小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-X6464

产品规格：【48T/96T】

以下是小鼠组织因子途径抑制物（TFPI）酶联免疫试剂盒的详细介绍：
基本信息
产品名称：小鼠组织因子途径抑制物（TFPI）ELISA 试剂盒
检测目的：用于测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中 TFPI 的含量。
试剂盒种属：小鼠。
检测方法：酶联免疫分析法。

试剂盒组成
酶标板：通常为 96 孔或 48 孔板，表面预先包被了抗小鼠 TFPI 的抗体，用于固定样本中的 TFPI 抗原。
标准品：一系列已知浓度的 TFPI 标准品，用于绘制标准曲线，从而根据样品的吸光度值计算出其 TFPI 含量。
生物素化的抗 TFPI 抗体：能特异性识别并结合 TFPI 抗原，形成抗原 - 抗体复合物。
HRP 标记的亲和素：与生物素化的抗体结合，通过辣根过氧化物酶（HRP）的催化作用，使底物显色。
显色剂 A 液和 B 液：通常为 TMB（四甲基联苯胺）等底物，在 HRP 的催化下发生颜色反应，颜色的深浅与样品中 TFPI 的浓度呈正相关。
终止液：一般为硫酸或盐酸等酸性溶液，用于终止显色反应，使颜色稳定，便于酶标仪读数。
洗涤缓冲液：用于洗涤酶标板，去除未结合的物质，减少非特异性吸附带来的干扰。

检测原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法。将纯化的抗小鼠 TFPI 抗体包被在微孔板上，制成固相载体。往包被抗 TFPI 抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗 TFPI 抗体、HRP 标记的亲和素，经过洗涤后用底物 TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），根据标准品的浓度及对应的 OD 值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的 OD 值，在回归方程上计算出对应的样品浓度。

样本要求
血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可，或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。
血浆：用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8℃ 1000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测，或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存，但应避免反复冻融。
组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01M, pH=7.4) 冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的 PBS（一般按 1:9 的重量体积比）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为进一步裂解组织细胞，可对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。 将匀浆液于 5000×g 离心 5-10 分钟，取上清检测。

试剂盒性能
检测范围：1.87pg/ml - 120pg/ml。
检测限：可达 1pg/ml。
特异性：可同时检测天然或重组的小鼠 TFPI，且与其他相关蛋白无交叉反应。
重复性：板内变异系数小于 10%，板间变异系数小于 15%。

结果分析

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。

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