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产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8° |
品牌 | DUMABIO |
货号 | DM-X6464 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | |
检测限 | |
数量 | 999 |
包装规格 | 48/96T |
标记物 | |
样本 | |
应用 | |
是否进口 | 否 |
小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)酶联免疫试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
产品货号:DM-X6464
产品规格:【48T/96T】
以下是小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)酶联免疫试剂盒的详细介绍:
基本信息
产品名称:小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA 试剂盒
检测目的:用于测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中 TFPI 的含量。
试剂盒种属:小鼠。
检测方法:酶联免疫分析法。
试剂盒组成
酶标板:通常为 96 孔或 48 孔板,表面预先包被了抗小鼠 TFPI 的抗体,用于固定样本中的 TFPI 抗原。
标准品:一系列已知浓度的 TFPI 标准品,用于绘制标准曲线,从而根据样品的吸光度值计算出其 TFPI 含量。
生物素化的抗 TFPI 抗体:能特异性识别并结合 TFPI 抗原,形成抗原 - 抗体复合物。
HRP 标记的亲和素:与生物素化的抗体结合,通过辣根过氧化物酶(HRP)的催化作用,使底物显色。
显色剂 A 液和 B 液:通常为 TMB(四甲基联苯胺)等底物,在 HRP 的催化下发生颜色反应,颜色的深浅与样品中 TFPI 的浓度呈正相关。
终止液:一般为硫酸或盐酸等酸性溶液,用于终止显色反应,使颜色稳定,便于酶标仪读数。
洗涤缓冲液:用于洗涤酶标板,去除未结合的物质,减少非特异性吸附带来的干扰。
检测原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法。将纯化的抗小鼠 TFPI 抗体包被在微孔板上,制成固相载体。往包被抗 TFPI 抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗 TFPI 抗体、HRP 标记的亲和素,经过洗涤后用底物 TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),根据标准品的浓度及对应的 OD 值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的 OD 值,在回归方程上计算出对应的样品浓度。
样本要求
血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可,或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
血浆:用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8℃ 1000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测,或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
组织匀浆:用预冷的 PBS (0.01M, pH=7.4) 冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的 PBS(一般按 1:9 的重量体积比)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为进一步裂解组织细胞,可对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。 将匀浆液于 5000×g 离心 5-10 分钟,取上清检测。
试剂盒性能
检测范围:1.87pg/ml - 120pg/ml。
检测限:可达 1pg/ml。
特异性:可同时检测天然或重组的小鼠 TFPI,且与其他相关蛋白无交叉反应。
重复性:板内变异系数小于 10%,板间变异系数小于 15%。
结果分析
绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,对应的吸光度值为纵坐标,在坐标纸上绘制标准曲线,或使用软件(如 Excel、GraphPad Prism 等)进行线性回归分析,得到标准曲线方程。
上海笃玛生物科技有限公司