验需要适当调整)加入含蛋白酶抑制剂的 PBS,于冰上充分研磨。为进一步裂解组织细胞,可对匀浆液进行超声破碎或反复冻融, 将匀浆液于 5000×g 离心 5 - 10 分钟,取上清检测。
试剂盒组成
酶标板:已包被抗小鼠 TIMP - 4 抗体的微孔板。
标准品:已知浓度的小鼠 TIMP - 4 蛋白,用于绘制标准曲线。
样品稀释液:用于稀释标准品和样品。
生物素化的检测抗体:与 TIMP - 4 抗原特异性结合。
HRP 标记的亲和素:与生物素化抗体结合,用于催化显色反应。
底物 TMB:在 HRP 酶的作用下发生显色反应。
终止液:一般为硫酸等,用于终止显色反应。
浓缩洗涤液:用蒸馏水稀释后用于洗涤酶标板,去除未结合的物质。
说明书:详细介绍试剂盒的使用方法、注意事项等。
试剂盒性能
特异性:不与其它蛋白、细胞因子有交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均小于 10%。
注意事项
试剂盒应在 2 - 8℃保存,使用前需平衡至室温。
实验中使用的吸头、试管等耗材应保持清洁,避免污染。
加样时应准确、快速,避免交叉污染。
洗涤过程要充分,以减少非特异性吸附。
显色反应应在避光条件下进行,终止反应后应尽快测定 OD 值。
不同批次的试剂盒可能存在差异,应避免混用。
结果分析
绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,对应的吸光度值为纵坐标,在坐标纸上绘制标准曲线,或使用软件(如 Excel、GraphPad Prism 等)进行线性回归分析,得到标准曲线方程。
上海笃玛生物科技有限公司