小鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-X6462

产品规格：【48T/96T】

小鼠甲状腺结合球蛋白（TBG）酶联免疫试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆及其他生物液体中甲状腺结合球蛋白含量的试剂盒，以下是其详细介绍：
检测原理
通常采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒中的微孔板已预包被有针对小鼠 TBG 的特异性抗体。将标准品或样品加入到微孔板中，其中的 TBG 会与包被抗体结合。然后加入生物素标记的抗 TBG 抗体，它会与已结合在包被抗体上的 TBG 形成复合物。接着加入与辣根过氧化物酶（HRP）偶联的亲和素，亲和素会与生物素特异性结合，从而形成 “包被抗体 - TBG - 生物素标记抗体 - 酶联亲和素” 的复合物。加入底物 TMB 后，在 HRP 的催化下，TMB 转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中的 TBG 含量呈正相关，通过酶标仪在 450nm 波长处测量吸光度（OD 值），并与标准曲线对比，即可计算出样品中 TBG 的浓度。

试剂盒组成
预包被板：通常是 96 孔或 48 孔的微孔板，已预包被有抗小鼠 TBG 抗体。
标准品：一般为已知浓度的小鼠 TBG 蛋白，用于绘制标准曲线，以便对样品中的 TBG 进行定量分析。
检测试剂：包括生物素标记的抗 TBG 抗体、HRP 标记的亲和素等，用于与 TBG 特异性结合并进行信号放大。
底物溶液：如 TMB 底物液，在酶的催化下发生显色反应。
终止液：通常为硫酸溶液，用于终止酶 - 底物反应，使颜色稳定以便于测量。
洗涤缓冲液：用于洗涤微孔板，去除未结合的物质，减少非特异性吸附带来的干扰。
其他：还可能包括稀释缓冲液、封板膜等。

样本要求
可用于检测小鼠的血清、血浆、细胞培养上清等生物液体。血清和血浆样本的采集需注意避免溶血，细胞培养上清需确保细胞状态良好且培养过程无污染。

主要参数
检测范围：一般为 0.312 - 20ng/mL。
灵敏度：可达 0.145 - 0.188ng/mL 左右，能够检测到样品中微量的 TBG。
特异性：对小鼠 TBG 具有高度特异性，与其他类似蛋白或相关物质无明显交叉反应，能准确检测目标蛋白。
精密度：批内变异系数（CV）通常小于 10%，批间变异系数小于 12%，说明试剂盒的重复性和稳定性较好。

操作步骤
在各孔中加入标准品或样品各 100μL，37℃孵育 90 分钟。
加入 100μL 生物素化抗体工作液，37℃孵育 60 分钟。
洗涤 3 次，去除未结合的物质。
加入 100μL 酶结合物工作液，37℃孵育 30 分钟。
洗涤 5 次，进一步去除杂质。
加入 90μL 底物溶液，37℃孵育 15 分钟左右，观察颜色变化。
加入 50μL 终止液，立即在 450nm 波长处测量 OD 值。
根据标准曲线计算样品中 TBG 的浓度。

注意事项
试剂盒应在规定的温度下保存，如 - 20℃或 4℃，不同组分的保存条件可能不同，需严格按照说明书要求执行。
操作过程中应使用干净的移液器和吸头，避免交叉污染。
洗涤过程要充分，以确保去除未结合的物质，但也要注意避免过度洗涤导致已结合的物质被洗脱。
底物溶液应避光保存，使用时避免接触强光4。
严格按照说明书的操作步骤进行实验，包括孵育时间、温度和试剂加入量等，以确保结果的准确性。
所有样品、洗涤液和废弃物都应按生物安全要求进行处理，避免生物危害。

结果分析

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。

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